Immuunreacties op COVID-19-infectie of vaccinatie

1. Achtergrond en overzicht Aditxt, Inc heeft in samenwerking met onderzoekers van Stanford University in het laboratorium ontwikkelde tests (LDT's) voor het gelijktijdig monitoren van anti-SARS-COV2-antilichamen (IgG, IgA en IgM) gericht tegen 3 verschillende SARS-CoV-2-antigenen (RBD, S1 en NP) en het beoordelen van SARS-CoV-2-neutraliserende antilichaamactiviteit.

   Deze tests worden momenteel routinematig aan het publiek aangeboden als de AditxtScoreTM in Aditxt's CLIA-gecertificeerde, CAP-geaccrediteerde klinische laboratorium in Richmond, VA. Aditxt voert deze tests ook uit voor onderzoeks- en ontwikkelingsdoeleinden in een faciliteit in Mountain View, CA. De AditxtScore biedt een ideaal platform voor real-world onderzoek naar immuunresponsen op blootstelling aan SARS-CoV-2 en op de COVID-19-vaccins.

   Het algemene doel van deze observationele cohortstudie is het karakteriseren van COVID-specifieke immuunresponsen op blootstelling aan SARS-CoV-2 of COVID-vaccinatie in een reële setting. Deelnemers zullen worden gevraagd om bloedmonsters te verstrekken (ofwel een normale veneuze bloedafname, een paar druppels bloed verkregen met een klein vingerprikapparaat, of beide), evenals speeksel of een neusuitstrijkje tijdens een reeks bezoeken. Proefpersonen ontvangen testresultaten die zijn goedgekeurd voor routinematig klinisch gebruik (d.w.z. hun AditxtScore), terwijl restmonsters van elk bezoek worden opgeslagen voor toekomstige tests. Deze inspanningen zullen de voortdurende ontwikkeling van de AditxtScore-test ondersteunen en de effectiviteit van de interpretatie ervan verbeteren - wat bijdraagt ​​aan de inspanningen om de voordelen van klinische laboratoriumtests in de pandemische respons te maximaliseren.

2. Doelstellingen • Immuunresponsen karakteriseren (bijv. omvang/kracht en temporele dynamiek van het genereren van antilichamen, klassewisseling en persistentie van antilichamen) na blootstelling aan het SARS-CoV-2-virus of COVID-19-vaccinatie.

   • Onderzoeken tussen groep (bijv. vaccin versus natuurlijke blootstelling) en binnen groep (d.w.z. individuele variatie) verschillen in immuunresponsen.

   • De relatie bepalen tussen AditxtScore-componenten en neutraliserende antilichaamactiviteit en andere mogelijke correlaten van bescherming, en mogelijke klinische correlaten van immuunresponskenmerken beschrijven.

   • Om testontwikkelingsactiviteiten te ondersteunen, zoals het bepalen van de juiste klinische grenswaarden, de stabiliteit van de analyt en de vergelijkbaarheid van resultaten van verschillende soorten monsters (bijv. veneuze bloedafname versus bloeddruppel via vingerprik, neusuitstrijkje versus speekselafname). Deze activiteiten ondersteunen zowel de verfijning van bestaande tests als de ontwikkeling van toekomstige tests (bijv. COVID-19-specifieke geheugen-B-cel-, T-cel- en NK-celreacties).

3. Studieprocedures 3a. Werving van proefpersonen Werving van proefpersonen zal voornamelijk bestaan ​​uit mond-tot-mondreclame van studiepersoneel (bijv. vrienden- en familienetwerken) en andere geïnteresseerde partijen in de lokale gemeenschap (bijvoorbeeld een handvol lokale artsen). Er wordt geen brede reclamecampagne verwacht, hoewel een flyer met een studieaankondiging die de studiemogelijkheid beschrijft, zal worden gebruikt om de wervingsinspanningen te ondersteunen. Potentiële proefpersonen zullen worden doorverwezen om Aditxt te bellen om een ​​tijd af te spreken om naar het laboratorium te komen en meer te leren over het onderzoek.

Iedereen met een voorgeschiedenis van blootstelling aan SARS-CoV-2, een mogelijke huidige infectie of een vaccinatiegeschiedenis komt in aanmerking voor deelname, naast negatieve controles indien nodig. Er zal worden gestreefd naar een representatieve mix van leeftijden, geslachten en etniciteiten.

