Immunreakciók COVID-19 fertőzésre vagy védőoltásra

1. Háttér és áttekintés Az Aditxt, Inc. a Stanford Egyetem kutatóival együttműködve laboratóriumi teszteket (LDT) fejlesztett ki a három különböző SARS-CoV-2 antigén elleni SARS-COV2 antitestek (IgG, IgA és IgM) egyidejű monitorozására. (RBD, S1 és NP), valamint a SARS-CoV-2 neutralizáló antitestaktivitás értékelése.

   Ezeket a teszteket jelenleg rutinszerűen kínálják a nyilvánosság számára AditxtScoreTM néven az Aditxt CLIA tanúsítvánnyal rendelkező, CAP-akkreditált klinikai laboratóriumában Richmondban, VA. Az Aditxt kutatási és fejlesztési célból is elvégzi ezeket a teszteket egy Mountain View-i (CA) létesítményben. Az AditxtScore ideális platformot biztosít a SARS-CoV-2 expozícióra, valamint a COVID-19 vakcinákra adott immunválaszok valós világban történő vizsgálatához.

   Ennek a megfigyeléses kohorszvizsgálatnak az általános célja a COVID-specifikus immunválaszok jellemzése a SARS-CoV-2 expozícióval vagy a COVID-oltással szemben, valós környezetben. A résztvevőktől vérmintát (vagy normál vénás vérvételt, néhány csepp vért kisujjpálcával vettek, vagy mindkettőt), valamint nyál- vagy orrtamponmintát kell adni egy látogatássorozat alkalmával. Az alanyok megkapják a rutin klinikai használatra jóváhagyott teszteredményeket (azaz AditxtScore-jukat), míg az egyes vizitek maradékmintáit a jövőbeni vizsgálatokhoz tárolják. Ezek az erőfeszítések támogatják a folyamatban lévő AditxtScore tesztfejlesztést, és fokozzák annak értelmezésének hatékonyságát – segítve a klinikai laboratóriumi vizsgálatok előnyeinek maximalizálását a világjárvány elleni küzdelemben.

2. Célkitűzések • A SARS-CoV-2 vírussal való érintkezést vagy a COVID-19 vakcinázást követő immunválaszok jellemzése (pl. az antitestképződés mértéke/erőssége és időbeli dinamikája, az osztályváltás és az antitestek megmaradása).

   • Az immunválaszok csoportok közötti (pl. vakcina vs. természetes expozíció) és csoporton belüli (azaz egyéni variációk) közötti különbségek vizsgálata.

   • Az AditxtScore komponensek és a neutralizáló antitest aktivitás és a védelem egyéb lehetséges korrelációi közötti kapcsolat meghatározása, valamint az immunválasz jellemzőinek lehetséges klinikai összefüggéseinek leírása.

   • A tesztfejlesztési tevékenységek támogatása, mint például a megfelelő klinikai vágási pontok meghatározása, az analit stabilitása és a különböző mintatípusokból származó eredmények összehasonlíthatósága (pl. vénás vérvétel vs. ujjbegyből történő vércsepp, orrváladék vs. nyálgyűjtés). Ezek a tevékenységek támogatják a meglévő tesztek finomítását, valamint a jövőbeni tesztek fejlesztését (pl. COVID-19 specifikus memória B-sejtek, T-sejtek és NK-sejtek válaszai).

3. Tanulmányi eljárások 3a. Tantárgy-toborzás A tantárgy-toborzás elsősorban a tanulmányozó személyzet szájról szájra tett erőfeszítéseiből áll (pl. baráti és családi hálózatok) és a helyi közösség más érdekelt felei (például egy maroknyi helyi orvos). Nem várható széles körű reklámkampány, bár a tanulmányi lehetőséget ismertető tanulmányi szórólap segítségével támogatják a toborzási erőfeszítéseket. A potenciális alanyokat arra kérik, hogy hívják fel az Aditxt-et, hogy időpontot egyeztethessenek a laboratóriumba érkezésre, és többet megtudjanak a vizsgálatról.

Bárki részt vehet a részvételen, akinek korábban SARS-CoV-2-expozíciója, esetleges jelenlegi fertőzése vagy oltási előzménye van, szükség esetén negatív kontrollokon kívül. Törekedni fognak arra, hogy az életkorok, nemek és etnikai hovatartozások reprezentatív keverékét is bevonják.

