Ta strona została przetłumaczona automatycznie i dokładność tłumaczenia nie jest gwarantowana. Proszę odnieść się do angielska wersja za tekst źródłowy.

Regulacja emocji u dzieci z ND: rola zmienności genomu, wzorców proteomicznych i wczesnych doświadczeń

17 października 2023 zaktualizowane przez: IRCCS Eugenio Medea

Regulacja emocjonalno-behawioralna u dzieci z zaburzeniami neurorozwojowymi: badanie eksploracyjne roli zmienności genomu, wzorców proteomicznych i jakości wczesnych doświadczeń

Dzieci z zaburzeniami neurorozwojowymi (ND) reprezentują heterogenną populację charakteryzującą się szerokim zakresem rozpoznań klinicznych (np. Chociaż szeroko wykazano, że dzieci z ND wykazują kilka różnic w umiejętnościach społeczno-emocjonalnych i regulacji emocjonalno-behawioralnej, podstawowe mechanizmy związane z mniej lub bardziej upośledzonymi trajektoriami rozwojowymi pozostają nadal częściowo niezbadane. Podczas gdy kilka badań dotyczyło roli czynników biologicznych i środowiskowych w emocjonalnej regulacji behawioralnej typowo rozwijających się dzieci lub dzieci z czynnikami ryzyka innymi niż ND (np. polimorfizmy i doświadczenia środowiskowe w regulacji emocjonalno-behawioralnej dzieci z ND w pierwszych latach życia. Celem tego projektu jest zbadanie czynników biologicznych (metylacja DNA, warianty polimorficzne i proteomika) i środowiskowych (np. bolesne i/lub inwazyjne zabiegi pielęgniarskie, bliskość i kontakt fizyczny), które mogą być związane z emocjonalną regulacją zachowania dzieci z ND.

Przegląd badań

Status

Rekrutacyjny

Warunki

Interwencja / Leczenie

Szczegółowy opis

Wstęp: Dzieci z zaburzeniami neurorozwojowymi (ND) stanowią zróżnicowaną populację charakteryzującą się dużą różnorodnością diagnoz klinicznych, które wiążą się z różnymi deficytami pojawiającymi się w okresie niemowlęcym i dziecięcym. Chociaż ramy diagnostyczne mogą się różnić, w kilku badaniach zaobserwowano, że dzieci z ND mają zmniejszone umiejętności społeczno-relacyjne, charakteryzujące się niższymi umiejętnościami interakcji i uwagi w diadzie oraz zmniejszonym wykorzystaniem wskazówek komunikacji interpersonalnej. Chociaż szeroko wykazano, że dzieci z ND wykazują kilka różnic w umiejętnościach społeczno-emocjonalnych i emocjonalnej regulacji behawioralnej, podstawowe mechanizmy związane z mniej lub bardziej upośledzonymi trajektoriami pozostają częściowo niezbadane.

Główny cel: zbadanie na grupie dzieci z ND w wieku od 3 do 24 miesięcy udziału 1) metylacji genów kandydujących (np. OXTR, SLC6A4, BDNF i DRD4), 2) polimorfizmów w regulacji emocjonalno-behawioralnej oraz 3 ) doświadczenia środowiskowe (tj. niekorzystne doświadczenia i jakość zachowań rodziców) w regulacji emocjonalno-behawioralnej.

Cel drugorzędny: 1) zbadanie możliwego związku między proteomiką a regulacją emocjonalno-behawioralną w grupie dzieci z ND w wieku od 3 do 24 miesięcy; 2) zidentyfikować wzorce funkcjonalne i strukturalne genów kandydujących związanych z regulacją zachowania emocjonalnego poprzez zastosowanie podejścia obliczeniowego. Zidentyfikowane zostaną również moduły genów potencjalnie związane z rozwojem społeczno-emocjonalnym w sieciach interakcji i czasoprzestrzennej koekspresji w mózgu.

Zaplanowane zajęcia:

Metody: projekt obejmuje grupę kliniczną dzieci z ND i ich matek oraz grupę kontrolną dzieci z typowo rozwijającymi się dziećmi i ich matek. Ze względu na charakter grup badanie ma charakter quasi-eksperymentalnego projektu badawczego.

