Ovariální injekce PRP (plazma bohatá na krevní destičky) versus normální fyziologický roztok u předčasné ovariální insuficience

V této pilotní studii bude zahrnuto 60 pacientů. Všechny pacientky budou mít předčasnou ovariální insuficienci (POR), které splňují alespoň dvě z následujících tří boloňských kritérií.

Pro všechny případy budou evidovány následující údaje: věk, váha, výška, menstruační anamnéza, předchozí těhotenství a jejich výsledek, ne. žijících dětí a věk nejmladších, příznaky v anamnéze, jak dlouho manželství, trvání neplodnosti a zda primární nebo sekundární. Odhad počtu antrálních folikulů (AFC) bude proveden u všech pacientů pomocí transvaginálního ultrazvuku (TVUS). Nakonec bude odebrán vzorek krve pro následující laboratoř. Vyšetření: FSH, LH, E2, AMH, TSH, Prolaktin před zařazením pacientů do studie.

Po úplném vysvětlení postupů a očekávání studie podepíší všichni pacienti písemný souhlas. Pacienti budou randomizováni do 2 skupin (A&B). Všichni podstoupí transvaginální intervenci pomocí jehly 17 G pro odběr vajíčka. Skupinu A tvoří 30 pacientů, kterým bude aplikována PRP (autologní injekce plazmy bohaté na destičky) s aktivací chloridem vápenatým. Skupinu B tvoří 30 pacientů, kteří dostanou normální inj. 0,9 % Nacl.

Vzorová příprava PRP:

Podle klasifikace navržené Ehrenfestem jsou definovány 4 různé typy PRP v závislosti na obsahu buněk a přítomnosti fibrinu. S ohledem na klasifikaci PRP v této případové studii se používá jako komerční typ PRP se systémem nižší koncentrace (2,5 x 3 krát), Ycellbio PRP. Proces bude prováděn za přísných aseptických podmínek a také za optimálních teplotních předpisů, tj. 21-24 °C. PRP bude připraven podle pokynů výrobce. Natáhněte 1 CC antikoagulant (citrát sodný) do 20 CC injekční stříkačky. Potřete vnitřní stěny stříkačky nataženým antikoagulantem. Poté odeberte 14 CC krve za zcela aseptických podmínek do stříkačky 20 CC. Pomalu švihejte stříkačkou, aby se krev a antikoagulant dobře promíchaly. Pomalu vstříkněte krev do zkumavky Ycellbio. Narovnejte zkumavku, když krev dosáhne Y-nálevky. Vstříkněte krev do Ycellbiotube na vhodnou úroveň, jak je naznačeno čarami. Zkumavku Ycellbio uzavřete silikonovou zátkou pomocí pinzety. Centrifugujte při 3500 ot./min v čase 5 min. Po uplynutí 5 min. spin, Buffy coat je dobře viditelný. Otočením ovladače upravíte výšku buffy coat podle vyznačené linie. Otočením ovladače upravíte výšku buffy coat podle vyznačené linie. Připravte si jehlu 18 G ½ a stříkačku 3 CC pro odběr PRP. Otevřete silikonovou zátku pomocí bavlny napuštěné alkoholem. Extrahujte 2,0 CC PRP za pomalého kroužení jehlou v oblasti PRP do stříkačky 3 CC. Stejný postup se provede pro další 3 vzorky krve, aby bylo celkem 8 ml PRP, které se použije pro oba vaječníky.

V posledním kroku se odebere objem bezprostředně nad vrstvou erytrocytů. Glukonát vápenatý v konc. 1:9 bude použit jako aktivátor. Po aktivaci, během doby kratší než 2 minuty, budou pomocí TVUS injikovány přibližně 4 ml PRP do každého vaječníku.

Sledování a sledování:

Po aplikaci procedury v každé skupině po 3 měsících budou pečlivě sledovány změny hormonů 3. den menstruačního cyklu: FSH, LH, estradiol, AMH. Vyšetřovatelé budou také sledovat počet antrálních folikulů a změny v menstruačních cyklech a spontánní ovulaci před a po 3 měsících.