Injeção ovariana de PRP (plasma rico em plaquetas) versus solução salina normal em insuficiência ovariana prematura

Neste estudo piloto, 60 pacientes serão incluídos. Todas as pacientes terão insuficiência ovariana prematura (PORs) que atendem a pelo menos dois dos três critérios de Bolonha a seguir.

Serão registados os seguintes dados para todos os casos: idade, peso, altura, história menstrual, gravidezes anteriores e seu desfecho, nº. de filhos vivos e idade do mais novo, histórico de sintomas, tempo de casado, duração da infertilidade e se primária ou secundária. A estimativa da contagem de folículos antrais (AFC) será feita para todos os pacientes por ultrassom transvaginal (TVUS). Por fim, uma amostra de sangue será retirada para o laboratório seguinte. Investigações: FSH, LH, E2, AMH, TSH, Prolactina antes da inclusão dos pacientes no estudo.

Um formulário de consentimento por escrito será assinado por todos os pacientes após explicação completa dos procedimentos e das expectativas do estudo. Os pacientes serão randomizados em 2 grupos (A&B). Todas passarão por uma intervenção transvaginal através de uma agulha captadora de óvulos 17 G para o procedimento. O grupo A é composto por 30 pacientes, que receberão PRP (injeção autóloga de plasma rico em plaquetas) com ativação com cloreto de cálcio. O grupo B é composto por 30 pacientes, que receberão uma injeção de solução salina normal. 0,9% Nacl.

Preparação da amostra do PRP:

De acordo com a classificação proposta por Ehrenfest, são definidos 4 tipos diferentes de PRP, dependendo do conteúdo das células e da presença de fibrina. No que diz respeito à classificação do PRP neste estudo de caso, ele é usado como um tipo comercial de PRP com o sistema de menor concentração (2,5 x 3 vezes), Ycellbio PRP. O processo será realizado sob condições assépticas estritas, bem como regulações de temperatura ideais, ou seja, 21-24°C. O PRP será preparado de acordo com as orientações do fabricante. Desenhe 1 anticoagulante CC (citrato de sódio) em uma seringa de 20 CC. Cubra as paredes internas da seringa com o anticoagulante desenhado. Em seguida, extraia 14 CC de sangue em condições assépticas completas para uma seringa de 20 CC. Balance a seringa lentamente para misturar bem o sangue e o anticoagulante. Injete o sangue lentamente no tubo Ycellbio. Endireite o tubo quando o sangue atingir o funil em Y. Injete o sangue no Ycellbiotube até o nível apropriado, conforme indicado pelas linhas. Feche o tubo Ycellbio com rolha de silicone usando uma pinça. Centrifugue a 3500 RPM no tempo 5 min. Após os 5 min. girar, o Buffy coat é bem visível. Gire o controlador para ajustar a altura do buffy coat à linha marcada. Gire o controlador para ajustar a altura do buffy coat à linha marcada. Prepare uma agulha de 18 G ½ e uma seringa de 3 CC para a colheita de PRP. Abra a rolha de silicone usando um algodão embebido em álcool. Extraia 2,0 CC PRP enquanto gira lentamente a agulha na área do PRP em uma seringa de 3 CC. O mesmo processo é feito para mais 3 amostras de sangue para ter um total de 8 ml de PRP a ser usado para ambos os ovários.

Na última etapa, será coletado o volume imediatamente acima da camada eritrocitária. Gluconato de cálcio em concentrado 1:9 será usado como um ativador. Após a ativação, em um período inferior a 2 min, serão injetados aproximadamente 4 ml do PRP em cada ovário por USTV.

Monitoramento e acompanhamento:

As mudanças nos hormônios no dia 3 do ciclo menstrual: FSH, LH, estradiol, AMH serão monitoradas de perto, após a aplicação do procedimento em cada grupo após 3 meses. Os investigadores também irão monitorar o número de folículos antrais e mudanças nos ciclos menstruais e ovulação espontânea antes e depois de 3 meses.