Respostas imunes à infecção ou vacinação por COVID-19

1. Histórico e visão geral Aditxt, Inc, em colaboração com pesquisadores da Universidade de Stanford, desenvolveu testes laboratoriais (LDTs) para monitorar simultaneamente anticorpos anti-SARS-COV2 (IgG, IgA e IgM) direcionados contra 3 antígenos SARS-CoV-2 diferentes (RBD, S1 e NP), bem como avaliar a atividade do anticorpo neutralizante de SARS-CoV-2.

   Atualmente, esses testes estão sendo oferecidos rotineiramente ao público como o AditxtScoreTM no laboratório clínico certificado pela CLIA da Aditxt e credenciado pela CAP em Richmond, VA. A Aditxt também realiza esses testes para fins de pesquisa e desenvolvimento em uma instalação em Mountain View, CA. O AditxtScore fornece uma plataforma ideal para investigações do mundo real de respostas imunes à exposição ao SARS-CoV-2, bem como às vacinas COVID-19.

   O objetivo geral deste estudo de coorte observacional é caracterizar as respostas imunes específicas do COVID à exposição ao SARS-CoV-2 ou à vacinação contra o COVID em um cenário do mundo real. Os participantes serão solicitados a fornecer amostras de sangue (uma coleta de sangue venoso normal, algumas gotas de sangue obtidas com um pequeno dispositivo de picada no dedo ou ambos), bem como amostras de saliva ou swab nasal em uma série de visitas. Os indivíduos receberão os resultados dos testes aprovados para uso clínico de rotina (ou seja, seu AditxtScore), enquanto as amostras residuais de cada visita serão armazenadas para testes futuros. Esses esforços apoiarão o desenvolvimento contínuo do teste AditxtScore e aumentarão a eficácia de sua interpretação - ajudando nos esforços para maximizar os benefícios dos testes de laboratório clínico na resposta à pandemia.

2. Objetivos • Caracterizar as respostas imunes (por exemplo, magnitude/força e dinâmica temporal da geração de anticorpos, mudança de classe e persistência de anticorpos) após exposição ao vírus SARS-CoV-2 ou vacinação contra COVID-19.

   • Investigar diferenças entre grupos (por exemplo, vacina versus exposição natural) e dentro do grupo (ou seja, variação individual) nas respostas imunes.

   • Determinar a relação entre os componentes do AditxtScore e a atividade do anticorpo neutralizante e outros potenciais correlatos de proteção, e descrever possíveis correlatos clínicos das características da resposta imune.

   • Para apoiar atividades de desenvolvimento de teste, como determinar pontos de corte clínicos apropriados, estabilidade do analito e comparabilidade de resultados de diferentes tipos de amostra (por exemplo, coleta de sangue venoso versus gota de sangue por picada no dedo, swab nasal versus coleta de saliva). Essas atividades apoiarão o refinamento dos testes existentes, bem como o desenvolvimento de testes futuros (por exemplo, Respostas de células B, células T e células NK de memória específica para COVID-19).

3. Procedimentos de estudo 3a. Recrutamento de sujeitos O recrutamento de sujeitos consistirá principalmente de esforços boca a boca do pessoal do estudo (por exemplo, redes de amigos e familiares) e outras partes interessadas na comunidade local (por exemplo, um punhado de médicos locais). Nenhuma campanha publicitária ampla está prevista, embora um folheto de anúncio do estudo descrevendo a oportunidade de estudo seja usado para apoiar os esforços de recrutamento. Sujeitos em potencial serão orientados a ligar para a Aditxt para agendar um horário para vir ao laboratório e aprender mais sobre o estudo.

Qualquer pessoa com histórico anterior de exposição ao SARS-CoV-2, possível infecção atual ou histórico de vacinação pode participar, além de controles negativos quando necessário. Esforços serão feitos para incluir uma mistura representativa de idades, gêneros e etnias.

