- ICH GCP
- US-Register für klinische Studien
- Klinische Studie NCT05004090
Emotionsregulation bei Kindern mit ND: die Rolle der genomischen Variation, proteomischer Muster und früher Erfahrungen
Emotionale Verhaltensregulation bei Kindern mit neurologischen Entwicklungsstörungen: eine explorative Untersuchung der Rolle der genomischen Variation, proteomischer Muster und der Qualität früher Erfahrungen
Studienübersicht
Status
Bedingungen
Intervention / Behandlung
Detaillierte Beschreibung
Hintergrund: Kinder mit neurologischen Entwicklungsstörungen (ND) sind eine heterogene Population, die durch eine Vielzahl von klinischen Diagnosen gekennzeichnet ist, die mit unterschiedlichen Defiziten einhergehen, die im Säuglings- und Kindesalter auftreten. Obwohl der diagnostische Rahmen variieren kann, haben mehrere Studien beobachtet, dass Kinder mit ND reduzierte soziale Beziehungsfähigkeiten aufweisen, die durch geringere interaktive und dyadische Aufmerksamkeitsfähigkeiten und eine verringerte Verwendung von zwischenmenschlichen Kommunikationshinweisen gekennzeichnet sind. Obwohl allgemein gezeigt wurde, dass Kinder mit ND mehrere Unterschiede in den sozial-emotionalen Fähigkeiten und der emotionalen Verhaltensregulation aufweisen, bleiben die zugrunde liegenden Mechanismen, die mit mehr oder weniger beeinträchtigten Trajektorien verbunden sind, teilweise unerforscht.
Primäres Ziel: in einer Stichprobe von Kindern mit ND im Alter von 3 bis 24 Monaten den Beitrag von 1) Methylierung von Kandidatengenen (z. B. OXTR, SLC6A4, BDNF und DRD4), 2) Polymorphismen in der emotionalen Verhaltensregulation und 3 zu untersuchen ) Umwelterfahrung (d. h. negative Erfahrungen und Qualität des elterlichen Verhaltens) in der emotionalen Verhaltensregulation.
Sekundäres Ziel: 1) Untersuchung eines möglichen Zusammenhangs zwischen Proteomik und emotionaler Verhaltensregulation bei einer Stichprobe von Kindern mit ND im Alter zwischen 3 und 24 Monaten; 2) funktionelle und strukturelle Muster von Kandidatengenen zu identifizieren, die mit emotionaler Verhaltensregulation verbunden sind, indem ein computergestützter Ansatz angewendet wird. Es werden auch Genmodule identifiziert, die möglicherweise mit der sozial-emotionalen Entwicklung in Interaktionsnetzwerken und räumlich-zeitlicher Koexpression im Enzephalon assoziiert sind.
Geplante Aktivitäten:
Methoden: Das Projekt umfasst eine klinische Gruppe von Kindern mit ND und ihren Müttern sowie eine Kontrollgruppe von Kindern mit normaler Entwicklung und ihren Müttern. Aufgrund der Art der Gruppen handelt es sich bei der Studie um ein quasi-experimentelles Forschungsdesign.
Die Studie umfasst die folgenden Verfahren:
- Sammlung von biologischem Material: Speichelsammlung mit nicht-invasiven Modalitäten und dem Oragene OG575-Kit (Genotek-DNA) und Urinsammlung mit nicht-invasiven Modalitäten.
- Verwaltung von Fragebögen und Tagebuch der Nähe: Die Mutter (sowohl für die klinische Gruppe als auch für die Kontrollgruppe) wird gebeten, einige Fragebögen in Bezug auf ihre Stimmung, ihr gewohntes Verhalten und die Entwicklung des Kindes auszufüllen. Auch wird evaluiert, wie viel und auf welche Weise die Mutter Körperkontakt verbringt (z. Zeit, die damit verbracht wird, das Baby zu streicheln; Zeit, die damit verbracht wird, das Baby zu halten; Zeit, die verbracht wird, während das Baby an der Brust der Mutter angelegt wird). Diese Daten werden durch die Verwendung einer umfunktionierten Version des „Closeness Diary“ von Raiskila et al. abgeleitet, die in einem elektronischen Format in Form einer APP (APP: inContatto) implementiert ist;
- Videoaufzeichnung der Eltern-Kind-Interaktion in einem halbstrukturierten Kontext in 5 verschiedenen Phasen gemäß dem Still Face-Paradigma (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Die Interaktionen werden für die anschließende Verhaltenscodierung mit verschiedenen Codierungswerkzeugen auf Video aufgezeichnet. Die emotionale Verhaltensregulation des Kindes wird unter Verwendung der Codierungssysteme codiert: a) Infant and Caregiver Engagement Phase, b) Infant Regulatory Scoring System und Maternal Regulatory Scoring System by Tronik. Darüber hinaus wird das kindliche und mütterliche Verhalten mit dem Kodierungssystem Global Rating Scale von Murray und das mütterliche Berührungsverhalten mit dem Maternal Touch Coding System von Provenzi kodiert.
Studientyp
Einschreibung (Geschätzt)
Kontakte und Standorte
Studienkontakt
- Name: Rosario Montirosso
- Telefonnummer: +39031877494
- E-Mail: rosario.montirosso@lanostrafamiglia.it
Studienorte
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Lecco
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Bosisio Parini, Lecco, Italien, 23842
- Rekrutierung
- IRCCS E. Medea
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Kontakt:
- Rosario Montirosso
- Telefonnummer: +39031877494
- E-Mail: rosario.montirosso@lanostrafamiglia.it
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Teilnahmekriterien
Zulassungskriterien
Studienberechtigtes Alter
Akzeptiert gesunde Freiwillige
Probenahmeverfahren
Studienpopulation
Beschreibung
Einschlusskriterien:
Kinder mit ND:
- Alter zwischen 3 und 24 Monaten (chronologisch bzw. korrigiert bei Frühgeborenen);
- leichte bis mittelschwere Entwicklungsverzögerung, dokumentiert durch klinische Anzeichen (z. B. Symptome einer Hirnverletzung bei neurologischer Untersuchung oder Neuroimaging) oder durch Entwicklungsskalen (z. B. Griffiths-III-Skalen) im Zusammenhang mit verschiedenen Diagnosen (z. B. Zerebralparese, Frühgeburtlichkeit);
- Fehlen genetischer Syndrome. Die Griffiths-III-Skala wird verwendet, um den allgemeinen Entwicklungsstand des Kindes zu beurteilen.
Typische Entwicklungskinder:
- Geburt bis zum Ende;
- Alter zwischen 3 und 24 Monaten (chronologisch);
- Fehlen einer peri- oder postnatalen Pathologie.
Einschlusskriterien für Mütter (DN und typische Entwicklung):
- Alter über 18 Jahre;
- gute Kenntnisse der italienischen Sprache;
- Fehlen kognitiver Schwierigkeiten und/oder psychiatrischer Störungen;
- keine Einnahme von Psychopharmaka;
- nicht Teil einer Einelternfamilie.
Ausschlusskriterien: siehe Einschlusskriterien.
Studienplan
Wie ist die Studie aufgebaut?
Designdetails
- Beobachtungsmodelle: Fallkontrolle
- Zeitperspektiven: Querschnitt
Kohorten und Interventionen
Gruppe / Kohorte |
Intervention / Behandlung |
|---|---|
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Kinder mit ND
Kinder mit neurologischen Entwicklungsstörungen (ND) im Alter zwischen 3 und 24 Monaten (chronologisch oder korrigiert bei Frühgeborenen).
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Genomische DNA wird aus 0,4-ml-Aliquots jeder Speichelprobe unter Verwendung des vom Kit-Hersteller vorgeschlagenen Protokolls extrahiert, mit Qubit 2.0 (Invitrogen) quantifiziert und bei -20 °C gelagert.
Aliquots von 250 ng jeder DNA werden für die Methylierungsanalyse mit dem EZ DNA Methylation Lightning Kit (Zymo Research) aufbereitet.
Die Amplifikation von Proben und ihre Vorbereitung für die NGS-Sequenzierung wird wie beschrieben durchgeführt.
Die Proben werden auf NextSeq 500 (Illumina) sequenziert.
Einzelne verarbeitete Sequenzen (PE-Reads) werden unter Verwendung eines parallelen Smith-Waterman-Algorithmus unabhängig an Referenzsequenzen ausgerichtet.
Nur Reads, die konsistent an derselben Referenzsequenz ausgerichtet sind, werden beibehalten.
An jeder CpG-Stelle in jeder analysierten Sequenz werden die Frequenzen der vier Basen bewertet und tabelliert.
Urinproben werden mit nicht-invasiven Methoden gesammelt und gemäß einem Verfahren vorbereitet, das die quantitative Gewinnung von Exosomen vorbereitet: Nach dem Auftauen und Zentrifugieren bei 17.000 x g für 10 Minuten bei 4 °C werden die gewonnenen Überstände abgetrennt und bei 200.000 x g für 1 zentrifugiert Std. bei 4°C.
Exosom-Pellets werden abgetrennt, wiederholt gewaschen und in Puffer (NH4HCO3, 0,1 mM pH = 7,8) resuspendiert.
Die Proteinkonzentration wird mit dem SPNTM Protein Assay Kit geschätzt und jede Probe (50 ± 0,5 μg Protein) wird mit Trypsin unter Verwendung eines Enzym/Substrat-Verhältnisses von 1:50 (w/w) bei 37 °C über Nacht (o/w) verdaut.
Ein zweiter tryptischer Verdau wird mit einem Enzym:Substrat-Verhältnis von 1:100 (w/w) für 4 h durchgeführt.
Aufgeschlossene Proben, zentrifugiert bei 13.000 × g für 10 min, werden gereinigt und mit PepClean C-18-Säulen konzentriert.
Die erhaltenen Proben werden durch Umkehrphasen-Flüssigkeitschromatographie, gekoppelt mit hochauflösender Massenspektrometrie, analysiert.
Während einer Beobachtungssitzung wird eine kurze Videoaufzeichnung der Mutter-Kind-Interaktion von etwa 10 Minuten in einem halbstrukturierten Setting gemacht, um die emotionale Regulation und das soziale Verhalten des Kindes zu beurteilen.
Die Interaktion wird gemäß dem Still Face Paradigma (Tronick et al., 1978) in 5 verschiedene Phasen strukturiert: Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Spielen: Mütter werden eingeladen, 10 Minuten lang mit ihren Babys zu interagieren; Dennoch: Die Mütter werden gebeten, still zu bleiben, während sie ein nicht reagierendes, ausdrucksloses Gesicht bewahren und das Kind 2 Minuten lang nicht anlächeln, berühren oder mit ihm sprechen (Still#1: 2 Minuten; Still#2: 2 Minuten); Reunion: Die Mütter werden gebeten, die Spielaktivität mit ihren eigenen für weitere 2 Minuten fortzusetzen (Reunion#1: 2 Minuten; Reunion#2: 2 Minuten).
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Typisch entwickelte Kinder (TD)
Kinder mit typischem Entwicklungsalter zwischen 3 und 24 Monaten (chronologisch).
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Genomische DNA wird aus 0,4-ml-Aliquots jeder Speichelprobe unter Verwendung des vom Kit-Hersteller vorgeschlagenen Protokolls extrahiert, mit Qubit 2.0 (Invitrogen) quantifiziert und bei -20 °C gelagert.
Aliquots von 250 ng jeder DNA werden für die Methylierungsanalyse mit dem EZ DNA Methylation Lightning Kit (Zymo Research) aufbereitet.
Die Amplifikation von Proben und ihre Vorbereitung für die NGS-Sequenzierung wird wie beschrieben durchgeführt.
Die Proben werden auf NextSeq 500 (Illumina) sequenziert.
Einzelne verarbeitete Sequenzen (PE-Reads) werden unter Verwendung eines parallelen Smith-Waterman-Algorithmus unabhängig an Referenzsequenzen ausgerichtet.
Nur Reads, die konsistent an derselben Referenzsequenz ausgerichtet sind, werden beibehalten.
An jeder CpG-Stelle in jeder analysierten Sequenz werden die Frequenzen der vier Basen bewertet und tabelliert.
Urinproben werden mit nicht-invasiven Methoden gesammelt und gemäß einem Verfahren vorbereitet, das die quantitative Gewinnung von Exosomen vorbereitet: Nach dem Auftauen und Zentrifugieren bei 17.000 x g für 10 Minuten bei 4 °C werden die gewonnenen Überstände abgetrennt und bei 200.000 x g für 1 zentrifugiert Std. bei 4°C.
Exosom-Pellets werden abgetrennt, wiederholt gewaschen und in Puffer (NH4HCO3, 0,1 mM pH = 7,8) resuspendiert.
Die Proteinkonzentration wird mit dem SPNTM Protein Assay Kit geschätzt und jede Probe (50 ± 0,5 μg Protein) wird mit Trypsin unter Verwendung eines Enzym/Substrat-Verhältnisses von 1:50 (w/w) bei 37 °C über Nacht (o/w) verdaut.
Ein zweiter tryptischer Verdau wird mit einem Enzym:Substrat-Verhältnis von 1:100 (w/w) für 4 h durchgeführt.
Aufgeschlossene Proben, zentrifugiert bei 13.000 × g für 10 min, werden gereinigt und mit PepClean C-18-Säulen konzentriert.
Die erhaltenen Proben werden durch Umkehrphasen-Flüssigkeitschromatographie, gekoppelt mit hochauflösender Massenspektrometrie, analysiert.
Während einer Beobachtungssitzung wird eine kurze Videoaufzeichnung der Mutter-Kind-Interaktion von etwa 10 Minuten in einem halbstrukturierten Setting gemacht, um die emotionale Regulation und das soziale Verhalten des Kindes zu beurteilen.
Die Interaktion wird gemäß dem Still Face Paradigma (Tronick et al., 1978) in 5 verschiedene Phasen strukturiert: Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.
Spielen: Mütter werden eingeladen, 10 Minuten lang mit ihren Babys zu interagieren; Dennoch: Die Mütter werden gebeten, still zu bleiben, während sie ein nicht reagierendes, ausdrucksloses Gesicht bewahren und das Kind 2 Minuten lang nicht anlächeln, berühren oder mit ihm sprechen (Still#1: 2 Minuten; Still#2: 2 Minuten); Reunion: Die Mütter werden gebeten, die Spielaktivität mit ihren eigenen für weitere 2 Minuten fortzusetzen (Reunion#1: 2 Minuten; Reunion#2: 2 Minuten).
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Was misst die Studie?
Primäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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DNA-Methylierungsstatus von Säuglingen
Zeitfenster: 1 Tag, bei der Rekrutierung
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Der DNA-Methylierungsstatus (d. h.
Prozentsatz) von Kandidatengenen (z. B. OXTR, SLC6A4, BDNF und DRD4) werden anhand von Speichelproben von Säuglingen bestimmt.
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1 Tag, bei der Rekrutierung
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Säuglingsverhaltensregulation
Zeitfenster: 1 Tag, bei der Rekrutierung
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Die kindliche Verhaltensregulation (d. h. negative Emotionalität) wird mikroanalytisch (d. h. Sekunde für Sekunde) aus Videobändern von Mutter-Kind-Interaktionen kodiert.
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1 Tag, bei der Rekrutierung
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Sekundäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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Infant proteomische Muster
Zeitfenster: 1 Tag, bei der Rekrutierung
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Proteomische Muster werden auf die relative Menge und posttranslationale Modifikationen von Kandidatenproteinen untersucht, von denen angenommen wird, dass sie an der Stressreaktion bei Säuglingen beteiligt sind.
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1 Tag, bei der Rekrutierung
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Mitarbeiter und Ermittler
Sponsor
Studienaufzeichnungsdaten
Haupttermine studieren
Studienbeginn (Tatsächlich)
Primärer Abschluss (Geschätzt)
Studienabschluss (Geschätzt)
Studienanmeldedaten
Zuerst eingereicht
Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat
Zuerst gepostet (Tatsächlich)
Studienaufzeichnungsaktualisierungen
Letztes Update gepostet (Tatsächlich)
Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt
Zuletzt verifiziert
Mehr Informationen
Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie
Andere Studien-ID-Nummern
- RC2021_820
Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt
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