Abban a különleges esetben, ha egy potenciális alany szeretne részt venni a vizsgálatban, de nem tud eljönni az Aditxt egyik helyszínére (Richmond, VA vagy Mountain View, CA), és hozzáfér egy képzett phlebotomistához, a gyűjtőanyagokat el lehet küldeni egy szakképzett phlebotomist a területükön a gyűjteményekhez. Ebben az esetben a mintákat egy éjszakán át az Aditxt-be szállítják feldolgozásra. A beleegyezési űrlapokat és a betegkérdőívet e-mailben elküldik a résztvevőnek, és a vizsgálóval távolról (például zoommal vagy telefonhívással) felülvizsgálják, aláírják, és a mintákkal együtt benyújtják az Aditxt-nek.

3b. A tájékozott beleegyezés adminisztrációja és a magánélet védelme A potenciális vizsgálatban résztvevőket az Aditxt Richmondban, VA-ban vagy Mountain View-ban, Kalifornia államban található létesítményének privát szobájába viszik, és a beleegyezési űrlapot a vizsgálati csoport egy tagja elmagyarázza nekik. Az összes kérdés megválaszolása után, ha úgy döntenek, hogy részt vesznek, aláírják a hozzájárulási űrlapot. Abban az esetben, ha a mintákat egy másik helyen gyűjtik, a beleegyezési és felhatalmazási űrlapokat e-mailben elküldik a potenciális alanynak, kinyomtatják, és a vizsgálati csoport egyik tagjával távolról (például zoommal vagy telefonhívással) ellenőrzik, amíg minden kérdés meg nem jelenik. válaszoltak. Ezt követően a hozzájárulási dokumentumokat aláírják, és a mintával együtt benyújtják.

A vizsgálati személyzet ezután tantárgyszámot ad a résztvevőnek, és egy elektronikus beiratkozási naplóba (Excel-táblázatba) írja be a tantárgy nevét, tárgyszámát és a hozzájárulás dátumát. A beiratkozási naplót egy biztonságos helyen vezetik az Aditxt fájlszerverén, amelyhez csak a kijelölt vizsgálati személyzet férhet hozzá.

Az alanyok nevét és születési idejét használjuk a „rutin” vizsgálatok elvégzésekor minden vizit alkalmával (azaz a PCR vírusteszt és az antitesttesztek), és a szokásos klinikai jelentések a nevükkel – amelyek alkalmasak a szokásos orvosaikkal való beszélgetésre – kerülnek felhasználásra. létre kell hozni és eljuttatni az alanyokhoz. A páciens kérdőíveinek és a jövőbeni vizsgálatok céljára tárolt minta alikvotjainak azonosításához azonban csak az alanyszámokat használjuk fel.

4c. Betegkérdőív kitöltése A beiratkozást követően az alanyok egy rövid kérdőívet kapnak, amelyet kitöltenek, hogy információkat szerezzenek a demográfiai adatokról, a COVID-hoz kapcsolódó tünetekről, az esetleges társbetegségekről és a jelenleg szedett gyógyszerekről. Minden utóellenőrző látogatás alkalmával nyomon követő kérdőívet adunk ki.

4d. Minta kollekció

• Egészségügyi és biztonsági óvintézkedések A vírusfertőzés lehetséges kockázata miatt a következő biztonsági óvintézkedéseket minden vizsgálati gyűjteménynél be kell tartani (ezek ugyanazok az óvintézkedések, amelyeket az Aditxt minden rutin mintavételnél megkövetel)

  - Egyszerre csak egy tantárgy kerülhet a gyűjtőterületre.

  - A begyűjtő személyzetnek mindig megfelelő személyi védőfelszerelést (PPE) kell viselnie, ha a betegtől 6 méteren belül van. Ez magában foglalja a védőruhát, kesztyűt, védőmaszkot és arcvédőt.

  - A betegeknek védőmaszkot kell viselniük a gyűjtési területen, kivéve, ha hőmérsékletmérés és orrtampon vétel történik.

  - A laboratóriumi gyűjtőszemélyzet fertőtlenítő kendővel tisztítja meg a gyűjtőülést a betegfelvételek között.

  - Miután a begyűjtést követően a beteg elhagyta a gyűjtőterületet, a laboratóriumi gyűjtőszemélyzet kesztyűt cserél és kézfertőtlenítőt használ az egyéni védőeszközök eltávolítása során az alábbi Eljárás szakaszban leírtak szerint, hogy ne szennyeződjön az érintett felület, beleértve a védőköpenyt is, arcvédő és védőmaszk.

  - A PPE eltávolítása után a laboratóriumi gyűjtőszemélyzet szappannal és vízzel kezet mos a következő beteggyűjtés megkezdése előtt.

