Regulación emocional en niños con ND: el papel de la variación genómica, los patrones proteómicos y la experiencia temprana
17 de octubre de 2023 actualizado por: IRCCS Eugenio Medea
Regulación emocional-conductual en niños con discapacidades del neurodesarrollo: una investigación exploratoria del papel de la variación genómica, los patrones proteómicos y la calidad de la experiencia temprana
Los niños con discapacidades del neurodesarrollo (ND) representan una población heterogénea caracterizada por una amplia gama de diagnósticos clínicos (p. ej., parálisis cerebral, deterioro sensorial, retraso psicomotor), que se asocian con diversos déficits que surgen temprano en la vida del niño.
Aunque se ha demostrado ampliamente que los niños con ND exhiben varias diferencias en las habilidades socioemocionales y la regulación emocional-conductual, los mecanismos subyacentes que están asociados con trayectorias de desarrollo más o menos deterioradas aún permanecen parcialmente sin explorar.
Si bien varios estudios han investigado el papel de los factores biológicos y ambientales en la regulación del comportamiento emocional de los niños con un desarrollo típico o niños con condiciones de riesgo distintas a la ND (por ejemplo, niños que son víctimas de maltrato), poca investigación ha explorado conjuntamente el papel de la metilación, polimorfismos y experiencia ambiental en la regulación emocional-conductual de niños con ND durante los primeros años de vida.
El objetivo de este proyecto es investigar factores biológicos (metilación del ADN, variantes polimórficas y proteómica) y ambientales (por ejemplo, procedimientos de enfermería dolorosos y/o invasivos, proximidad y contacto físico) que podrían estar asociados con la regulación del comportamiento emocional de los niños. con N.D.
Descripción general del estudio
Estado
Reclutamiento
Condiciones
Descripción detallada
Antecedentes: Los niños con discapacidades del neurodesarrollo (DN) son una población heterogénea caracterizada por una amplia variedad de diagnósticos clínicos, los cuales se asocian a diferentes déficits que surgen durante la infancia y la niñez. Aunque el marco de diagnóstico puede variar, varios estudios observaron que los niños con ND comparten habilidades sociales y relacionales reducidas, caracterizadas por habilidades de atención interactiva y diádica más bajas y un uso reducido de señales de comunicación interpersonal. Aunque se ha demostrado ampliamente que los niños con ND exhiben varias diferencias en las habilidades socioemocionales y la regulación del comportamiento emocional, los mecanismos subyacentes que están asociados con trayectorias más o menos deterioradas permanecen parcialmente inexplorados.
Objetivo principal: explorar en una muestra de niños con ND de 3 a 24 meses de edad la contribución de 1) metilación de genes candidatos (p. ej., OXTR, SLC6A4, BDNF y DRD4), 2) polimorfismos en la regulación emocional-conductual y 3 ) experiencia ambiental (es decir, experiencias adversas y calidad del comportamiento de los padres) en la regulación emocional-conductual.
Objetivo secundario: 1) explorar una posible asociación entre la proteómica y la regulación emocional-conductual en una muestra de niños con ND de 3 a 24 meses; 2) identificar patrones funcionales y estructurales de genes candidatos asociados con la regulación del comportamiento emocional mediante la aplicación de un enfoque computacional. También se identificarán módulos de genes potencialmente asociados con el desarrollo socioemocional en redes de interacción y coexpresión espacio-temporal en el encéfalo.
Actividades planificadas:
Métodos: el proyecto involucra a un grupo clínico de niños con ND y sus madres y un grupo de control de niños con desarrollo típico y sus madres. Por la naturaleza de los grupos, el estudio es un diseño de investigación cuasi-experimental.
El estudio implica los siguientes procedimientos:
- recogida de material biológico: recogida de saliva mediante modalidades no invasivas y el kit Oragene OG575 (Genotek DNA) y recogida de orina mediante modalidades no invasivas.