In de speciale omstandigheid dat een potentiële proefpersoon graag zou willen deelnemen aan het onderzoek, maar niet in staat is om naar een van de Aditxt-locaties (in Richmond, VA of Mountain View, CA) te komen en toegang heeft tot een gekwalificeerde aderlatingsspecialist, kunnen afnamematerialen worden verzonden naar een gekwalificeerde aderlatingsspecialist in hun gebied voor collecties. In dit geval zouden monsters 's nachts naar Aditxt worden verzonden voor verwerking. De toestemmingsformulieren en patiëntenvragenlijst worden van tevoren naar de deelnemer gemaild en op afstand met de onderzoeker beoordeeld (bijvoorbeeld via zoom of telefoontje), ondertekend en samen met de monsters aan Aditxt verzonden.

3b. Toediening van geïnformeerde toestemming en bescherming van privacy Potentiële studiedeelnemers worden naar een privékamer in de faciliteit van Aditxt in Richmond, VA of Mountain View, CA gebracht en het toestemmingsformulier zal aan hen worden uitgelegd door een lid van het onderzoeksteam. Zodra alle vragen zijn beantwoord, ondertekenen ze het toestemmingsformulier als ze ervoor kiezen om deel te nemen. In een situatie waarin de monsters op een andere locatie worden verzameld, worden de toestemmings- en autorisatieformulieren naar de potentiële proefpersoon gemaild, afgedrukt en op afstand doorgenomen met een lid van het onderzoeksteam (bijv. via zoom of telefoontje) totdat alle vragen zijn beantwoord. zijn beantwoord. De toestemmingsdocumenten worden vervolgens ondertekend en samen met het monster ingediend.

Het studiepersoneel wijst de deelnemer vervolgens een proefpersoonnummer toe en voert de naam van de proefpersoon, het proefpersoonnummer en de datum van toestemming in op een elektronisch inschrijvingslogboek (in een Excel-spreadsheet). Het inschrijvingslogboek wordt bewaard op een beveiligde locatie op de bestandsserver van Aditxt en is alleen toegankelijk voor aangewezen studiepersoneel.

De naam en geboortedatum van de proefpersoon zullen worden gebruikt bij het uitvoeren van de "routinematige" tests bij elk bezoek (d.w.z. de PCR-virustest en de antilichaamtesten), en standaard klinische rapporten met hun naam - geschikt voor gesprekken met hun reguliere artsen - zullen worden gegenereerd en afgeleverd bij de proefpersonen. Alleen de patiëntnummers worden echter gebruikt om de patiëntenvragenlijsten en de monsteraliquots te identificeren die zijn opgeslagen voor toekomstige tests.

4c. Invullen van patiëntvragenlijst Eenmaal ingeschreven, krijgen proefpersonen een korte vragenlijst die ze moeten invullen om informatie vast te leggen over demografische gegevens, symptomen die mogelijk verband houden met COVID, eventuele comorbide aandoeningen en de huidige medicijnen die ze gebruiken. Bij elk vervolgbezoek wordt een vervolgvragenlijst verstrekt.

4d. Voorbeeldverzameling

• Gezondheids- en veiligheidsmaatregelen Vanwege het potentiële risico van virale overdracht, zullen de volgende veiligheidsmaatregelen worden nageleefd voor elke studieverzameling (dit zijn dezelfde voorzorgsmaatregelen die Aditxt vereist voor alle routinematige monsterverzamelingen)

  - Er wordt slechts één onderwerp tegelijk in de verzamelruimte toegelaten.

  - De juiste persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM) moeten altijd worden gedragen door het ophaalpersoneel binnen een straal van 1,8 meter van de patiënt. Dit omvat een beschermende jas, handschoenen, een beschermend masker en een gelaatsscherm.

  - Patiënten moeten een beschermend masker dragen in de verzamelruimte, behalve wanneer temperatuurmetingen en het afnemen van neusuitstrijkjes worden uitgevoerd.

  - Het afnamepersoneel van het laboratorium reinigt de verzamelplaats met een desinfecterend doekje tussen de patiëntafnames door.

  - Nadat de patiënt het verzamelgebied heeft verlaten, verwisselt het laboratoriumverzamelpersoneel de handschoenen en gebruikt het desinfecterende handgel bij meerdere stappen bij het uittrekken van persoonlijke beschermingsmiddelen, zoals beschreven in het gedeelte Procedure hieronder, om ervoor te zorgen dat aangeraakte oppervlakken, inclusief de beschermende jas, niet worden besmet. gelaatsscherm en beschermend masker.

  - Na het verwijderen van de persoonlijke beschermingsmiddelen zal het personeel voor het ophalen van de laboratoriumhanden de handen wassen met water en zeep voordat de volgende patiënt wordt opgehaald.