  • Az arcvédőket fertőtlenítő törlőkendővel tisztítjuk minden egyes beteggyűjtés között.
  • A védőmaszkok és -köpenyek tárolhatók újrafelhasználás céljából a beteggyűjtések között, ha nem észlelik vagy gyanítják a PPE szennyeződését.
• Flebotómia A vérmintákat a klinikai gyakorlatban rutinszerűen gyűjtött vérmintákkal azonos módon veszik, az Aditxt SOP 6037 Anti-SARS-CoV-2 phlebotomiás eljárásában leírtak szerint.
• Nyál A résztvevőket megkérjük, hogy 5 perccel a gyűjtés előtt öblítsék ki vízzel a szájukat. Kapnak egy 3 ml-es csövet, és megkérik, hogy töltsék meg (ha hagyják, hogy a nyál összegyűljön a szájukban, majd kiköpje a tubusba).
• Orrtamponok Az orrtamponmintákat ugyanúgy gyűjtik, mint a klinikai gyakorlatban rutinszerűen gyűjtötteket, az Aditxt SOP 6036 SARS-CoV-2 orrtampongyűjtési eljárásában leírtak szerint.
• Ujjbot

Az ujjbegyes kapilláris vérvétel a következőképpen történik:

• Törölje le a szúrás helyét (amelyik ujja hegyét szereti az alany) alkoholos tömlővel, és távolítsa el a védőburkolatot a lándzsáról.
• Helyezze a lándzsát merőlegesen az ujj alsó oldalára, és szúrja át a bőrt úgy, hogy a lándzsát finoman a szúrás helyéhez nyomja, amíg aktiválódik.
• Óvatosan gyakoroljon nyomást a környező szövetekre. Dobja el az első csepp vért.
• Tartsa lefelé az ujját és a kapilláris csövet. Érintse meg a kapilláris hegyét a vércsepphez. A cső a kapilláris hatás miatt automatikusan megtelik. Gyűjts össze 3-4 csepp vért (150-250 mikroL).
• Vérvétel után távolítsa el a kapillárist a csőből, dobja ki, és gyakoroljon nyomást a szúrás helyére.
• Gyűjtés után óvatosan többször fordítsa meg a csövet.

• Alkalmazzon sebtapaszt a szúrás helyére.

  4e. Utólagos látogatások Az alanyokat arra biztatjuk, hogy 1-2 havonta térjenek vissza az Aditxt-hez további mintagyűjtés céljából legfeljebb 2 évig. Az alany minden utóellenőrző látogatás alkalmával frissített kérdőívet tölt ki. A kérdőíves és laboratóriumi adatokat a vizsgálati adatbázisban tároljuk, és csak alanyszám alapján azonosítjuk, lehetővé téve további vizsgálatok elvégzését a most azonosítatlan adatokon.

  4f. Laboratóriumi eljárások / Jelentéstétel Az anti-SARS-CoV-2 antitesteket és a neutralizáló antitestek aktivitását az Aditx Therapeutics AditxtScoreTM áramlási citometriai módszerével értékelik. Az antigén-/vírustesztet az Atila Biosystems iAMP COVID-19 rendszerén végzik el. A vizsgálat eredményeit leíró klinikai laboratóriumi jelentéseket átadják az alanyoknak (pontosan úgy, mintha közvetlenül megvásárolták volna a vizsgálatot).

Ezenkívül be kell tartani az Egyesült Államok Egészségügyi Minisztériuma és a Virginia Egészségügyi Minisztérium által meghatározott jelentéstételi követelményeket. Az összes rutineredmény jelentésére vonatkozó megközelítésünk összhangban van az FDA útmutatásaival (A koronavírus-betegség 2019-es közegészségügyi vészhelyzetben végzett tesztjeinek politikája (felülvizsgálva)). A tárolt mintákon végzett jövőbeni kísérleti vizsgálatok eredményeit azonosítani kell. Az egyének nem kapnak értesítést a jövőbeni kísérleti tesztek eredményeiről.

AditxtScoreTM

o Újszerű áramlási citometrián alapuló módszer, amely lehetővé teszi 3 különböző COVID-antigén elleni IgG, IgA és IgM antitestek egyidejű monitorozását, valamint a megfelelő neutralizáló antitest aktivitás vizsgálatát

iAMP COVID-19 rendszer (Atila Biosystems)

• Izotermikus amplifikációs PCR technológia, amely a SARS-CoV-2 vírus "N" génjéből és ORF-1ab génjéből származó szekvenciákat is detektál
• Az FDA általi használatra jóváhagyott EUA Aditxt jelenleg rendszeresen kínálja ezt a tesztszolgáltatást).