Denna sida har översatts automatiskt och översättningens korrekthet kan inte garanteras. Vänligen se engelsk version för en källtext.

Emotionell reglering hos barn med ND: rollen av genomisk variation, proteommönster och tidig erfarenhet

17 oktober 2023 uppdaterad av: IRCCS Eugenio Medea

Emotionell beteendereglering hos barn med neuroutvecklingshandikapp: en utforskande undersökning av rollen av genomisk variation, proteomiska mönster och kvaliteten på tidig erfarenhet

Barn med neurodevelopmental funktionsnedsättning (ND) representerar en heterogen population som kännetecknas av ett brett spektrum av kliniska diagnoser (t.ex. cerebral pares, sensorisk funktionsnedsättning, psykomotorisk retardation), som är förknippade med olika brister som dyker upp tidigt i barnets liv. Även om det i stort sett har visats att barn med ND uppvisar flera skillnader i social-emotionella färdigheter och emotionell beteendereglering, är de underliggande mekanismerna som är förknippade med mer eller mindre försämrade utvecklingsbanor fortfarande delvis outforskade. Medan flera studier har undersökt rollen av biologiska och miljömässiga faktorer i den känslomässiga beteenderegleringen av typiskt utvecklande barn eller barn med andra risktillstånd än ND (t.ex. barn som är offer för misshandel), har lite forskning gemensamt utforskat rollen av metylering, polymorfismer och miljöerfarenhet i emotionell beteendereglering av barn med ND under de första levnadsåren. Syftet med detta projekt är att undersöka biologiska (DNA-metylering, polymorfa varianter och proteomik) och miljöfaktorer (t.ex. smärtsamma och/eller invasiva omvårdnadsprocedurer, närhet och fysisk kontakt) som kan vara förknippade med den emotionella beteenderegleringen hos barn med ND.

Studieöversikt

Detaljerad beskrivning

Bakgrund: Barn med neurodevelopmental funktionsnedsättning (ND) är en heterogen population som kännetecknas av en mängd olika kliniska diagnoser, som är associerade med olika brister som uppstår under spädbarns- och barndomen. Även om den diagnostiska inramningen kan variera, observerade flera studier att barn med ND delar reducerade social-relationella färdigheter, kännetecknad av lägre interaktiva och dyadiska uppmärksamhetsförmåga och minskad användning av interpersonella kommunikationssignaler. Även om det i stort sett har visats att barn med ND uppvisar flera skillnader i social-emotionella färdigheter och emotionell beteendereglering, förblir de underliggande mekanismerna som är associerade med mer eller mindre försämrade banor delvis outforskade.

Primärt mål: att i ett urval av barn med ND i åldern 3 till 24 månader utforska bidraget av 1) metylering av kandidatgener (t.ex. OXTR, SLC6A4, BDNF och DRD4), 2) polymorfismer i emotionell beteendereglering och 3 ) miljöupplevelse (d.v.s. negativa upplevelser och kvaliteten på föräldrarnas beteende) i emotionell beteendereglering.

Sekundärt mål: 1) att utforska ett möjligt samband mellan proteomik och emotionell beteendereglering i ett urval av barn med ND i åldern 3 till 24 månader; 2) att identifiera funktionella och strukturella mönster av kandidatgener förknippade med emotionell beteendereglering genom att tillämpa en beräkningsmetod. Moduler av gener potentiellt associerade med social-emotionell utveckling i nätverk av interaktion och rums-temporalt samuttryck i hjärnan kommer också att identifieras.

Planerade aktiviteter:

Metoder: projektet involverar en klinisk grupp barn med ND och deras mödrar och en kontrollgrupp av typiskt utvecklade barn och deras mödrar. På grund av gruppernas karaktär är studien en kvasi-experimentell forskningsdesign.

