Tato stránka byla automaticky přeložena a přesnost překladu není zaručena. Podívejte se prosím na anglická verze pro zdrojový text.

Emoční regulace u dětí s ND: Role genomických variací, proteomických vzorců a raných zkušeností

17. října 2023 aktualizováno: IRCCS Eugenio Medea

Emocionálně-behaviorální regulace u dětí s neurovývojovým postižením: Průzkumné zkoumání role genomických variací, proteomických vzorců a kvality raných zkušeností

Děti s neurovývojovým postižením (ND) představují heterogenní populaci charakterizovanou širokou škálou klinických diagnóz (např. dětská mozková obrna, smyslové postižení, psychomotorická retardace), které jsou spojeny s různými deficity, které se objevují v raném věku dítěte. Ačkoli bylo široce prokázáno, že děti s ND vykazují několik rozdílů v sociálně-emocionálních dovednostech a emočně-behaviorální regulaci, základní mechanismy, které jsou spojeny s více či méně narušenými vývojovými trajektoriemi, zůstávají stále částečně neprozkoumané. Zatímco několik studií zkoumalo roli biologických a environmentálních faktorů v emoční regulaci chování typicky se vyvíjejících dětí nebo dětí s rizikovými stavy jinými než ND (např. děti, které jsou oběťmi špatného zacházení), malý výzkum společně prozkoumal roli metylace, polymorfismy a environmentální zkušenosti v emocionálně-behaviorální regulaci dětí s ND během prvních let života. Cílem tohoto projektu je prozkoumat biologické (methylace DNA, polymorfní varianty a proteomika) a environmentální (např. bolestivé a/nebo invazivní ošetřovatelské postupy, blízkost a fyzický kontakt) faktory, které mohou být spojeny s regulací emočního chování dětí. s ND.

Přehled studie

Postavení

Nábor

Podmínky

Intervence / Léčba

Detailní popis

Východiska: Děti s neurovývojovým postižením (ND) jsou heterogenní populací charakterizovanou širokou škálou klinických diagnóz, které jsou spojeny s různými deficity, které se objevují v kojeneckém a dětském věku. Ačkoli se diagnostický rámec může lišit, několik studií zjistilo, že děti s ND sdílejí snížené sociálně-vztahové dovednosti, charakterizované nižšími schopnostmi interaktivní a dyadické pozornosti a sníženým používáním interpersonálních komunikačních podnětů. Ačkoli bylo široce prokázáno, že děti s ND vykazují několik rozdílů v sociálně-emocionálních dovednostech a regulaci emočního chování, základní mechanismy, které jsou spojeny s více či méně narušenými trajektoriemi, zůstávají částečně neprozkoumané.

Primární cíl: prozkoumat na vzorku dětí s ND ve věku 3 až 24 měsíců příspěvek 1) methylace kandidátních genů (např. OXTR, SLC6A4, BDNF a DRD4), 2) polymorfismů v emočně-behaviorální regulaci a 3 ) environmentální zkušenosti (tj. nepříznivé zkušenosti a kvalita rodičovského chování) v emocionálně-behaviorální regulaci.

Sekundární cíl: 1) prozkoumat možnou souvislost mezi proteomikou a emočně-behaviorální regulací na vzorku dětí s ND ve věku 3 až 24 měsíců; 2) identifikovat funkční a strukturální vzorce kandidátských genů spojených s regulací emočního chování použitím výpočetního přístupu. Budou také identifikovány moduly genů potenciálně spojené se sociálně-emocionálním vývojem v sítích interakce a časoprostorové koexprese v mozku.

Plánované aktivity:

Metody: projekt zahrnuje klinickou skupinu dětí s NCH a jejich matek a kontrolní skupinu typicky se vyvíjejících dětí a jejich matek. Vzhledem k povaze skupin je studie kvazi-experimentální výzkumný design.

Studie zahrnuje následující postupy:

  • odběr biologického materiálu: odběr slin neinvazivními modalitami a soupravou Oragene OG575 (Genotek DNA) a odběr moči neinvazivními modalitami.
  • administrace dotazníků a deníku blízkosti: matka (jak pro klinickou skupinu, tak pro kontrolní skupinu) bude požádána o vyplnění některých dotazníků týkajících se jejich nálady, obvyklého chování a vývoje dítěte. Bude také hodnoceno, kolik a jakým způsobem matka utrácí ve fyzickém kontaktu (např. čas strávený laskáním dítěte; čas strávený držením dítěte; čas strávený, když je dítě přiloženo k matčině prsu). Tato data budou odvozena pomocí přepracované verze „deníku blízkosti“ Raiskily et al. implementované v elektronickém formátu ve formě APP (APP: inContatto);
  • natáčení interakce mezi rodiči a dítětem v polostrukturovaném kontextu v 5 různých fázích v souladu s paradigmatem Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.

Interakce budou nahrány na video pro následné kódování chování pomocí různých kódovacích nástrojů. Emocionálně-behaviorální regulace dítěte bude kódována pomocí kódovacích systémů: a) Fáze zapojení kojence a pečovatele, b) Regulační skórovací systém kojenců a mateřský regulační skórovací systém od společnosti Tronik. Kromě toho bude chování kojenců a matek kódováno pomocí kódovacího systému Global Rating Scale od Murrayho a chování matek při dotyku pomocí Mateřského dotykového kódovacího systému od Provenzi.

Typ studie

Pozorovací

Zápis (Odhadovaný)

248

Kontakty a umístění

Tato část poskytuje kontaktní údaje pro ty, kteří studii provádějí, a informace o tom, kde se tato studie provádí.

Studijní kontakt

Studijní místa

Kritéria účasti

Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.

Kritéria způsobilosti

Věk způsobilý ke studiu

3 měsíce až 2 roky (Dítě)

Přijímá zdravé dobrovolníky

Ano

Metoda odběru vzorků

Vzorek nepravděpodobnosti

Studijní populace

Děti s ND a jejich matky budou rekrutovány prostřednictvím po sobě jdoucích a výhodných vzorků v U.O.C. „Speciální rehabilitace – neuropsychiatrické patologie vývojového věku“ a U.O.C. "Funkční rehabilitace" Vědeckého ústavu "E. Medea“ (stránky Bosisio Parini). Děti s typickým vývojem a jejich matky se budou rekrutovat z mateřských škol v provincii Lecco. Po zhlédnutí informativního dopisu popisujícího obecný výzkum budou matky telefonicky kontaktovány a vyzvány k dobrovolné účasti.

Popis

Kritéria pro zařazení:

Děti s ND:

  • Věk mezi 3 a 24 měsíci (chronologicky nebo opraveno v případě předčasně narozených dětí);
  • mírné až střední opoždění vývoje dokumentované klinickými příznaky (např. příznaky poranění mozku při neurologickém vyšetření nebo neurozobrazování) nebo vývojovými stupnicemi (tj. stupnice Griffiths III) spojené s různými diagnózami (např. dětská mozková obrna, nedonošenost);
  • nepřítomnost genetických syndromů. K posouzení celkové úrovně vývoje dítěte bude použita škála Griffiths III.

Typické vývojové děti:

  • narození do termínu;
  • věk mezi 3 a 24 měsíci (chronologicky);
  • nepřítomnost peri- nebo postnatální patologie.

Kritéria pro zařazení matek (DN a typický vývoj):

  • věk nad 18 let;
  • dobrá znalost italského jazyka;
  • nepřítomnost kognitivních obtíží a/nebo psychiatrických poruch;
  • žádný příjem psychotropních léků;
  • není součástí neúplné rodiny.

Kritéria vyloučení: viz kritéria pro zařazení.

Studijní plán

Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.

Jak je studie koncipována?

Detaily designu

  • Observační modely: Case-Control
  • Časové perspektivy: Průřezový

Kohorty a intervence

Skupina / kohorta
Intervence / Léčba
děti s ND
děti s neurovývojovým postižením (ND) ve věku od 3 do 24 měsíců (chronologicky nebo korigované v případě dětí narozených předčasně).
Diagnostický test: Analýza methylace DNA
Genomová DNA bude extrahována z 0,4 ml alikvotů každého vzorku slin pomocí protokolu navrženého výrobcem soupravy, kvantifikována pomocí Qubit 2.0 (Invitrogen) a skladována při -20 °C. Alikvoty 250 ng každé DNA budou upraveny pro methylační analýzu pomocí sady EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research). Amplifikace vzorků a jejich příprava pro NGS sekvenování bude provedena tak, jak je popsáno. Vzorky budou sekvenovány na NextSeq 500 (Illumina). Jednotlivé zpracované sekvence (PE čtení) budou nezávisle porovnány s referenčními sekvencemi pomocí paralelního Smith-Watermanova algoritmu. Zachovají se pouze čtení, která jsou konzistentně zarovnána se stejnou referenční sekvencí. Na každém místě CpG v každé analyzované sekvenci budou vyhodnoceny frekvence čtyř bází a uvedeny do tabulky.
Diagnostický test: Proteomická analýza
Vzorky moči se odebírají za použití neinvazivních metod a připravují se podle postupu přípravy na kvantitativní získání exozomů: po rozmrazení a centrifugaci při 17 000 x g po dobu 10 minut při teplotě 4 °C se získané supernatanty oddělí a odstředí při 200 000 x g po dobu 1 h při 4 °C. Exosomové pelety se oddělí, opakovaně promyjí a resuspendují v pufru (NH4HC03, 0,1 mM ph=7,8). Koncentrace proteinu se odhadne pomocí soupravy SPNTM Protein Assay a každý vzorek (50 ± 0,5 μg proteinu) se štěpí trypsinem za použití poměru enzym/substrát 1:50 (w/w) při 37 °C přes noc (o/w). Druhé tryptické štěpení se provádí s poměrem enzym:substrát 1:100 (hmotn./hmotn.) po dobu 4 hodin. Natrávené vzorky, centrifugované při 13 000 x g po dobu 10 minut, jsou purifikovány a koncentrovány pomocí PepClean C-18 kolon. Získané vzorky se analyzují kapalinovou chromatografií s reverzní fází spojenou s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením.
Diagnostický test: Still Face Paradigm
Během pozorovacího sezení bude pořízen krátký videozáznam interakce matka-dítě v délce přibližně 10 minut v polostrukturovaném prostředí, aby se posoudila emoční regulace a sociální chování dítěte. Interakce bude strukturována do 5 různých fází podle paradigmatu Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Hra: Matky budou vyzvány, aby 10 minut komunikovaly se svými dětmi; Přesto: matky budou požádány, aby zůstaly v klidu a zachovaly si bezvýraznou tvář a neusmívaly se, nedotýkaly se ani na něj nemluvily po dobu 2 minut (Still#1: 2 minuty; Still#2: 2 minuty); Shledání: matky budou požádány, aby obnovily herní aktivitu se svými vlastními na další 2 minuty (Shledání č. 1: 2 minuty; Shledání č. 2: 2 minuty).
Typické vyvinuté děti (TD)
děti s typickým vývojovým věkem mezi 3 a 24 měsíci (chronologicky).
Diagnostický test: Analýza methylace DNA
Genomová DNA bude extrahována z 0,4 ml alikvotů každého vzorku slin pomocí protokolu navrženého výrobcem soupravy, kvantifikována pomocí Qubit 2.0 (Invitrogen) a skladována při -20 °C. Alikvoty 250 ng každé DNA budou upraveny pro methylační analýzu pomocí sady EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research). Amplifikace vzorků a jejich příprava pro NGS sekvenování bude provedena tak, jak je popsáno. Vzorky budou sekvenovány na NextSeq 500 (Illumina). Jednotlivé zpracované sekvence (PE čtení) budou nezávisle porovnány s referenčními sekvencemi pomocí paralelního Smith-Watermanova algoritmu. Zachovají se pouze čtení, která jsou konzistentně zarovnána se stejnou referenční sekvencí. Na každém místě CpG v každé analyzované sekvenci budou vyhodnoceny frekvence čtyř bází a uvedeny do tabulky.
Diagnostický test: Proteomická analýza
Vzorky moči se odebírají za použití neinvazivních metod a připravují se podle postupu přípravy na kvantitativní získání exozomů: po rozmrazení a centrifugaci při 17 000 x g po dobu 10 minut při teplotě 4 °C se získané supernatanty oddělí a odstředí při 200 000 x g po dobu 1 h při 4 °C. Exosomové pelety se oddělí, opakovaně promyjí a resuspendují v pufru (NH4HC03, 0,1 mM ph=7,8). Koncentrace proteinu se odhadne pomocí soupravy SPNTM Protein Assay a každý vzorek (50 ± 0,5 μg proteinu) se štěpí trypsinem za použití poměru enzym/substrát 1:50 (w/w) při 37 °C přes noc (o/w). Druhé tryptické štěpení se provádí s poměrem enzym:substrát 1:100 (hmotn./hmotn.) po dobu 4 hodin. Natrávené vzorky, centrifugované při 13 000 x g po dobu 10 minut, jsou purifikovány a koncentrovány pomocí PepClean C-18 kolon. Získané vzorky se analyzují kapalinovou chromatografií s reverzní fází spojenou s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením.
Diagnostický test: Still Face Paradigm
Během pozorovacího sezení bude pořízen krátký videozáznam interakce matka-dítě v délce přibližně 10 minut v polostrukturovaném prostředí, aby se posoudila emoční regulace a sociální chování dítěte. Interakce bude strukturována do 5 různých fází podle paradigmatu Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Hra: Matky budou vyzvány, aby 10 minut komunikovaly se svými dětmi; Přesto: matky budou požádány, aby zůstaly v klidu a zachovaly si bezvýraznou tvář a neusmívaly se, nedotýkaly se ani na něj nemluvily po dobu 2 minut (Still#1: 2 minuty; Still#2: 2 minuty); Shledání: matky budou požádány, aby obnovily herní aktivitu se svými vlastními na další 2 minuty (Shledání č. 1: 2 minuty; Shledání č. 2: 2 minuty).

Co je měření studie?

Primární výstupní opatření

Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Stav metylace kojenecké DNA
Časové okno: 1 den při náboru
Stav metylace DNA (tj. procento) kandidátních genů (např. OXTR, SLC6A4, BDNF a DRD4) bude hodnoceno ze vzorků slin získaných od kojenců.
1 den při náboru
Regulace chování kojenců
Časové okno: 1 den při náboru
Regulace chování dítěte (tj. negativní emocionalita) bude kódována mikroanaliticky (tj. sekundu po sekundě) z videokazet interakcí matka-dítě.
1 den při náboru

Sekundární výstupní opatření

Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Proteomické vzorce kojenců
Časové okno: 1 den při náboru
Proteomické vzorce budou hodnoceny na relativní množství a posttranslační modifikace kandidátních proteinů, o kterých se předpokládá, že se podílejí na stresové reakci u kojenců.
1 den při náboru

Spolupracovníci a vyšetřovatelé

Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.

Sponzor

IRCCS Eugenio Medea

Termíny studijních záznamů

Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.

Hlavní termíny studia

Začátek studia (Aktuální)

7. dubna 2021

Primární dokončení (Odhadovaný)

30. listopadu 2023

Dokončení studie (Odhadovaný)

31. prosince 2023

Termíny zápisu do studia

První předloženo

30. července 2021

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

12. srpna 2021

První zveřejněno (Aktuální)

13. srpna 2021

Aktualizace studijních záznamů

Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)

18. října 2023

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

17. října 2023

Naposledy ověřeno

1. října 2023

Více informací

Termíny související s touto studií

Další identifikační čísla studie

  • RC2021_820

Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty

Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA

Ne

Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA

Ne

Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .

Předplatit