Vyhodnotit klinickou bezpečnost a účinnost limbálních kmenových buněk pro léčbu povrchových patologií rohovky“.

Jednalo by se o jednocentrovou prospektivní, otevřenou, nerandomizovanou intervenční studii. Tato studie je studií zahájenou výzkumníkem (IIS). Etická komise LV Prasad Eye Institute, Hyderabad, by tuto studii výhledově schválila. Tato studie by byla provedena v přísném souladu s principy Helsinské deklarace, ICH GCP E6 (R2), indických pokynů GCP a nových léků a pravidel klinického hodnocení 2019 a souvisejících dodatků a současných národních etických pokynů pro biomedicínský a zdravotní výzkum zahrnující lidské zdraví. Účastníci a aktuální národní směrnice pro výzkum kmenových buněk a nová léčiva a pravidla klinických studií 2019.

Jakmile se zjistí, že účastníci jsou vhodní pro operaci transplantace limbu, bude pacientům poskytnut písemný informovaný souhlas a audio/vizuální souhlas podle předpisů. Bude provedeno podrobné oční vyšetření, aby se zajistilo, že pacient je způsobilý pro zkoušku.

Všechny screeningové postupy budou provedeny během 14 ± 7 dnů. V den 0, který je datem operace, bude každému pacientovi přiděleno jedinečné identifikační číslo účastníka (UPIN), které bude navíc k číslu nemocničního lékařského záznamu. Operace bude provedena v lokální nebo celkové anestezii (v závislosti na věku a preferenci pacienta).

V této prospektivní intervenční studii pacienti s jednostrannými povrchovými jizvami rohovky podstoupí chirurgický zákrok. Odebírá se limbální prstenec z kadaverózní tkáně dárce, který je terapeuticky akceptován a sérologicky testován. Tato tkáň bude poté kultivována v laboratoři biologie kmenových buněk za použití standardizované kultivační techniky. Krátce bude limbální tkáň rozřezána na malé kousky a štěpena přes noc pomocí enzymu (kolagenázy L). Buňky získané z digestu budou kultivovány na Petriho misce s použitím 2% séra a růstových faktorů. Kultivované buňky budou třikrát pasážovány, aby se z kultury odstranily všechny epiteliální buňky.

Ve druhém postupu budou způsobilí pacienti podstupovat transplantaci rohovky, kdy bude pomocí chirurgické houby odstraněn centrální epitel rohovky. Na debrideované stroma rohovky bude aplikováno 0,1 ml stromálních buněk v koncentraci 0,5x106 buněk/µl zředěných v trombinové složce fibrinového lepidla (TISEEL, Baxter). Na konci procedury se na rohovku umístí měkká bandážová kontaktní čočka. V pooperačním období bude pacient dostávat lokální antibiotické a steroidní oční kapky. Periodické komplexní oftalmologické hodnocení spolu se skenováním předního segmentu optickou koherentní tomografií (ASOCT) a fotografováním štěrbinovou lampou bude provedeno v den 1, den 7, den 30, den 90, den 180 a den 360 a 720 dnů po operaci. Primárním výstupním měřítkem této studie je zaznamenat jakékoli oční nebo systémové nežádoucí účinky této intervence v různých pooperačních časových bodech. Sekundární výsledná opatření jsou vizuální zlepšení a změna v hustotě a vzhledu jizev na rohovce a dalších patologií po léčbě.