Studien omfattar följande procedurer:

  • insamling av biologiskt material: salivuppsamling med icke-invasiva metoder och Oragene OG575-kit (Genotek DNA) och urininsamling med icke-invasiva metoder.
  • administrering av frågeformulär och närhetsdagbok: mamman (både för den kliniska gruppen och för kontrollgruppen) kommer att bli ombedd att fylla i några frågeformulär som rör deras humör, vanemässiga beteende och barnets utveckling. Det kommer också att utvärderas hur mycket och på vilket sätt mamman spenderar i fysisk kontakt (t. tid att smeka barnet; tid som ägnas åt att hålla barnet; tid när barnet är fäst vid mammans bröst). Dessa data kommer att härledas genom användning av en återanvänd version av Raiskila et al.s "närhetsdagbok" implementerad i ett elektroniskt format, i form av en APP (APP: inContatto);
  • videoinspelning av förälder-barn-interaktionen i ett semi-strukturerat sammanhang i 5 olika faser i enlighet med Still Face-paradigmet (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.

Interaktioner kommer att videofilmas för efterföljande beteendekodning med hjälp av olika kodningsverktyg. Barnets känslomässiga beteendereglering kommer att kodas med hjälp av kodsystemen: a) Infant and Caregiver Engagement Phase, b) Spädbarns Regulatory Scoring System och Maternal Regulatory Scoring System av Tronik. Dessutom kommer spädbarns och moderns beteende att kodas med hjälp av kodsystemet Global Rating Scale från Murray och moderns beröringsbeteende med hjälp av Maternal Touch Coding System från Provenzi.

Studietyp

Observationell

Inskrivning (Beräknad)

248

Kontakter och platser

Det här avsnittet innehåller kontaktuppgifter för dem som genomför studien och information om var denna studie genomförs.

Studiekontakt

Studieorter

Deltagandekriterier

Forskare letar efter personer som passar en viss beskrivning, så kallade behörighetskriterier. Några exempel på dessa kriterier är en persons allmänna hälsotillstånd eller tidigare behandlingar.

Urvalskriterier

Åldrar som är berättigade till studier

3 månader till 2 år (Barn)

Tar emot friska volontärer

Ja

Testmetod

Icke-sannolikhetsprov

Studera befolkning

Barn med ND och deras mödrar kommer att rekryteras genom konsekutiv och bekvämlighetsprovtagning vid U.O.C. "Specialistisk rehabilitering - neuropsykiatriska patologier i utvecklingsåldern" och U.O.C. "Funktionell rehabilitering" av det vetenskapliga institutet "E. Medea" (Bosisio Parini-webbplatsen). Barn med typisk utveckling och deras mödrar kommer att rekryteras från förskolor i provinsen Lecco. Efter att ha sett ett informativt brev som beskriver den allmänna forskningen, kommer mammor att kontaktas per telefon och inbjudas att delta frivilligt.

Beskrivning

Inklusionskriterier:

Barn med ND:

  • Ålder mellan 3 och 24 månader (kronologiskt eller korrigerat för barn som är födda för tidigt);
  • mild till måttlig utvecklingsförsening dokumenterad av kliniska tecken (t.ex. symtom på hjärnskada vid neurologisk undersökning eller neuroimaging) eller av utvecklingsskalor (d.v.s. Griffiths III-skalor) associerade med olika diagnoser (t.ex. cerebral pares, prematuritet);
  • frånvaro av genetiska syndrom. Griffiths III-skalan kommer att användas för att bedöma barnets övergripande utvecklingsnivå.

Typiska utvecklingsbarn:

  • födelse till termin;
  • ålder mellan 3 och 24 månader (kronologisk);
  • frånvaro av peri- eller postnatal patologi.

Inklusionskriterier för mödrar (DN och typisk utveckling):

  • ålder över 18 år;
  • god förståelse för det italienska språket;
  • frånvaro av kognitiva svårigheter och/eller psykiatriska störningar;
  • inget intag av psykotropa läkemedel;
  • inte ingår i en ensamstående familj.

Uteslutningskriterier: se inklusionskriterierna.

Studieplan

Det här avsnittet ger detaljer om studieplanen, inklusive hur studien är utformad och vad studien mäter.

Hur är studien utformad?

Designdetaljer

  • Observationsmodeller: Case-Control
  • Tidsperspektiv: Tvärsnitt

Kohorter och interventioner

Grupp / Kohort
Intervention / Behandling
barn med ND
barn med neurodevelopmental funktionsnedsättning (ND) ålder mellan 3 och 24 månader (kronologiskt eller korrigerat när det gäller barn födda för tidigt).
Genomiskt DNA kommer att extraheras från 0,4 ml alikvoter av varje salivprov med hjälp av kittillverkarens föreslagna protokoll, kvantifieras med Qubit 2.0 (Invitrogen) och lagras vid -20 °C. Alikvoter på 250 ng av varje DNA kommer att redigeras för metyleringsanalys med EZ DNA Methylation Lightning-kit (Zymo Research). Amplifiering av prover och deras förberedelse för NGS-sekvensering kommer att utföras enligt beskrivningen. Prover kommer att sekvenseras på NextSeq 500 (Illumina). Individuella bearbetade sekvenser (PE-läsningar) kommer att anpassas oberoende till referenssekvenser med hjälp av en parallell Smith-Waterman-algoritm. Endast läsningar som konsekvent anpassar sig till samma referenssekvens kommer att behållas. Vid varje CpG-ställe i varje analyserad sekvens kommer frekvenserna för de fyra baserna att utvärderas och tabuleras.
Urinprover samlas in med hjälp av icke-invasiva metoder och prepareras enligt en procedur som är förberedande för kvantitativ återvinning av exosomer: när de tinats och centrifugerats vid 17 000 x g i 10 minuter vid 4 ° C, separeras de återvunna supernatanterna och centrifugeras vid 200 000 x g i 1 timme vid 4°C. Exosompellets separeras, tvättas upprepade gånger och återsuspenderas i buffert (NH4HCO3, 0,1 mM ph=7,8). Proteinkoncentrationen uppskattas med SPNTM Protein Assay-kitet och varje prov (50 ± 0,5 μg protein) smälts med trypsin med användning av ett 1:50 (vikt/vikt) enzym/substrat-förhållande vid 37 °C över natten (o/v). En andra tryptisk digestion utförs med ett enzym:substrat-förhållande på 1:100 (vikt/vikt) under 4 timmar. Uppslutna prover, centrifugerade vid 13 000 x g under 10 minuter, renas och koncentreras med användning av PepClean C-18-kolonner. De erhållna proverna analyseras med omvänd fas vätskekromatografi kopplad till högupplöst masspektrometri.
Under en observationssession kommer en kort videoinspelning av mor-barn-interaktionen på cirka 10 minuter att göras i en semistrukturerad miljö för att bedöma barnets känslomässiga reglering och sociala beteende. Interaktionen kommer att struktureras i 5 olika faser enligt Still Face-paradigmet (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Lek: Mödrar kommer att bjudas in att interagera med sina bebisar i 10 minuter; Ändå: mammor kommer att uppmanas att förbli stilla medan de behåller ett uttryckslöst ansikte som inte svarar och att inte le, röra eller prata med barnet i 2 minuter (Still#1: 2 minuter; Still#2: 2 minuter); Återträff: mammor kommer att uppmanas att återuppta lekaktiviteten med sina egna i ytterligare 2 minuter (Återträff#1: 2 minuter; Återträff#2: 2 minuter).
Typiskt utvecklade barn (TD)
barn med typisk utvecklingsålder mellan 3 och 24 månader (kronologisk).
Genomiskt DNA kommer att extraheras från 0,4 ml alikvoter av varje salivprov med hjälp av kittillverkarens föreslagna protokoll, kvantifieras med Qubit 2.0 (Invitrogen) och lagras vid -20 °C. Alikvoter på 250 ng av varje DNA kommer att redigeras för metyleringsanalys med EZ DNA Methylation Lightning-kit (Zymo Research). Amplifiering av prover och deras förberedelse för NGS-sekvensering kommer att utföras enligt beskrivningen. Prover kommer att sekvenseras på NextSeq 500 (Illumina). Individuella bearbetade sekvenser (PE-läsningar) kommer att anpassas oberoende till referenssekvenser med hjälp av en parallell Smith-Waterman-algoritm. Endast läsningar som konsekvent anpassar sig till samma referenssekvens kommer att behållas. Vid varje CpG-ställe i varje analyserad sekvens kommer frekvenserna för de fyra baserna att utvärderas och tabuleras.
Urinprover samlas in med hjälp av icke-invasiva metoder och prepareras enligt en procedur som är förberedande för kvantitativ återvinning av exosomer: när de tinats och centrifugerats vid 17 000 x g i 10 minuter vid 4 ° C, separeras de återvunna supernatanterna och centrifugeras vid 200 000 x g i 1 timme vid 4°C. Exosompellets separeras, tvättas upprepade gånger och återsuspenderas i buffert (NH4HCO3, 0,1 mM ph=7,8). Proteinkoncentrationen uppskattas med SPNTM Protein Assay-kitet och varje prov (50 ± 0,5 μg protein) smälts med trypsin med användning av ett 1:50 (vikt/vikt) enzym/substrat-förhållande vid 37 °C över natten (o/v). En andra tryptisk digestion utförs med ett enzym:substrat-förhållande på 1:100 (vikt/vikt) under 4 timmar. Uppslutna prover, centrifugerade vid 13 000 x g under 10 minuter, renas och koncentreras med användning av PepClean C-18-kolonner. De erhållna proverna analyseras med omvänd fas vätskekromatografi kopplad till högupplöst masspektrometri.
Under en observationssession kommer en kort videoinspelning av mor-barn-interaktionen på cirka 10 minuter att göras i en semistrukturerad miljö för att bedöma barnets känslomässiga reglering och sociala beteende. Interaktionen kommer att struktureras i 5 olika faser enligt Still Face-paradigmet (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Lek: Mödrar kommer att bjudas in att interagera med sina bebisar i 10 minuter; Ändå: mammor kommer att uppmanas att förbli stilla medan de behåller ett uttryckslöst ansikte som inte svarar och att inte le, röra eller prata med barnet i 2 minuter (Still#1: 2 minuter; Still#2: 2 minuter); Återträff: mammor kommer att uppmanas att återuppta lekaktiviteten med sina egna i ytterligare 2 minuter (Återträff#1: 2 minuter; Återträff#2: 2 minuter).

Vad mäter studien?

Primära resultatmått

Resultatmått
Åtgärdsbeskrivning
Tidsram
Spädbarns DNA-metyleringsstatus
Tidsram: 1 dag, vid rekryteringen
DNA-metyleringsstatusen (dvs. procent) av kandidatgener (t.ex. OXTR, SLC6A4, BDNF och DRD4) kommer att bedömas från salivprover som erhållits från spädbarn.
1 dag, vid rekryteringen
Spädbarns beteendereglering
Tidsram: 1 dag, vid rekryteringen
Spädbarnets beteendereglering (dvs negativ emotionalitet) kommer att kodas mikroanalitiskt (dvs sekund för sekund) från videoband av interaktioner mellan mor och spädbarn.
1 dag, vid rekryteringen

Sekundära resultatmått

Resultatmått
Åtgärdsbeskrivning
Tidsram
Spädbarns proteomiska mönster
Tidsram: 1 dag, vid rekryteringen
Proteomiska mönster kommer att utvärderas för den relativa mängden och posttranslationella modifieringar av kandidatproteiner, som tros vara involverade i stressresponsen hos spädbarn.
1 dag, vid rekryteringen

Samarbetspartners och utredare

Det är här du hittar personer och organisationer som är involverade i denna studie.

Studieavstämningsdatum

Dessa datum spårar framstegen för inlämningar av studieposter och sammanfattande resultat till ClinicalTrials.gov. Studieposter och rapporterade resultat granskas av National Library of Medicine (NLM) för att säkerställa att de uppfyller specifika kvalitetskontrollstandarder innan de publiceras på den offentliga webbplatsen.

Studera stora datum

Studiestart (Faktisk)

7 april 2021

Primärt slutförande (Beräknad)

30 november 2023

Avslutad studie (Beräknad)

31 december 2023

Studieregistreringsdatum

Först inskickad

30 juli 2021

Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna

12 augusti 2021

Första postat (Faktisk)

13 augusti 2021

Uppdateringar av studier

Senaste uppdatering publicerad (Faktisk)

18 oktober 2023

Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna

17 oktober 2023

Senast verifierad

1 oktober 2023

Mer information

Termer relaterade till denna studie

Andra studie-ID-nummer

  • RC2021_820

Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument

Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt

Nej

Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt

Nej

Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .

Kliniska prövningar på Känslomässig reglering

Kliniska prövningar på DNA-metyleringsanalys

3
Prenumerera