- ICH GCP
- US Clinical Trials Registry
- Klinisk forsøg NCT05004090
Følelsesmæssig regulering hos børn med ND: Rollen af genomisk variation, proteomiske mønstre og tidlig erfaring
Følelsesmæssig adfærdsregulering hos børn med neurodevelopmental handicap: en eksplorativ undersøgelse af rollen af genomisk variation, proteomiske mønstre og kvaliteten af tidlig erfaring
Studieoversigt
Status
Detaljeret beskrivelse
Baggrund: Børn med neuroudviklingshandicap (ND) er en heterogen befolkningsgruppe karakteriseret ved en bred vifte af kliniske diagnoser, som er forbundet med forskellige underskud, der opstår i spædbarns- og barndommen. Selvom diagnostisk ramme kan variere, observerede flere undersøgelser, at børn med ND deler reducerede social-relationelle færdigheder, karakteriseret ved lavere interaktive og dyadiske opmærksomhedsevner og nedsat brug af interpersonelle kommunikationssignaler. Selvom det er blevet bredt påvist, at børn med ND udviser adskillige forskelle i social-emotionelle færdigheder og følelsesmæssig adfærdsregulering, forbliver de underliggende mekanismer, der er forbundet med mere eller mindre svækkede baner, delvist uudforskede.
Primært mål: at udforske i en prøve af børn med ND i alderen 3 til 24 måneder bidraget af 1) methylering af kandidatgener (f.eks. OXTR, SLC6A4, BDNF og DRD4), 2) polymorfier i følelsesmæssig adfærdsregulering og 3 ) miljøoplevelse (dvs. negative oplevelser og kvaliteten af forældrenes adfærd) i følelsesmæssig adfærdsregulering.
Sekundært mål: 1) at udforske en mulig sammenhæng mellem proteomik og følelsesmæssig adfærdsregulering i en prøve af børn med ND i alderen mellem 3 og 24 måneder; 2) at identificere funktionelle og strukturelle mønstre af kandidatgener forbundet med følelsesmæssig adfærdsregulering ved at anvende en beregningsmæssig tilgang. Moduler af gener, der potentielt er forbundet med social-emotionel udvikling i netværk af interaktion og spatio-temporal co-ekspression i encephalon vil også blive identificeret.
Planlagte aktiviteter:
Metoder: projektet involverer en klinisk gruppe af børn med ND og deres mødre og en kontrolgruppe af typisk udviklede børn og deres mødre. På grund af gruppernes karakter er undersøgelsen et kvasi-eksperimentelt forskningsdesign.
Undersøgelsen omfatter følgende procedurer:
- indsamling af biologisk materiale: spytopsamling ved hjælp af ikke-invasive modaliteter og Oragene OG575-kittet (Genotek DNA) og urinopsamling ved hjælp af ikke-invasive modaliteter.
- administration af spørgeskemaer og dagbog over nærhed: Moderen (både for den kliniske gruppe og for kontrolgruppen) vil blive bedt om at udfylde nogle spørgeskemaer vedrørende deres humør, vanemæssige adfærd og barnets udvikling. Det vil også blive evalueret, hvor meget og på hvilken måde moderen bruger på fysisk kontakt (f.eks. tid brugt på at kærtegne barnet; tid brugt på at holde barnet; tid brugt, når barnet er knyttet til moderens bryst). Disse data vil blive udledt ved brug af en genbrugsversion af Raiskila et al.'s "nærhedsdagbog" implementeret i et elektronisk format i form af en APP (APP: inContatto);
- videooptagelse af forældre-barn-interaktionen i en semistruktureret kontekst i 5 forskellige faser i overensstemmelse med Still Face-paradigmet (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Interaktioner vil blive videofilmet til efterfølgende adfærdsmæssig kodning ved hjælp af forskellige kodningsværktøjer. Barnets følelsesmæssige adfærdsregulering vil blive kodet ved hjælp af kodesystemerne: a) Infant and Caregiver Engagement Phase, b) Infant Regulatory Scoring System og Maternal Regulatory Scoring System af Tronik. Derudover vil spædbørns og moderens adfærd blive kodet ved hjælp af Global Rating Scale-kodningssystemet fra Murray og moderens berøringsadfærd ved hjælp af Maternal Touch Coding System fra Provenzi.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Anslået)
Kontakter og lokationer
Studiekontakt
- Navn: Rosario Montirosso
- Telefonnummer: +39031877494
- E-mail: rosario.montirosso@lanostrafamiglia.it
Studiesteder
-
-
Lecco
-
Bosisio Parini, Lecco, Italien, 23842
- Rekruttering
- IRCCS E. Medea
-
Kontakt:
- Rosario Montirosso
- Telefonnummer: +39031877494
- E-mail: rosario.montirosso@lanostrafamiglia.it
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
Børn med ND:
- Alder mellem 3 og 24 måneder (kronologisk eller korrigeret i tilfælde af børn født for tidligt);
- mild til moderat udviklingsforsinkelse dokumenteret af kliniske tegn (f.eks. symptomer på hjerneskade ved neurologisk undersøgelse eller neuroimaging) eller af udviklingsskalaer (dvs. Griffiths III-skalaer) forbundet med forskellige diagnoser (f.eks. cerebral parese, præmaturitet);
- fravær af genetiske syndromer. Griffiths III-skalaen vil blive brugt til at vurdere barnets overordnede udviklingsniveau.
