Iniezione ovarica di PRP (plasma ricco di piastrine) vs soluzione salina normale nell'insufficienza ovarica prematura

In questo studio pilota saranno inclusi 60 pazienti. Tutte le pazienti avranno un'insufficienza ovarica prematura (POR) che soddisfano almeno due dei seguenti tre criteri di Bologna.

Per tutti i casi verranno registrati i seguenti dati: età, peso, altezza, anamnesi mestruale, gravidanze pregresse e loro esito, n. di figli vivi ed età dei più piccoli, sintomi anamnestici, matrimonio da quanto tempo, durata dell'infertilità e se primaria o secondaria. La stima della conta dei follicoli antrali (AFC) sarà effettuata per tutti i pazienti mediante ecografia transvaginale (TVUS). Infine, verrà prelevato un campione di sangue per il laboratorio successivo. Indagini: FSH, LH, E2, AMH, TSH, Prolattina prima dell'inclusione dei pazienti nello studio.

Un modulo di consenso scritto sarà firmato da tutti i pazienti dopo una completa spiegazione delle procedure e delle aspettative della sperimentazione. I pazienti saranno randomizzati in 2 gruppi (A e B). Tutte subiranno un intervento transvaginale attraverso un ago prelievo ovuli 17 G per la procedura. Il gruppo A è composto da 30 pazienti, che riceveranno un PRP (iniezione di plasma ricco di piastrine autologo) con attivazione con cloruro di calcio. Il gruppo B è composto da 30 pazienti, che riceveranno una normale somministrazione di soluzione fisiologica. 0,9% nacl.

Preparazione del campione del PRP:

Secondo la classificazione proposta da Ehrenfest, vengono definiti 4 diversi tipi di PRP, a seconda del contenuto di cellule e della presenza di fibrina. Per quanto riguarda la classificazione del PRP in questo caso di studio, viene utilizzato come tipo commerciale di PRP con il sistema a concentrazione inferiore (2,5 x 3 volte), Ycellbio PRP. Il processo sarà eseguito in condizioni rigorose di asepsi e regolazioni di temperatura ottimali, ovvero 21-24°C. Il PRP sarà preparato secondo le linee guida del produttore. Aspirare anticoagulante 1 CC (citrato di sodio) in una siringa da 20 CC. Rivestire le pareti interne della siringa con l'anticoagulante disegnato. Quindi prelevare 14 CC di sangue in completa condizione asettica in una siringa da 20 CC. Oscillare lentamente la siringa per miscelare bene sangue e anticoagulante. Iniettare lentamente il sangue nella provetta Ycellbio. Raddrizzare il tubo quando il sangue raggiunge l'imbuto a Y. Iniettare il sangue nel Ycellbiotube al livello appropriato come indicato dalle linee. Chiudere la provetta Ycellbio con tappo in silicone utilizzando una pinza. Centrifugare a 3500 RPM al tempo 5 min. Dopo i 5 min. girare, il cappotto Buffy è ben visibile. Ruota il controller per regolare l'altezza del buffy coat sulla linea segnata. Ruota il controller per regolare l'altezza del buffy coat sulla linea segnata. Preparare un ago da 18 G ½ e una siringa da 3 CC per la raccolta PRP. Aprire il tappo in silicone utilizzando un batuffolo di cotone imbevuto di alcol. Estrarre 2.0 CC PRP ruotando lentamente l'ago nell'area del PRP in una siringa da 3 CC. Lo stesso processo viene eseguito per altri 3 campioni di sangue per avere un totale di 8 ml di PRP da utilizzare per entrambe le ovaie.

Nell'ultima fase, verrà raccolto il volume immediatamente sopra lo strato di eritrociti. Gluconato di calcio in conc. 1:9 verrà utilizzato come attivatore. Dopo l'attivazione, in un periodo inferiore a 2 minuti, circa 4 ml di PRP saranno iniettati in ciascuna ovaia mediante TVUS.

Monitoraggio e monitoraggio:

I cambiamenti negli ormoni al giorno 3 del ciclo mestruale: FSH, LH, estradiolo, AMH saranno attentamente monitorati,dopo l'applicazione della procedura in ciascun gruppo dopo 3 mesi. Gli investigatori monitoreranno anche il numero di follicoli antrali e i cambiamenti nei cicli mestruali e l'ovulazione spontanea prima e dopo 3 mesi.