- administración de cuestionarios y diario de proximidad: se pedirá a la madre (tanto para el grupo clínico como para el grupo control) que rellene unos cuestionarios relacionados con su estado de ánimo, comportamiento habitual y desarrollo del niño. También se evaluará cuánto y de qué manera la madre gasta en contacto físico (ej. tiempo dedicado a acariciar al bebé; tiempo dedicado a sostener al bebé; tiempo que pasa cuando el bebé está pegado al pecho de la madre). Estos datos se obtendrán mediante el uso de una versión reutilizada del "diario de cercanía" de Raiskila et al. implementado en un formato electrónico, en forma de APP (APP: inContatto);
- grabar en video la Interacción padre-hijo en un contexto semiestructurado en 5 fases diferentes de acuerdo con el paradigma Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Las interacciones se grabarán en video para la codificación de comportamiento posterior utilizando varias herramientas de codificación. La regulación emocional-conductual del niño será codificada utilizando los sistemas de codificación: a) Fase de Compromiso del Bebé y el Cuidador, b) Sistema de Puntuación Normativa Infantil y Sistema de Puntuación Normativa Materna de Tronik. Además, el comportamiento infantil y materno se codificará mediante el sistema de codificación Global Rating Scale de Murray y el comportamiento de contacto materno mediante el sistema de codificación de contacto materno de Provenzi.
Tipo de estudio
De observación
Inscripción (Estimado)
248
Contactos y Ubicaciones
Esta sección proporciona los datos de contacto de quienes realizan el estudio e información sobre dónde se lleva a cabo este estudio.
Estudio Contacto
- Nombre: Rosario Montirosso
- Número de teléfono: +39031877494
- Correo electrónico: rosario.montirosso@lanostrafamiglia.it
Ubicaciones de estudio
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Lecco
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Bosisio Parini, Lecco, Italia, 23842
- Reclutamiento
- IRCCS E. Medea
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Contacto:
- Rosario Montirosso
- Número de teléfono: +39031877494
- Correo electrónico: rosario.montirosso@lanostrafamiglia.it
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Criterios de participación
Los investigadores buscan personas que se ajusten a una determinada descripción, denominada criterio de elegibilidad. Algunos ejemplos de estos criterios son el estado de salud general de una persona o tratamientos previos.
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
3 meses a 2 años (Niño)
Acepta Voluntarios Saludables
Sí
Método de muestreo
Muestra no probabilística
Población de estudio
Los niños con ND y sus madres serán reclutados mediante muestreo consecutivo y por conveniencia en la U.O.C. "Rehabilitación Especializada - Patologías Neuropsiquiátricas de la Edad del Desarrollo" y la U.O.C. “Rehabilitación Funcional” del Instituto Científico “E.
Medea" (sitio de Bosisio Parini).
Los niños con desarrollo típico y sus madres serán reclutados de escuelas infantiles en la provincia de Lecco.
Después de ver una carta informativa que describe la investigación general, las madres serán contactadas por teléfono e invitadas a participar voluntariamente.
Descripción
Criterios de inclusión:
Niños con DE:
- Edad entre 3 y 24 meses (cronológicamente o corregida en el caso de niños prematuros);
- retraso en el desarrollo de leve a moderado documentado por signos clínicos (p. ej., síntomas de lesión cerebral en el examen neurológico o neuroimagen) o por escalas de desarrollo (p. ej., escalas Griffiths III) asociadas con varios diagnósticos (p. ej., parálisis cerebral, prematuridad);
- ausencia de síndromes genéticos. La escala Griffiths III se utilizará para evaluar el nivel general de desarrollo del niño.
Niños con desarrollo típico:
- nacimiento a término;
- edad entre 3 y 24 meses (cronológica);
- ausencia de patología peri o posnatal.
Criterios de inclusión para madres (DN y desarrollo típico):
- edad mayor de 18 años;
- buen conocimiento del idioma italiano;
- ausencia de dificultades cognitivas y/o trastornos psiquiátricos;
- no ingesta de medicamentos psicotrópicos;
- no pertenecer a una familia monoparental.
Criterios de exclusión: se refieren a los criterios de inclusión.
Plan de estudios
Esta sección proporciona detalles del plan de estudio, incluido cómo está diseñado el estudio y qué mide el estudio.
