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Regolazione emotiva nei bambini con ND: il ruolo della variazione genomica, dei modelli proteomici e dell'esperienza precoce

17 ottobre 2023 aggiornato da: IRCCS Eugenio Medea

Regolazione emotivo-comportamentale nei bambini con disabilità dello sviluppo neurologico: un'indagine esplorativa sul ruolo della variazione genomica, dei modelli proteomici e della qualità dell'esperienza precoce

I bambini con disabilità dello sviluppo neurologico (ND) rappresentano una popolazione eterogenea caratterizzata da un'ampia gamma di diagnosi cliniche (ad esempio, paralisi cerebrale, compromissione sensoriale, ritardo psicomotorio), che sono associate a vari deficit che emergono all'inizio della vita del bambino. Sebbene sia stato ampiamente dimostrato che i bambini con ND mostrano diverse differenze nelle abilità socio-emotive e nella regolazione emotivo-comportamentale, i meccanismi sottostanti associati a traiettorie di sviluppo più o meno compromesse rimangono ancora parzialmente inesplorati. Mentre diversi studi hanno indagato il ruolo dei fattori biologici e ambientali nella regolazione comportamentale emotiva di bambini con sviluppo tipico o bambini con condizioni di rischio diverse da ND (ad esempio, bambini vittime di maltrattamenti), poche ricerche hanno esplorato congiuntamente il ruolo della metilazione, polimorfismi ed esperienza ambientale nella regolazione emotivo-comportamentale dei bambini con ND nei primi anni di vita. Lo scopo di questo progetto è quello di indagare i fattori biologici (metilazione del DNA, varianti polimorfiche e proteomica) e ambientali (ad esempio, procedure infermieristiche dolorose e/o invasive, prossimità e contatto fisico) che potrebbero essere associati alla regolazione emotiva comportamentale dei bambini con N.D.

Panoramica dello studio

Stato

Reclutamento

Condizioni

Intervento / Trattamento

Descrizione dettagliata

Sfondo: I bambini con disabilità dello sviluppo neurologico (ND) sono una popolazione eterogenea caratterizzata da un'ampia varietà di diagnosi cliniche, che sono associate a diversi deficit che emergono durante l'infanzia e la fanciullezza. Sebbene l'inquadramento diagnostico possa variare, diversi studi hanno osservato che i bambini con ND condividono ridotte capacità socio-relazionali, caratterizzate da minori capacità di attenzione interattiva e diadica e un ridotto uso di segnali di comunicazione interpersonale. Sebbene sia stato ampiamente dimostrato che i bambini con ND mostrano diverse differenze nelle abilità socio-emotive e nella regolazione comportamentale emotiva, i meccanismi sottostanti associati a traiettorie più o meno compromesse rimangono parzialmente inesplorati.

Obiettivo primario: esplorare in un campione di bambini con ND di età compresa tra 3 e 24 mesi il contributo di 1) metilazione di geni candidati (es. OXTR, SLC6A4, BDNF e DRD4), 2) polimorfismi nella regolazione emotivo-comportamentale e 3 ) esperienza ambientale (cioè esperienze avverse e qualità del comportamento genitoriale) nella regolazione emotivo-comportamentale.

Obiettivo secondario: 1) esplorare una possibile associazione tra proteomica e regolazione emotivo-comportamentale in un campione di bambini con ND di età compresa tra 3 e 24 mesi; 2) identificare pattern funzionali e strutturali di geni candidati associati alla regolazione comportamentale emotiva applicando un approccio computazionale. Saranno inoltre identificati moduli di geni potenzialmente associati allo sviluppo socio-emotivo in reti di interazione e co-espressione spazio-temporale nell'encefalo.

Attività pianificate:

Metodi: il progetto coinvolge un gruppo clinico di bambini con ND e le loro madri e un gruppo di controllo di bambini a sviluppo tipico e le loro madri. A causa della natura dei gruppi, lo studio è un progetto di ricerca quasi sperimentale.

Lo studio prevede le seguenti procedure:

  • prelievo di materiale biologico: prelievo della saliva con modalità non invasive e kit Oragene OG575 (Genotek DNA) e prelievo delle urine con modalità non invasive.
  • somministrazione di questionari e diario di prossimità: alla madre (sia per il gruppo clinico che per il gruppo di controllo) verrà chiesto di compilare alcuni questionari relativi al proprio stato d'animo, comportamento abituale e sviluppo del bambino. Si valuterà anche quanto e in che modo la madre trascorre nel contatto fisico (es. tempo trascorso ad accarezzare il bambino; tempo trascorso tenendo in braccio il bambino; tempo trascorso quando il bambino è attaccato al seno della madre). Questi dati saranno ricavati attraverso l'uso di una versione riproposta del "diario di prossimità" di Raiskila et al. implementata in formato elettronico, sotto forma di APP (APP: inContatto);
  • videoregistrare l'interazione genitore-figlio in un contesto semi-strutturato in 5 diverse fasi secondo il paradigma Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2.

Le interazioni saranno videoregistrate per la successiva codifica comportamentale utilizzando vari strumenti di codifica. La regolazione emotivo-comportamentale del bambino sarà codificata utilizzando i sistemi di codifica: a) Infant e Caregiver Engagement Phase, b) Infant Regulatory Scoring System e Maternal Regulatory Scoring System di Tronik. Inoltre, il comportamento infantile e materno sarà codificato utilizzando il sistema di codifica Global Rating Scale di Murray e il comportamento tattile materno utilizzando il sistema di codifica del tocco materno di Provenzi.

Tipo di studio

Osservativo

Iscrizione (Stimato)

248

Contatti e Sedi

Questa sezione fornisce i recapiti di coloro che conducono lo studio e informazioni su dove viene condotto lo studio.

Contatto studio

Luoghi di studio

Criteri di partecipazione

I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.

Criteri di ammissibilità

Età idonea allo studio

Da 3 mesi a 2 anni (Bambino)

Accetta volontari sani

Sì

Metodo di campionamento

Campione non probabilistico

Popolazione di studio

I bambini con ND e le loro madri saranno reclutati tramite campionamento consecutivo e di convenienza presso l'U.O.C. "Riabilitazione Specialistica - Patologie Neuropsichiatriche dell'Età Evolutiva" e U.O.C. "Riabilitazione Funzionale" dell'Istituto Scientifico "E. Medea" (sito Bosisio Parini). I bambini a sviluppo tipico e le loro madri saranno reclutati presso le scuole materne della provincia di Lecco. Dopo aver visionato una lettera informativa che descrive la ricerca generale, le mamme saranno contattate telefonicamente e invitate a partecipare volontariamente.

Descrizione

Criterio di inclusione:

Bambini con SN:

  • Età compresa tra 3 e 24 mesi (cronologicamente o corretta nel caso di bambini nati prematuri);
  • ritardo dello sviluppo da lieve a moderato documentato da segni clinici (ad esempio, sintomi di lesione cerebrale all'esame neurologico o neuroimaging) o da scale di sviluppo (ad esempio, scale Griffiths III) associate a varie diagnosi (ad esempio, paralisi cerebrale, prematurità);
  • assenza di sindromi genetiche. La scala Griffiths III verrà utilizzata per valutare il livello generale di sviluppo del bambino.

Bambini con sviluppo tipico:

  • dalla nascita al termine;
  • età compresa tra 3 e 24 mesi (cronologica);
  • assenza di patologia peri- o postnatale.

Criteri di inclusione per le madri (DN e sviluppo tipico):

  • età superiore a 18 anni;
  • buona conoscenza della lingua italiana;
  • assenza di difficoltà cognitive e/o disturbi psichiatrici;
  • nessuna assunzione di farmaci psicotropi;
  • non fa parte di una famiglia monoparentale.

Criteri di esclusione: fare riferimento ai criteri di inclusione.

Piano di studio

Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.

Come è strutturato lo studio?

Dettagli di progettazione

  • Modelli osservazionali: Caso di controllo
  • Prospettive temporali: Trasversale

Coorti e interventi

Gruppo / Coorte
Intervento / Trattamento
bambini con ND
bambini con disabilità dello sviluppo neurologico (ND) di età compresa tra 3 e 24 mesi (cronologicamente o corretti nel caso di bambini nati prematuri).
Test diagnostico: Analisi della metilazione del DNA
Il DNA genomico sarà estratto da aliquote di 0,4 ml di ciascun campione di saliva utilizzando il protocollo suggerito dal produttore del kit, quantificato con Qubit 2.0 (Invitrogen) e conservato a -20°C. Aliquote di 250 ng di ciascun DNA saranno modificate per l'analisi di metilazione con il kit EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research). L'amplificazione dei campioni e la loro preparazione per il sequenziamento NGS saranno eseguiti come descritto. I campioni saranno sequenziati su NextSeq 500 (Illumina). Le singole sequenze processate (PE reads) saranno allineate indipendentemente alle sequenze di riferimento usando un algoritmo parallelo di Smith-Waterman. Verranno mantenute solo le letture allineate in modo coerente alla stessa sequenza di riferimento. In ogni sito CpG in ogni sequenza analizzata, le frequenze delle quattro basi saranno valutate e tabulate.
Test diagnostico: Analisi proteomica
I campioni di urina vengono raccolti con metodi non invasivi e vengono preparati secondo una procedura propedeutica al recupero quantitativo degli esosomi: una volta scongelati e centrifugati a 17.000 x g per 10 min a 4°C, i surnatanti recuperati vengono separati e centrifugati a 200.000 x g per 1 ore a 4°C. I pellet esosomici vengono separati, lavati ripetutamente e risospesi in tampone (NH4HCO3, 0,1 mM ph=7,8). La concentrazione proteica viene stimata con il kit SPNTM Protein Assay e ciascun campione (50 ± 0,5 μg di proteine) viene digerito con tripsina utilizzando un rapporto enzima/substrato di 1:50 (p/p) a 37 °C durante la notte (o/p). Viene eseguita una seconda digestione triptica con un rapporto enzima:substrato di 1:100 (p/p) per 4 ore. I campioni digeriti, centrifugati a 13.000 × g per 10 min, vengono purificati e concentrati utilizzando colonne PepClean C-18. I campioni ottenuti vengono analizzati mediante cromatografia liquida in fase inversa accoppiata a spettrometria di massa ad alta risoluzione.
Test diagnostico: Ancora affrontare il paradigma
Durante una sessione di osservazione, verrà effettuata una breve registrazione video dell'interazione madre-bambino di circa 10 minuti in un ambiente semi-strutturato per valutare la regolazione emotiva e il comportamento sociale del bambino. L'interazione sarà strutturata in 5 diverse fasi secondo il paradigma Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Gioco: le madri saranno invitate a interagire con i loro bambini per 10 minuti; Ancora: alle madri verrà chiesto di rimanere immobili mantenendo un viso inespressivo che non risponde e di non sorridere, toccare o parlare con il bambino per 2 minuti (Still#1: 2 minuti; Still#2: 2 minuti); Reunion: alle mamme verrà chiesto di riprendere l'attività di gioco con i propri per altri 2 minuti (Reunion#1: 2 minuti; Reunion#2: 2 minuti).
Bambini sviluppati tipici (TD)
bambini con età di sviluppo tipica compresa tra 3 e 24 mesi (cronologico).
Test diagnostico: Analisi della metilazione del DNA
Il DNA genomico sarà estratto da aliquote di 0,4 ml di ciascun campione di saliva utilizzando il protocollo suggerito dal produttore del kit, quantificato con Qubit 2.0 (Invitrogen) e conservato a -20°C. Aliquote di 250 ng di ciascun DNA saranno modificate per l'analisi di metilazione con il kit EZ DNA Methylation Lightning (Zymo Research). L'amplificazione dei campioni e la loro preparazione per il sequenziamento NGS saranno eseguiti come descritto. I campioni saranno sequenziati su NextSeq 500 (Illumina). Le singole sequenze processate (PE reads) saranno allineate indipendentemente alle sequenze di riferimento usando un algoritmo parallelo di Smith-Waterman. Verranno mantenute solo le letture allineate in modo coerente alla stessa sequenza di riferimento. In ogni sito CpG in ogni sequenza analizzata, le frequenze delle quattro basi saranno valutate e tabulate.
Test diagnostico: Analisi proteomica
I campioni di urina vengono raccolti con metodi non invasivi e vengono preparati secondo una procedura propedeutica al recupero quantitativo degli esosomi: una volta scongelati e centrifugati a 17.000 x g per 10 min a 4°C, i surnatanti recuperati vengono separati e centrifugati a 200.000 x g per 1 ore a 4°C. I pellet esosomici vengono separati, lavati ripetutamente e risospesi in tampone (NH4HCO3, 0,1 mM ph=7,8). La concentrazione proteica viene stimata con il kit SPNTM Protein Assay e ciascun campione (50 ± 0,5 μg di proteine) viene digerito con tripsina utilizzando un rapporto enzima/substrato di 1:50 (p/p) a 37 °C durante la notte (o/p). Viene eseguita una seconda digestione triptica con un rapporto enzima:substrato di 1:100 (p/p) per 4 ore. I campioni digeriti, centrifugati a 13.000 × g per 10 min, vengono purificati e concentrati utilizzando colonne PepClean C-18. I campioni ottenuti vengono analizzati mediante cromatografia liquida in fase inversa accoppiata a spettrometria di massa ad alta risoluzione.
Test diagnostico: Ancora affrontare il paradigma
Durante una sessione di osservazione, verrà effettuata una breve registrazione video dell'interazione madre-bambino di circa 10 minuti in un ambiente semi-strutturato per valutare la regolazione emotiva e il comportamento sociale del bambino. L'interazione sarà strutturata in 5 diverse fasi secondo il paradigma Still Face (Tronick et al., 1978): Play, Still#1, Reunion#1, Still#2, Reunion#2. Gioco: le madri saranno invitate a interagire con i loro bambini per 10 minuti; Ancora: alle madri verrà chiesto di rimanere immobili mantenendo un viso inespressivo che non risponde e di non sorridere, toccare o parlare con il bambino per 2 minuti (Still#1: 2 minuti; Still#2: 2 minuti); Reunion: alle mamme verrà chiesto di riprendere l'attività di gioco con i propri per altri 2 minuti (Reunion#1: 2 minuti; Reunion#2: 2 minuti).

Cosa sta misurando lo studio?

Misure di risultato primarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Stato di metilazione del DNA infantile
Lasso di tempo: 1 giorno, al reclutamento
Lo stato di metilazione del DNA (es. percentuale) di geni candidati (ad es. OXTR, SLC6A4, BDNF e DRD4) saranno valutati da campioni salivari ottenuti da neonati.
1 giorno, al reclutamento
Regolazione del comportamento infantile
Lasso di tempo: 1 giorno, al reclutamento
La regolazione comportamentale infantile (cioè l'emotività negativa) sarà codificata micro-analiticamente (cioè secondo per secondo) da videocassette di interazioni madre-bambino.
1 giorno, al reclutamento

Misure di risultato secondarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Schemi proteomici infantili
Lasso di tempo: 1 giorno, al reclutamento
I pattern proteomici saranno valutati per la quantità relativa e le modificazioni post-traduzionali delle proteine ​​candidate, ritenute coinvolte nella risposta allo stress nei neonati.
1 giorno, al reclutamento

Collaboratori e investigatori

Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.

Sponsor

IRCCS Eugenio Medea

Studiare le date dei record

Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.

Studia le date principali

Inizio studio (Effettivo)

7 aprile 2021

Completamento primario (Stimato)

30 novembre 2023

Completamento dello studio (Stimato)

31 dicembre 2023

Date di iscrizione allo studio

Primo inviato

30 luglio 2021

Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità

12 agosto 2021

Primo Inserito (Effettivo)

13 agosto 2021

Aggiornamenti dei record di studio

Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)

18 ottobre 2023

Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC

17 ottobre 2023

Ultimo verificato

1 ottobre 2023

Maggiori informazioni

Termini relativi a questo studio

Altri numeri di identificazione dello studio

  • RC2021_820

Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio

Studia un prodotto farmaceutico regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

No

Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

No

Queste informazioni sono state recuperate direttamente dal sito web clinicaltrials.gov senza alcuna modifica. In caso di richieste di modifica, rimozione o aggiornamento dei dettagli dello studio, contattare register@clinicaltrials.gov. Non appena verrà implementata una modifica su clinicaltrials.gov, questa verrà aggiornata automaticamente anche sul nostro sito web .

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