Na circunstância especial em que um indivíduo em potencial gostaria de participar do estudo, mas não pode ir ao local da Aditxt (em Richmond, VA ou Mountain View, CA) e tem acesso a um flebotomista qualificado, os materiais de coleta podem ser enviados para um flebotomista qualificado em sua área para coletas. Nesse caso, as amostras seriam enviadas durante a noite para a Aditxt para processamento. Os formulários de consentimento e o questionário do paciente serão enviados por e-mail ao participante com antecedência e revisados ​​com o investigador remotamente (por exemplo, via zoom ou telefonema), assinados e enviados ao Aditxt junto com as amostras.

3b. Administração do Consentimento Informado e Proteção da Privacidade Os possíveis participantes do estudo serão levados para uma sala privada nas instalações da Aditxt em Richmond, VA ou Mountain View, CA e o formulário de consentimento será explicado a eles por um membro da equipe do estudo. Depois que todas as perguntas forem respondidas, se eles optarem por participar, assinarão o termo de consentimento. Em uma situação em que as amostras estão sendo coletadas em um local diferente, os formulários de consentimento e autorização serão enviados por e-mail ao potencial sujeito, impressos e revisados ​​com um membro da equipe do estudo remotamente (por exemplo, via zoom ou telefonema) até que todas as perguntas foram respondidas. Os documentos de consentimento serão assinados e enviados juntamente com a amostra.

A equipe do estudo atribuirá ao participante um número de sujeito e inserirá o nome do sujeito, o número do sujeito e a data de consentimento em um registro eletrônico de inscrição (em uma planilha do Excel). O registro de inscrição será mantido em um local seguro no servidor de arquivos da Aditxt, com acesso restrito apenas ao pessoal do estudo designado.

O nome e a data de nascimento dos sujeitos serão usados ​​ao realizar o teste de "rotina" em cada visita (ou seja, o teste de vírus PCR e os testes de anticorpos), e os relatórios clínicos padrão com seus nomes - apropriados para conversar com seus médicos regulares - serão ser gerado e entregue aos súditos. No entanto, apenas os números dos sujeitos serão usados ​​para identificar os questionários do paciente e as alíquotas de amostra armazenadas para testes futuros.

4c. Preenchimento do questionário do paciente Uma vez inscritos, os participantes receberão um breve questionário para preencher para coletar informações sobre dados demográficos, quaisquer sintomas que possam estar relacionados ao COVID, quaisquer comorbidades e medicamentos atuais que estejam tomando. Um questionário de acompanhamento será fornecido em cada visita de acompanhamento.

4d. Coleta de amostras

• Precauções de saúde e segurança Devido ao risco potencial de transmissão viral, as seguintes precauções de segurança serão seguidas para cada coleta de estudo (essas são as mesmas precauções exigidas pelo Aditxt para todas as coletas de amostras de rotina)

  - Só será permitida a entrada de um sujeito por vez na área de coleta.

  - O equipamento de proteção individual (EPI) adequado sempre deve ser usado pelo pessoal de coleta quando estiver a menos de 1,8 m do paciente. Isso inclui um vestido de proteção, luvas, máscara de proteção e protetor facial.

  - Os pacientes devem usar máscara de proteção na área de coleta, exceto quando for realizada medição de temperatura e coleta de swab nasal.

  - O pessoal de coleta do laboratório limpará o assento de coleta com um pano desinfetante entre as coletas dos pacientes.

  - Após a coleta e o paciente deixar a área de coleta, a equipe de coleta do laboratório trocará as luvas e usará desinfetante para as mãos em várias etapas da remoção do EPI, conforme descrito na seção Procedimento abaixo, para garantir a não contaminação das superfícies tocadas, incluindo o avental de proteção, escudo facial e máscara de proteção.

  - Após a retirada do EPI, o pessoal da coleta do laboratório lavará as mãos com água e sabão antes de iniciar a próxima coleta do paciente.