Typiske udviklingsmæssige børn:
- fødsel til termin;
- alder mellem 3 og 24 måneder (kronologisk);
- fravær af peri- eller postnatal patologi.
Inklusionskriterier for mødre (DN og typisk udvikling):
- alder over 18 år;
- god forståelse af det italienske sprog;
- fravær af kognitive vanskeligheder og/eller psykiatriske lidelser;
- ingen indtagelse af psykotrope lægemidler;
- ikke en del af en enlig forsørgerfamilie.
Eksklusionskriterier: se inklusionskriterierne.
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
- Observationsmodeller: Case-Control
- Tidsperspektiver: Tværsnit
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
børn med ND
børn med neurodevelopmental handicap (ND) i alderen mellem 3 og 24 måneder (kronologisk eller korrigeret i tilfælde af børn født for tidligt).
|
Genomisk DNA vil blive ekstraheret fra 0,4 ml alikvoter af hver spytprøve ved hjælp af kitproducentens foreslåede protokol, kvantificeret med Qubit 2.0 (Invitrogen) og opbevaret ved -20°C.
Alikvoter på 250 ng af hvert DNA vil blive redigeret til methyleringsanalyse med EZ DNA Methylation Lightning kit (Zymo Research).
Amplifikation af prøver og deres forberedelse til NGS-sekventering vil blive udført som beskrevet.
Prøver vil blive sekventeret på NextSeq 500 (Illumina).
Individuelle behandlede sekvenser (PE-aflæsninger) vil blive uafhængigt justeret til referencesekvenser ved hjælp af en parallel Smith-Waterman-algoritme.
Kun læsninger, der konsekvent er tilpasset den samme referencesekvens, vil blive bibeholdt.
Ved hvert CpG-sted i hver analyserede sekvens vil frekvenserne af de fire baser blive evalueret og tabellagt.
Urinprøver opsamles ved hjælp af ikke-invasive metoder og fremstilles i overensstemmelse med en procedure, der forbereder kvantitativ genvinding af exosomer: Når de er optøet og centrifugeret ved 17.000 x g i 10 minutter ved 4 °C, adskilles de genvundne supernatanter og centrifugeres ved 200.000 x g i 1 time ved 4°C.
Exosom-pellets adskilles, vaskes gentagne gange og resuspenderes i buffer (NH4HC03, 0,1 mM ph=7,8).
Proteinkoncentrationen estimeres med SPNTM Protein Assay-kittet, og hver prøve (50 ± 0,5 μg protein) fordøjes med trypsin ved anvendelse af et 1:50 (vægt/vægt) enzym/substrat-forhold ved 37 °C natten over (o/v).
En anden tryptisk fordøjelse udføres med et enzym:substrat-forhold på 1:100 (vægt/vægt) i 4 timer.
Fordøjede prøver, centrifugeret ved 13.000 x g i 10 minutter, renses og koncentreres under anvendelse af PepClean C-18-søjler.
De opnåede prøver analyseres ved omvendt-fase væskekromatografi koblet til højopløsningsmassespektrometri.
I løbet af en observationssession vil der blive lavet en kort videooptagelse af mor-barn-interaktionen på cirka 10 minutter i semistrukturerede omgivelser for at vurdere barnets følelsesmæssige regulering og sociale adfærd.