Badanie obejmuje następujące procedury:

  • pobranie materiału biologicznego: pobranie śliny metodami nieinwazyjnymi i zestawem Oragene OG575 (Genotek DNA) oraz pobranie moczu metodami nieinwazyjnymi.
  • podawanie kwestionariuszy i dziennika bliskości: matka (zarówno dla grupy klinicznej, jak i kontrolnej) zostanie poproszona o wypełnienie kilku kwestionariuszy dotyczących jej nastroju, zwyczajowych zachowań i rozwoju dziecka. Ocenione zostanie również, ile i w jaki sposób matka spędza na kontakcie fizycznym (np. czas spędzony na głaskaniu dziecka; czas spędzony na trzymaniu dziecka; czas spędzony, gdy dziecko jest przystawione do piersi matki). Dane te zostaną pozyskane za pomocą zmodyfikowanej wersji „dziennika bliskości” Raiskila i wsp., zaimplementowanego w formacie elektronicznym, w formie aplikacji (APP: inContatto);
  • nagrywanie wideo interakcji rodzic-dziecko w częściowo ustrukturyzowanym kontekście w 5 różnych fazach zgodnie z paradygmatem nieruchomej twarzy (Tronick i in., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.

Interakcje będą nagrywane na wideo w celu późniejszego kodowania behawioralnego przy użyciu różnych narzędzi do kodowania. Regulacja emocjonalno-behawioralna dziecka zostanie zakodowana przy użyciu systemów kodowania: a) Faza zaangażowania niemowlęcia i opiekuna, b) System punktacji regulacyjnej niemowlęcia i System oceny regulacyjnej matki firmy Tronik. Ponadto zachowanie niemowląt i matek zostanie zakodowane przy użyciu systemu kodowania Global Rating Scale autorstwa Murraya, a zachowania dotykowe matki przy użyciu systemu kodowania dotykowego matki firmy Provenzi.

Typ studiów

Obserwacyjny

Zapisy (Szacowany)

248

Kontakty i lokalizacje

Ta sekcja zawiera dane kontaktowe osób prowadzących badanie oraz informacje o tym, gdzie badanie jest przeprowadzane.

Kontakt w sprawie studiów

Lokalizacje studiów

Kryteria uczestnictwa

Badacze szukają osób, które pasują do określonego opisu, zwanego kryteriami kwalifikacyjnymi. Niektóre przykłady tych kryteriów to ogólny stan zdrowia danej osoby lub wcześniejsze leczenie.

Kryteria kwalifikacji

Wiek uprawniający do nauki

3 miesiące do 2 lata (Dziecko)

Akceptuje zdrowych ochotników

Tak

Metoda próbkowania

Próbka bez prawdopodobieństwa

Badana populacja

Dzieci z ND i ich matki będą rekrutowane poprzez kolejne i dogodne pobieranie próbek w U.O.C. „Rehabilitacja Specjalistyczna – Patologie Neuropsychiatryczne Wieku Rozwojowego” i U.O.C. „Rehabilitacja funkcjonalna” Instytutu Naukowego „E. Medea” (strona Bosisio Parini). Dzieci z typowym rozwojem i ich matki będą rekrutowane z przedszkoli w prowincji Lecco. Po zapoznaniu się z listem informacyjnym opisującym badania ogólne, matki zostaną powiadomione telefonicznie i zaproszone do dobrowolnego udziału.

Opis

Kryteria przyjęcia:

Dzieci z DN:

  • Wiek od 3 do 24 miesięcy (chronologicznie lub skorygowany w przypadku dzieci urodzonych przedwcześnie);
  • łagodne do umiarkowanego opóźnienie rozwojowe udokumentowane objawami klinicznymi (np. objawy uszkodzenia mózgu w badaniu neurologicznym lub neuroobrazowym) lub skalami rozwojowymi (tj. skala Griffithsa III) związane z różnymi diagnozami (np. porażenie mózgowe, wcześniactwo);
  • brak zespołów genetycznych. Skala Griffithsa III posłuży do oceny ogólnego poziomu rozwoju dziecka.

Typowe rozwojowe dzieci:

  • od urodzenia do terminu;
  • wiek od 3 do 24 miesięcy (chronologicznie);
  • brak patologii okołoporodowej lub poporodowej.

Kryteria włączenia dla matek (DN i typowy rozwój):

  • wiek powyżej 18 lat;
  • dobra znajomość języka włoskiego;
  • brak trudności poznawczych i/lub zaburzeń psychicznych;
  • brak przyjmowania leków psychotropowych;
  • nie należy do rodziny niepełnej.

Kryteria wykluczenia: patrz kryteria włączenia.

Plan studiów

Ta sekcja zawiera szczegółowe informacje na temat planu badania, w tym sposób zaprojektowania badania i jego pomiary.

Jak projektuje się badanie?

Szczegóły projektu

  • Modele obserwacyjne: Kontrola przypadków
  • Perspektywy czasowe: Przekrojowe

Kohorty i interwencje

Grupa / Kohorta
Interwencja / Leczenie
dzieci z N.D
dzieci z zaburzeniami neurorozwojowymi (DN) w wieku od 3 do 24 miesięcy (chronologicznie lub skorygowane w przypadku dzieci urodzonych przedwcześnie).
Test diagnostyczny: Analiza metylacji DNA
Genomowy DNA zostanie wyekstrahowany z 0,4 ml porcji każdej próbki śliny przy użyciu protokołu sugerowanego przez producenta zestawu, zmierzony ilościowo za pomocą Qubit 2.0 (Invitrogen) i przechowywany w temperaturze -20°C. Porcje po 250 ng każdego DNA będą edytowane do analizy metylacji za pomocą zestawu EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research). Amplifikacja próbek i ich przygotowanie do sekwencjonowania NGS zostanie przeprowadzone zgodnie z opisem. Próbki będą sekwencjonowane na NextSeq 500 (Illumina). Poszczególne przetworzone sekwencje (odczyty PE) zostaną niezależnie dopasowane do sekwencji referencyjnych przy użyciu równoległego algorytmu Smitha-Watermana. Tylko odczyty, które konsekwentnie dopasowują się do tej samej sekwencji referencyjnej, zostaną zachowane. W każdym miejscu CpG w każdej analizowanej sekwencji, częstotliwości czterech zasad zostaną ocenione i zestawione w tabeli.
Test diagnostyczny: Analiza proteomiczna
Próbki moczu są pobierane metodami nieinwazyjnymi i przygotowywane zgodnie z procedurą przygotowującą do ilościowego odzyskiwania egzosomów: po rozmrożeniu i odwirowaniu przy 17 000 x g przez 10 min w temperaturze 4°C, odzyskane supernatanty są oddzielane i odwirowywane przy 200 000 x g przez 1 godz. w 4°C. Osady egzosomów oddziela się, wielokrotnie przemywa i ponownie zawiesza w buforze (NH4HCO3, 0,1 mM, pH=7,8). Stężenie białka szacuje się za pomocą zestawu SPNTM Protein Assay, a każdą próbkę (50 ± 0,5 μg białka) trawi się trypsyną stosując stosunek enzym/substrat 1:50 (w/w) w 37°C przez noc (o/w). Drugie trawienie trypsyną przeprowadza się przy stosunku enzym:substrat wynoszącym 1:100 (wag./wag.) przez 4 godziny. Strawione próbki, odwirowane przy 13 000 x g przez 10 min, są oczyszczane i zatężane przy użyciu kolumn PepClean C-18. Otrzymane próbki analizuje się metodą chromatografii cieczowej z odwróconymi fazami sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości.
Test diagnostyczny: Wciąż twarz Paradygmat
Podczas sesji obserwacyjnej zostanie wykonane krótkie nagranie wideo interakcji matka-dziecko trwające około 10 minut w częściowo ustrukturyzowanym otoczeniu, aby ocenić regulację emocjonalną dziecka i zachowania społeczne. Interakcja będzie podzielona na 5 różnych faz zgodnie z paradygmatem Martwej Twarzy (Tronick i in., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Zagraj: Matki zostaną poproszone o interakcję ze swoimi dziećmi przez 10 minut; Mimo to: matki zostaną poproszone o pozostanie w bezruchu, zachowując obojętną, pozbawioną wyrazu twarz i nie uśmiechać się, nie dotykać ani nie rozmawiać z dzieckiem przez 2 minuty (Ciągły numer 1: 2 minuty; Bezruch nr 2: 2 minuty); Zjazd: matki zostaną poproszone o wznowienie zabawy ze swoją własną przez dodatkowe 2 minuty (Zjazd nr 1: 2 minuty; Zjazd nr 2: 2 minuty).
Typowo rozwinięte dzieci (TD)
dzieci w typowym wieku rozwojowym od 3 do 24 miesięcy (chronologicznie).
Test diagnostyczny: Analiza metylacji DNA
Genomowy DNA zostanie wyekstrahowany z 0,4 ml porcji każdej próbki śliny przy użyciu protokołu sugerowanego przez producenta zestawu, zmierzony ilościowo za pomocą Qubit 2.0 (Invitrogen) i przechowywany w temperaturze -20°C. Porcje po 250 ng każdego DNA będą edytowane do analizy metylacji za pomocą zestawu EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research). Amplifikacja próbek i ich przygotowanie do sekwencjonowania NGS zostanie przeprowadzone zgodnie z opisem. Próbki będą sekwencjonowane na NextSeq 500 (Illumina). Poszczególne przetworzone sekwencje (odczyty PE) zostaną niezależnie dopasowane do sekwencji referencyjnych przy użyciu równoległego algorytmu Smitha-Watermana. Tylko odczyty, które konsekwentnie dopasowują się do tej samej sekwencji referencyjnej, zostaną zachowane. W każdym miejscu CpG w każdej analizowanej sekwencji, częstotliwości czterech zasad zostaną ocenione i zestawione w tabeli.
Test diagnostyczny: Analiza proteomiczna
Próbki moczu są pobierane metodami nieinwazyjnymi i przygotowywane zgodnie z procedurą przygotowującą do ilościowego odzyskiwania egzosomów: po rozmrożeniu i odwirowaniu przy 17 000 x g przez 10 min w temperaturze 4°C, odzyskane supernatanty są oddzielane i odwirowywane przy 200 000 x g przez 1 godz. w 4°C. Osady egzosomów oddziela się, wielokrotnie przemywa i ponownie zawiesza w buforze (NH4HCO3, 0,1 mM, pH=7,8). Stężenie białka szacuje się za pomocą zestawu SPNTM Protein Assay, a każdą próbkę (50 ± 0,5 μg białka) trawi się trypsyną stosując stosunek enzym/substrat 1:50 (w/w) w 37°C przez noc (o/w). Drugie trawienie trypsyną przeprowadza się przy stosunku enzym:substrat wynoszącym 1:100 (wag./wag.) przez 4 godziny. Strawione próbki, odwirowane przy 13 000 x g przez 10 min, są oczyszczane i zatężane przy użyciu kolumn PepClean C-18. Otrzymane próbki analizuje się metodą chromatografii cieczowej z odwróconymi fazami sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości.
Test diagnostyczny: Wciąż twarz Paradygmat
Podczas sesji obserwacyjnej zostanie wykonane krótkie nagranie wideo interakcji matka-dziecko trwające około 10 minut w częściowo ustrukturyzowanym otoczeniu, aby ocenić regulację emocjonalną dziecka i zachowania społeczne. Interakcja będzie podzielona na 5 różnych faz zgodnie z paradygmatem Martwej Twarzy (Tronick i in., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Zagraj: Matki zostaną poproszone o interakcję ze swoimi dziećmi przez 10 minut; Mimo to: matki zostaną poproszone o pozostanie w bezruchu, zachowując obojętną, pozbawioną wyrazu twarz i nie uśmiechać się, nie dotykać ani nie rozmawiać z dzieckiem przez 2 minuty (Ciągły numer 1: 2 minuty; Bezruch nr 2: 2 minuty); Zjazd: matki zostaną poproszone o wznowienie zabawy ze swoją własną przez dodatkowe 2 minuty (Zjazd nr 1: 2 minuty; Zjazd nr 2: 2 minuty).

Co mierzy badanie?

Podstawowe miary wyniku

Miara wyniku
Opis środka
Ramy czasowe
Stan metylacji DNA niemowląt
Ramy czasowe: 1 dzień, przy rekrutacji
Status metylacji DNA (tj. procent) genów kandydujących (np. OXTR, SLC6A4, BDNF i DRD4) zostanie oceniony na podstawie próbek śliny pobranych od niemowląt.
1 dzień, przy rekrutacji
Regulacja zachowania niemowląt
Ramy czasowe: 1 dzień, przy rekrutacji
Regulacja behawioralna niemowlęcia (tj. negatywna emocjonalność) zostanie zakodowana mikroanalitycznie (tj. sekunda po sekundzie) z taśm wideo interakcji matka-niemowlę.
1 dzień, przy rekrutacji

Miary wyników drugorzędnych

Miara wyniku
Opis środka
Ramy czasowe
Niemowlęce wzorce proteomiczne
Ramy czasowe: 1 dzień, przy rekrutacji
Wzorce proteomiczne zostaną ocenione pod kątem względnej ilości i modyfikacji potranslacyjnych białek kandydujących, które uważa się za związane z reakcją na stres u niemowląt.
1 dzień, przy rekrutacji

Współpracownicy i badacze

Tutaj znajdziesz osoby i organizacje zaangażowane w to badanie.

Sponsor

IRCCS Eugenio Medea

Daty zapisu na studia

Daty te śledzą postęp w przesyłaniu rekordów badań i podsumowań wyników do ClinicalTrials.gov. Zapisy badań i zgłoszone wyniki są przeglądane przez National Library of Medicine (NLM), aby upewnić się, że spełniają określone standardy kontroli jakości, zanim zostaną opublikowane na publicznej stronie internetowej.

Główne daty studiów

Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)

7 kwietnia 2021

Zakończenie podstawowe (Szacowany)

30 listopada 2023

Ukończenie studiów (Szacowany)

31 grudnia 2023

Daty rejestracji na studia

Pierwszy przesłany

30 lipca 2021

Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości

12 sierpnia 2021

Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)

13 sierpnia 2021

Aktualizacje rekordów badań

Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)

18 października 2023

Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości

17 października 2023

Ostatnia weryfikacja

1 października 2023

Więcej informacji

Terminy związane z tym badaniem

Inne numery identyfikacyjne badania

  • RC2021_820

Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze

Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA

Nie

Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA

Nie

Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .

Subskrybuj