  • Gelaatsschermen worden tussen elke patiëntafname schoongemaakt met een desinfecterend doekje.
  • Beschermende maskers en jassen kunnen worden opgeslagen voor hergebruik tussen patiëntenverzamelingen als er geen besmetting van de PBM wordt waargenomen of vermoed.
• Bloedafname Bloedmonsters worden op identieke wijze afgenomen als routinematig afgenomen voor klinische praktijk, zoals beschreven in Aditxt's SOP 6037 Anti-SARS-CoV-2 Flebotomie Procedure.
• Speeksel Deelnemers wordt gevraagd hun mond 5 minuten voor de afname met water te spoelen. Ze krijgen een tube van 3 ml en worden gevraagd deze te vullen (door speeksel in hun mond te laten ophopen en het vervolgens in de tube te spugen).
• Neusuitstrijkjes Monsters van neusuitstrijkjes worden op identieke wijze afgenomen als de monsters die routinematig worden afgenomen voor de klinische praktijk, zoals beschreven in Aditxt's SOP 6036 SARS-CoV-2 Procedure voor het afnemen van neusuitstrijkjes.
• Vingerprik

Vingerprik capillaire bloedafname wordt als volgt uitgevoerd:

• Veeg de prikplaats (het topje van welke vinger dan ook de voorkeur heeft) af met een alcoholdoekje en verwijder het beschermkapje van het lancet.
• Plaats het lancet loodrecht op de onderkant van de vinger en prik in de huid door het lancet voorzichtig tegen de prikplaats te drukken totdat het geactiveerd wordt.
• Oefen voorzichtig druk uit op het omringende weefsel. Gooi de eerste druppel bloed weg.
• Houd de vinger en het capillaire buisje in een neerwaartse positie. Raak met de punt van het capillair de bloeddruppel aan. Door de capillaire werking vult de buis zich automatisch. Verzamel 3-4 druppels bloed (150-250 microL).
• Verwijder na bloedafname het capillair uit de buis, gooi het weg en oefen druk uit op de prikplaats.
• Keer de buis na het verzamelen een paar keer voorzichtig om.

• Breng een pleister aan op de prikplaats.

  4e. Vervolgbezoeken Proefpersonen worden aangemoedigd om elke 1-2 maanden terug te keren naar Aditxt voor aanvullende monsterafname gedurende maximaal 2 jaar. Bij elk vervolgbezoek zal de proefpersoon een bijgewerkte vragenlijst invullen. Vragenlijst- en laboratoriumgegevens worden opgeslagen in de onderzoeksdatabase en alleen geïdentificeerd op onderwerpnummer, waardoor aanvullende onderzoeken kunnen worden uitgevoerd op de nu geanonimiseerde gegevens.

  4f. Laboratoriumprocedures / rapportage De anti-SARS-CoV-2-antilichamen en neutraliserende antilichaamactiviteit zullen worden beoordeeld met de AditxtScoreTM flowcytometriemethode van Aditx Therapeutics. Antigeen-/virustesten zullen worden uitgevoerd op het iAMP COVID-19-systeem van Atila Biosystems. Klinische laboratoriumrapporten die de resultaten van deze tests beschrijven, zullen aan proefpersonen worden verstrekt (precies alsof ze de test rechtstreeks hadden gekocht).

Bovendien zal worden voldaan aan de rapportagevereisten die zijn opgesteld door het Amerikaanse ministerie van HHS en het Virginia Department of Health. Onze aanpak voor het rapporteren van alle routineresultaten is in overeenstemming met de richtlijnen van de FDA (Beleid voor Coronavirus Disease-2019 Tests During the Public Health Emergency (Herzien)). Resultaten van toekomstige experimentele tests die worden uitgevoerd op opgeslagen monsters zullen worden geanonimiseerd. Individuen zullen niet op de hoogte worden gebracht van toekomstige experimentele testresultaten.

AditxtScoreTM

o Nieuwe op flowcytometrie gebaseerde methode die gelijktijdige monitoring van IgG-, IgA- en IgM-antilichamen tegen 3 verschillende COVID-antigenen mogelijk maakt, vergezeld van een test voor overeenkomstige neutraliserende antilichaamactiviteit

iAMP COVID-19-systeem (Atila Biosystems)

• Isotherme amplificatie PCR-technologie die sequenties detecteert van zowel het "N"-gen als het ORF-1ab-gen van het SARS-CoV-2-virus
• Goedgekeurd voor gebruik door de FDA onder een EUA. Aditxt biedt deze testservice momenteel routinematig aan).