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Modelos observacionales: Control de caso
- Perspectivas temporales: Transversal
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
|---|---|
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niños con ND
niños con discapacidades del neurodesarrollo (DN) de 3 a 24 meses de edad (cronológicamente o corregido en el caso de niños prematuros).
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El ADN genómico se extraerá de alícuotas de 0,4 ml de cada muestra de saliva utilizando el protocolo sugerido por el fabricante del kit, se cuantificará con Qubit 2.0 (Invitrogen) y se almacenará a -20 °C.
Se editarán alícuotas de 250 ng de cada ADN para el análisis de metilación con el kit EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research).
La amplificación de las muestras y su preparación para la secuenciación NGS se realizarán como se describe.
Las muestras se secuenciarán en NextSeq 500 (Illumina).
Las secuencias procesadas individuales (lecturas de PE) se alinearán de forma independiente con las secuencias de referencia utilizando un algoritmo paralelo de Smith-Waterman.
Solo se conservarán las lecturas que se alineen constantemente con la misma secuencia de referencia.
En cada sitio CpG en cada secuencia analizada, se evaluarán y tabularán las frecuencias de las cuatro bases.
Las muestras de orina se recogen mediante métodos no invasivos y se preparan según un procedimiento preparatorio para la recuperación cuantitativa de exosomas: una vez descongelados y centrifugados a 17.000 x g durante 10 min a 4°C, los sobrenadantes recuperados se separan y centrifugan a 200.000 x g durante 1 hora a 4°C.
Los sedimentos de exosomas se separan, se lavan repetidamente y se resuspenden en tampón (NH4HCO3, 0,1 mM ph = 7,8).
La concentración de proteínas se estima con el kit de ensayo de proteínas SPNTM y cada muestra (50 ± 0,5 μg de proteína) se digiere con tripsina usando una proporción de enzima/sustrato de 1:50 (p/p) a 37 °C durante la noche (o/w).
Se realiza una segunda digestión tríptica con una relación enzima:sustrato de 1:100 (p/p) durante 4h.
Las muestras digeridas, centrifugadas a 13 000 × g durante 10 min, se purifican y concentran utilizando columnas PepClean C-18.
Las muestras obtenidas se analizan mediante cromatografía líquida de fase inversa acoplada a espectrometría de masas de alta resolución.
Durante una sesión de observación, se realizará una breve grabación en video de la interacción madre-hijo de aproximadamente 10 minutos en un entorno semiestructurado para evaluar la regulación emocional y el comportamiento social del niño.
La interacción se estructurará en 5 fases diferentes según el paradigma Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Jugar: Se invitará a las madres a interactuar con sus bebés durante 10 minutos; Todavía: se les pedirá a las madres que permanezcan quietas mientras mantienen una cara inexpresiva que no responde y que no sonrían, toquen o hablen con el niño durante 2 minutos (Still # 1: 2 minutos; Still # 2: 2 minutos); Reunión: se les pedirá a las madres que reanuden la actividad de juego con las suyas durante 2 minutos adicionales (Reunión n.° 1: 2 minutos; Reunión n.° 2: 2 minutos).
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Niños desarrollados típicos (TD)
niños con edad típica de desarrollo entre 3 y 24 meses (cronológico).
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El ADN genómico se extraerá de alícuotas de 0,4 ml de cada muestra de saliva utilizando el protocolo sugerido por el fabricante del kit, se cuantificará con Qubit 2.0 (Invitrogen) y se almacenará a -20 °C.
Se editarán alícuotas de 250 ng de cada ADN para el análisis de metilación con el kit EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research).
La amplificación de las muestras y su preparación para la secuenciación NGS se realizarán como se describe.
Las muestras se secuenciarán en NextSeq 500 (Illumina).
Las secuencias procesadas individuales (lecturas de PE) se alinearán de forma independiente con las secuencias de referencia utilizando un algoritmo paralelo de Smith-Waterman.
Solo se conservarán las lecturas que se alineen constantemente con la misma secuencia de referencia.