Interaktionen vil blive struktureret i 5 forskellige faser i henhold til Still Face-paradigmet (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Leg: Mødre vil blive inviteret til at interagere med deres babyer i 10 minutter; Alligevel: mødre vil blive bedt om at forblive stille, mens de bevarer et udtryksløst ansigt, der ikke reagerer og ikke at smile, røre ved eller tale med barnet i 2 minutter (Still#1: 2 minutter; Still#2: 2 minutter); Genforening: mødre vil blive bedt om at genoptage legeaktiviteten med deres egen i yderligere 2 minutter (Genforening#1: 2 minutter; Genforening#2: 2 minutter).
|
|
Typisk udviklede børn (TD)
børn med typisk udviklingsalder mellem 3 og 24 måneder (kronologisk).
|
Genomisk DNA vil blive ekstraheret fra 0,4 ml alikvoter af hver spytprøve ved hjælp af kitproducentens foreslåede protokol, kvantificeret med Qubit 2.0 (Invitrogen) og opbevaret ved -20°C.
Alikvoter på 250 ng af hvert DNA vil blive redigeret til methyleringsanalyse med EZ DNA Methylation Lightning kit (Zymo Research).
Amplifikation af prøver og deres forberedelse til NGS-sekventering vil blive udført som beskrevet.
Prøver vil blive sekventeret på NextSeq 500 (Illumina).
Individuelle behandlede sekvenser (PE-aflæsninger) vil blive uafhængigt justeret til referencesekvenser ved hjælp af en parallel Smith-Waterman-algoritme.
Kun læsninger, der konsekvent er tilpasset den samme referencesekvens, vil blive bibeholdt.
Ved hvert CpG-sted i hver analyserede sekvens vil frekvenserne af de fire baser blive evalueret og tabellagt.
Urinprøver opsamles ved hjælp af ikke-invasive metoder og fremstilles i overensstemmelse med en procedure, der forbereder kvantitativ genvinding af exosomer: Når de er optøet og centrifugeret ved 17.000 x g i 10 minutter ved 4 °C, adskilles de genvundne supernatanter og centrifugeres ved 200.000 x g i 1 time ved 4°C.
Exosom-pellets adskilles, vaskes gentagne gange og resuspenderes i buffer (NH4HC03, 0,1 mM ph=7,8).
Proteinkoncentrationen estimeres med SPNTM Protein Assay-kittet, og hver prøve (50 ± 0,5 μg protein) fordøjes med trypsin ved anvendelse af et 1:50 (vægt/vægt) enzym/substrat-forhold ved 37 °C natten over (o/v).
En anden tryptisk fordøjelse udføres med et enzym:substrat-forhold på 1:100 (vægt/vægt) i 4 timer.
Fordøjede prøver, centrifugeret ved 13.000 x g i 10 minutter, renses og koncentreres under anvendelse af PepClean C-18-søjler.
De opnåede prøver analyseres ved omvendt-fase væskekromatografi koblet til højopløsningsmassespektrometri.
I løbet af en observationssession vil der blive lavet en kort videooptagelse af mor-barn-interaktionen på cirka 10 minutter i semistrukturerede omgivelser for at vurdere barnets følelsesmæssige regulering og sociale adfærd.
Interaktionen vil blive struktureret i 5 forskellige faser i henhold til Still Face-paradigmet (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Leg: Mødre vil blive inviteret til at interagere med deres babyer i 10 minutter; Alligevel: mødre vil blive bedt om at forblive stille, mens de bevarer et udtryksløst ansigt, der ikke reagerer og ikke at smile, røre ved eller tale med barnet i 2 minutter (Still#1: 2 minutter; Still#2: 2 minutter); Genforening: mødre vil blive bedt om at genoptage legeaktiviteten med deres egen i yderligere 2 minutter (Genforening#1: 2 minutter; Genforening#2: 2 minutter).
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Spædbarns DNA-methyleringsstatus
Tidsramme: 1 dag , ved ansættelsen
|
DNA-methyleringsstatus (dvs.
procent) af kandidatgener (f.eks. OXTR, SLC6A4, BDNF og DRD4) vil blive vurderet fra spytprøver opnået fra spædbørn.
|
1 dag , ved ansættelsen
|
|
Spædbørns adfærdsregulering
Tidsramme: 1 dag , ved ansættelsen
|
Spædbarnets adfærdsregulering (dvs. negativ følelsesmæssighed) vil blive kodet mikroanalytisk (dvs. sekund for sekund) fra videobånd af mor-barn-interaktioner.
|
1 dag , ved ansættelsen
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Spædbørns proteomiske mønstre
Tidsramme: 1 dag , ved ansættelsen
|
Proteomiske mønstre vil blive evalueret for den relative mængde og post-translationelle modifikationer af kandidatproteiner, der menes at være involveret i stressreaktionen hos spædbørn.
|
1 dag , ved ansættelsen
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (Faktiske)
Primær færdiggørelse (Anslået)
Studieafslutning (Anslået)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Faktiske)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Andre undersøgelses-id-numre
- RC2021_820
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .