Imunitní reakce na infekci nebo očkování COVID-19

1. Pozadí a přehled Společnost Aditxt, Inc, ve spolupráci s výzkumníky ze Stanfordské univerzity, vyvinula laboratorně vyvinuté testy (LDT) pro současné monitorování protilátek proti SARS-COV2 (IgG, IgA a IgM) namířených proti 3 různým antigenům SARS-CoV-2. (RBD, S1 a NP), stejně jako hodnocení aktivity neutralizačních protilátek SARS-CoV-2.

   Tyto testy jsou v současné době běžně nabízeny veřejnosti jako AditxtScoreTM v klinické laboratoři Aditxt s certifikací CLIA a akreditované CAP v Richmondu, VA. Aditxt také provádí tyto testy pro účely výzkumu a vývoje v zařízení v Mountain View, CA. AditxtScore poskytuje ideální platformu pro výzkum imunitních reakcí na expozici SARS-CoV-2 a také na vakcíny COVID-19 v reálném světě.

   Celkovým účelem této observační kohortové studie je charakterizovat COVID-specifické imunitní reakce na expozici SARS-CoV-2 nebo očkování proti COVID v reálném prostředí. Účastníci budou požádáni, aby poskytli vzorky krve (buď běžný odběr žilní krve, několik kapek krve získané pomocí malého zařízení na napichování prstu, nebo obojí), a také vzorek slin nebo nosního výtěru při sérii návštěv. Subjekty obdrží výsledky testování, které je schváleno pro rutinní klinické použití (tj. jejich AditxtScore), zatímco zbytkové vzorky z každé návštěvy budou uloženy pro budoucí testování. Tyto snahy podpoří pokračující vývoj testu AditxtScore a zvýší efektivitu jeho interpretace – napomáhají snaze maximalizovat přínosy klinického laboratorního testování při pandemické reakci.

2. Cíle • Charakterizovat imunitní reakce (např. velikost/sílu a časovou dynamiku tvorby protilátek, změnu tříd a perzistenci protilátek) po expozici viru SARS-CoV-2 nebo očkování proti COVID-19.

   • Zkoumat rozdíly v imunitních odpovědích mezi skupinou (např. vakcína vs. přirozená expozice) a v rámci skupiny (tj. individuální variace).

   • Stanovit vztah mezi složkami AditxtScore a aktivitou neutralizačních protilátek a dalšími potenciálními koreláty ochrany a popsat možné klinické koreláty charakteristik imunitní odpovědi.

   • Podporovat činnosti související s vývojem testů, jako je stanovení vhodných klinických limitů, stabilita analytu a srovnatelnost výsledků z různých typů vzorků (např. odběr žilní krve vs. kapka krve z prstu, výtěr z nosu vs. odběr slin). Tyto aktivity podpoří zdokonalování stávajících testů i vývoj budoucích testů (např. COVID-19 specifické paměťové reakce B buněk, T buněk a NK buněk).

3. Studijní postupy 3a. Nábor subjektů Nábor subjektů bude sestávat především z ústního úsilí studijního personálu (např. sítě přátel a rodiny) a další zainteresované strany v místní komunitě (např. hrstka místních lékařů). Nepředpokládá se žádná široká reklamní kampaň, i když na podporu náboru bude použit leták s oznámením o studii popisující studijní příležitost. Potenciální subjekty budou nasměrovány, aby zavolali Aditxt, aby si naplánovali čas, kdy přijdou do laboratoře a dozví se více o studii.

Kdokoli, kdo v minulosti byl vystaven SARS-CoV-2, s možnou současnou infekcí nebo v anamnéze očkování, se může zúčastnit kromě negativních kontrol v případě potřeby. Bude vyvinuto úsilí o zahrnutí reprezentativní směsi věků, pohlaví a etnických skupin.

Za zvláštních okolností, kdy by se potenciální subjekt chtěl zúčastnit studie, ale nemůže se dostavit ani do umístění Aditxt (v Richmondu, VA nebo Mountain View, CA) a má přístup ke kvalifikovanému flebotomovi, sběrné materiály mohou být zaslány kvalifikovaným flebotomem ve své oblasti pro sbírky. V tomto případě by vzorky byly odeslány přes noc do Aditxt ke zpracování. Formuláře souhlasu a dotazník pro pacienty budou zaslány účastníkovi předem e-mailem a zkontrolovány s vyšetřovatelem na dálku (např. pomocí zoomu nebo telefonního hovoru), podepsány a odeslány do Aditxt spolu se vzorky.

3b. Administrace informovaného souhlasu a ochrana soukromí Potenciální účastníci studie budou převezeni do soukromé místnosti v zařízení Aditxt buď v Richmondu, VA nebo Mountain View, CA, a formulář souhlasu jim vysvětlí člen studijního týmu. Jakmile budou zodpovězeny všechny otázky, pokud se rozhodnou zúčastnit, podepíší formulář souhlasu. V situaci, kdy jsou vzorky odebírány na jiném místě, budou formuláře souhlasu a autorizace zaslány e-mailem potenciálnímu subjektu, vytištěny a zkontrolovány se členem studijního týmu na dálku (např. pomocí zoomu nebo telefonického hovoru), dokud nebudou všechny otázky byly zodpovězeny. Dokumenty o souhlasu budou poté podepsány a předloženy spolu se vzorem.

Studijní personál poté přidělí účastníkovi číslo předmětu a zapíše název předmětu, číslo předmětu a datum souhlasu do elektronického zápisníku (v excelové tabulce). Záznam o zápisu bude uchováván na zabezpečeném místě na souborovém serveru Aditxt s přístupem omezeným pouze na určené studijní pracovníky.

Jméno a datum narození subjektu bude použito při provádění „rutinního“ testování při každé návštěvě (tj. testu na virus PCR a testů na protilátky) a standardní klinické zprávy s jejich jmény – vhodné pro rozhovory s jejich běžnými lékaři – budou vygenerovat a doručit subjektům. K identifikaci pacientských dotazníků a alikvotů vzorků uložených pro budoucí testování však budou použita pouze čísla subjektů.

4c. Vyplnění dotazníku pro pacienty Po přihlášení bude subjektům poskytnut krátký dotazník k vyplnění, který bude obsahovat informace o demografických údajích, jakýchkoli příznacích, které mohou souviset s COVID, případných komorbidních stavech a současných lécích, které užívají. Při každé následné návštěvě bude poskytnut následný dotazník.

4d. Kolekce vzorků

• Zdravotní a bezpečnostní opatření Vzhledem k potenciálnímu riziku přenosu viru budou u každého souboru studie dodržována následující bezpečnostní opatření (jedná se o stejná opatření, která vyžaduje Aditxt pro všechny běžné odběry vzorků)

  - Ve sběrném prostoru bude povolen přístup vždy pouze jednomu subjektu.

  - Správné osobní ochranné prostředky (OOP) musí vždy nosit personál provádějící odběr, pokud je ve vzdálenosti do 6 stop od pacienta. To zahrnuje ochranný plášť, rukavice, ochrannou masku a obličejový štít.

  - Pacienti musí v oblasti odběru nosit ochrannou masku, kromě případů, kdy se provádí měření teploty a odběr výtěru z nosu.

  - Pracovníci odběrové laboratoře mezi odběry pacientů vyčistí odběrové lůžko dezinfekčním ubrouskem.

  - Po odběru a pacientovi opuštění oblasti odběru si pracovníci laboratoře pro odběr vymění rukavice a použijí dezinfekční prostředek na ruce v několika krocích při odstraňování OOP, jak je uvedeno v části Postup níže, aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci dotykových povrchů, včetně ochranného pláště. obličejový štít a ochranná maska.

  - Po sejmutí OOPP si pracovníci laboratorního odběru umyjí ruce mýdlem a vodou před zahájením dalšího odběru pacienta.

  • Obličejové štíty budou mezi každým odběrem pacienta vyčištěny dezinfekčním ubrouskem.
  • Ochranné masky a pláště mohou být uchovávány pro opakované použití mezi odběry pacientů, pokud není pozorována žádná kontaminace OOP nebo existuje podezření na ni.
• Flebotomie Vzorky krve budou odebírány stejně jako vzorky běžně odebrané pro klinickou praxi, jak je popsáno v Aditxt SOP 6037 Anti-SARS-CoV-2 Postup flebotomie.
• Sliny Účastníci budou požádáni, aby si vypláchli ústa vodou 5 minut před odběrem. Dostanou zkumavku o objemu 3 ml a budou požádáni, aby ji naplnili (tím, že se jim v ústech nechají sliny shromáždit a pak je vyplivnou do zkumavky).
• Nosní výtěry Vzorky nosních výtěrů budou odebírány stejně jako vzorky běžně odebrané pro klinickou praxi, jak je popsáno v Aditxt SOP 6036 SARS-CoV-2 Postup při odběru nosních výtěrů.
• Hůl na prst

Odběr kapilární krve z prstu bude proveden následovně:

• Otřete místo vpichu (konec kteréhokoli prstu, který subjekt preferuje) alkoholovým tamponem a sejměte ochranný kryt z lancety.
• Umístěte lancetu kolmo ke spodní straně prstu a propíchněte kůži jemným přitlačením lancety na místo vpichu, dokud se neaktivuje.
• Jemně zatlačte na okolní tkáň. Vyhoďte první kapku krve.
• Držte prst a kapiláru v poloze směrem dolů. Dotkněte se špičkou kapiláry kapičky krve. Zkumavka se automaticky naplní díky kapilárnímu efektu. Odeberte 3-4 kapky krve (150-250 mikroL).
• Po odběru krve vyjměte kapiláru ze zkumavky, zlikvidujte ji a zatlačte na místo vpichu.
• Po odběru zkumavku několikrát jemně obraťte.

• Přiložte náplast na místo vpichu.

  4e. Následné návštěvy Subjektům bude doporučeno, aby se vracely do Aditxt každé 1-2 měsíce pro další odběr vzorků po dobu až 2 let. Při každé následné návštěvě vyplní subjekt aktualizovaný dotazník. Dotazníková a laboratorní data budou uložena v databázi studie a identifikována pouze podle čísla subjektu, což umožní provedení dalších studií na již neidentifikovaných datech.

  4f. Laboratorní postupy / hlášení Protilátky anti-SARS-CoV-2 a aktivita neutralizačních protilátek budou hodnoceny metodou průtokové cytometrie AditxtScoreTM od Aditx Therapeutics. Testování antigenů/virů bude provedeno na systému iAMP COVID-19 od Atila Biosystems. Klinické laboratorní zprávy popisující výsledky tohoto testování budou poskytnuty subjektům (přesně jako kdyby si testování přímo zakoupili).

Kromě toho budou dodrženy požadavky na podávání zpráv stanovené ministerstvem HHS USA a ministerstvem zdravotnictví Virginie. Náš přístup k hlášení všech rutinních výsledků je v souladu s pokyny FDA (Zásady pro testy Coronavirus Disease-2019 během nouzového stavu veřejného zdraví (revidováno)). Výsledky budoucího experimentálního testování provedeného na skladovaných vzorcích budou deidentifikace. Jednotlivci nebudou informováni o výsledcích budoucích experimentálních testů.

AditxtScoreTM

o Nová metoda založená na průtokové cytometrii, která umožňuje současné sledování IgG, IgA a IgM protilátek proti 3 různým antigenům COVID, doprovázené testem na odpovídající aktivitu neutralizujících protilátek

iAMP systém COVID-19 (Atila Biosystems)

• Izotermická amplifikace PCR technologie detekující sekvence z genu „N“ i genu ORF-1ab viru SARS-CoV-2
• Schváleno pro použití FDA pod EUA Aditxt v současné době tuto testovací službu běžně nabízí).