En cada sitio CpG en cada secuencia analizada, se evaluarán y tabularán las frecuencias de las cuatro bases.
Las muestras de orina se recogen mediante métodos no invasivos y se preparan según un procedimiento preparatorio para la recuperación cuantitativa de exosomas: una vez descongelados y centrifugados a 17.000 x g durante 10 min a 4°C, los sobrenadantes recuperados se separan y centrifugan a 200.000 x g durante 1 hora a 4°C.
Los sedimentos de exosomas se separan, se lavan repetidamente y se resuspenden en tampón (NH4HCO3, 0,1 mM ph = 7,8).
La concentración de proteínas se estima con el kit de ensayo de proteínas SPNTM y cada muestra (50 ± 0,5 μg de proteína) se digiere con tripsina usando una proporción de enzima/sustrato de 1:50 (p/p) a 37 °C durante la noche (o/w).
Se realiza una segunda digestión tríptica con una relación enzima:sustrato de 1:100 (p/p) durante 4h.
Las muestras digeridas, centrifugadas a 13 000 × g durante 10 min, se purifican y concentran utilizando columnas PepClean C-18.
Las muestras obtenidas se analizan mediante cromatografía líquida de fase inversa acoplada a espectrometría de masas de alta resolución.
Durante una sesión de observación, se realizará una breve grabación en video de la interacción madre-hijo de aproximadamente 10 minutos en un entorno semiestructurado para evaluar la regulación emocional y el comportamiento social del niño.
La interacción se estructurará en 5 fases diferentes según el paradigma Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Jugar: Se invitará a las madres a interactuar con sus bebés durante 10 minutos; Todavía: se les pedirá a las madres que permanezcan quietas mientras mantienen una cara inexpresiva que no responde y que no sonrían, toquen o hablen con el niño durante 2 minutos (Still # 1: 2 minutos; Still # 2: 2 minutos); Reunión: se les pedirá a las madres que reanuden la actividad de juego con las suyas durante 2 minutos adicionales (Reunión n.° 1: 2 minutos; Reunión n.° 2: 2 minutos).
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Estado de metilación del ADN infantil
Periodo de tiempo: 1 día, en el reclutamiento
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El estado de metilación del ADN (es decir,
porcentaje) de genes candidatos (p. ej., OXTR, SLC6A4, BDNF y DRD4) se evaluarán a partir de muestras de saliva obtenidas de bebés.
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1 día, en el reclutamiento
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Regulación conductual infantil
Periodo de tiempo: 1 día, en el reclutamiento
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La regulación conductual infantil (es decir, la emotividad negativa) se codificará microanalíticamente (es decir, segundo a segundo) a partir de cintas de vídeo de interacciones madre-bebé.
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1 día, en el reclutamiento
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Patrones proteómicos infantiles
Periodo de tiempo: 1 día, en el reclutamiento
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Los patrones proteómicos se evaluarán en cuanto a la cantidad relativa y las modificaciones postraduccionales de las proteínas candidatas, que se cree que están involucradas en la respuesta al estrés en los bebés.
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1 día, en el reclutamiento
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Colaboradores e Investigadores
Aquí es donde encontrará personas y organizaciones involucradas en este estudio.
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Fechas de registro del estudio
Estas fechas rastrean el progreso del registro del estudio y los envíos de resultados resumidos a ClinicalTrials.gov. Los registros del estudio y los resultados informados son revisados por la Biblioteca Nacional de Medicina (NLM) para asegurarse de que cumplan con los estándares de control de calidad específicos antes de publicarlos en el sitio web público.
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
7 de abril de 2021
Finalización primaria (Estimado)
30 de noviembre de 2023
Finalización del estudio (Estimado)
31 de diciembre de 2023
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
30 de julio de 2021
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
12 de agosto de 2021
Publicado por primera vez (Actual)
13 de agosto de 2021
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
18 de octubre de 2023
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
17 de octubre de 2023
Última verificación
1 de octubre de 2023
Más información
Términos relacionados con este estudio
Otros números de identificación del estudio
- RC2021_820
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
No
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
No
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