  • Os protetores faciais serão limpos com um pano desinfetante entre cada coleta de paciente.
  • Máscaras e batas de proteção podem ser armazenadas para reutilização entre coletas de pacientes, se nenhuma contaminação do EPI for observada ou suspeitada.
• Flebotomia As amostras de sangue serão coletadas de forma idêntica àquelas coletadas rotineiramente para a prática clínica, conforme descrito no procedimento de flebotomia anti-SARS-CoV-2 da Aditxt SOP 6037.
• Saliva Os participantes serão solicitados a enxaguar a boca com água 5 minutos antes da coleta. Eles receberão um tubo de 3 mL e serão solicitados a preenchê-lo (permitindo que a saliva se acumule em suas bocas e, em seguida, cuspindo-a no tubo).
• Swabs nasais As amostras de swab nasal serão coletadas de forma idêntica àquelas coletadas rotineiramente para a prática clínica, conforme descrito no procedimento de coleta de swab nasal SOP 6036 SARS-CoV-2 da Aditxt.
• Picada no dedo

A coleta de sangue capilar por punção digital será realizada da seguinte forma:

• Limpe o local da punção (a ponta do dedo que o paciente preferir) com uma compressa embebida em álcool e remova a tampa protetora da lanceta.
• Posicione a lanceta perpendicularmente à parte inferior do dedo e perfure a pele pressionando suavemente a lanceta contra o local da punção até que seja ativada.
• Aplique pressão suavemente no tecido circundante. Descarte a primeira gota de sangue.
• Segure o dedo e o tubo capilar para baixo. Toque a ponta do capilar na gota de sangue. O tubo se encherá automaticamente devido ao efeito capilar. Colete 3-4 gotas de sangue (150-250 microL).
• Após a coleta de sangue, retire o capilar do tubo, descarte e aplique pressão no local da punção.
• Após a coleta, inverter o tubo suavemente várias vezes.

• Aplique band-aid no local da punção.

  4e. Visitas de acompanhamento Os indivíduos serão incentivados a retornar ao Aditxt a cada 1-2 meses para coleta de amostras adicionais por até 2 anos. Um questionário atualizado será preenchido pelo sujeito em cada visita de acompanhamento. Os dados do questionário e do laboratório serão armazenados no banco de dados do estudo e identificados apenas pelo número do sujeito, permitindo que estudos adicionais sejam realizados nos dados agora não identificados.

  4f. Procedimentos de Laboratório / Relatórios Os anticorpos anti-SARS-CoV-2 e a atividade do anticorpo neutralizante serão avaliados pelo método de citometria de fluxo AditxtScoreTM da Aditx Therapeutics. O teste de antígeno/vírus será realizado no sistema iAMP COVID-19 da Atila Biosystems. Relatórios de laboratório clínico descrevendo os resultados deste teste serão fornecidos aos participantes (exatamente como se eles tivessem comprado o teste diretamente).

Além disso, os requisitos de relatórios estabelecidos pelo Departamento de HHS dos EUA e pelo Departamento de Saúde da Virgínia serão cumpridos. Nossa abordagem para relatar todos os resultados de rotina é consistente com a orientação da FDA (Política para testes de doença de coronavírus-2019 durante a emergência de saúde pública (revisada)). Os resultados de testes experimentais futuros realizados em amostras armazenadas serão desidentificados. Os indivíduos não serão notificados sobre resultados de testes experimentais futuros.

AditxtScoreTM

o Novo método baseado em citometria de fluxo que permite o monitoramento simultâneo de anticorpos IgG, IgA e IgM contra 3 antígenos COVID diferentes, acompanhado de um teste para atividade de anticorpo neutralizante correspondente

Sistema iAMP COVID-19 (Atila Biosystems)

• Tecnologia de PCR de amplificação isotérmica que detecta sequências do gene "N" e do gene ORF-1ab do vírus SARS-CoV-2
• Aprovado para uso pelo FDA sob um EUA A Aditxt está oferecendo atualmente este serviço de teste rotineiramente).