Иммунный ответ на инфекцию или вакцинацию COVID-19

1. Предыстория и обзор Компания Aditxt, Inc в сотрудничестве с исследователями из Стэнфордского университета разработала лабораторные тесты (LDT) для одновременного мониторинга антител против SARS-COV2 (IgG, IgA и IgM), направленных против 3 различных антигенов SARS-CoV-2. (RBD, S1 и NP), а также оценку активности нейтрализующих антител против SARS-CoV-2.

   Эти тесты в настоящее время регулярно предлагаются общественности как AditxtScoreTM в сертифицированной CLIA и аккредитованной CAP клинической лаборатории Aditxt в Ричмонде, штат Вирджиния. Aditxt также выполняет эти тесты в целях исследований и разработок на объекте в Маунтин-Вью, Калифорния. AditxtScore представляет собой идеальную платформу для реальных исследований иммунных реакций на воздействие SARS-CoV-2, а также на вакцины против COVID-19.

   Общая цель этого обсервационного когортного исследования состоит в том, чтобы охарактеризовать иммунные реакции, специфичные для COVID, на воздействие SARS-CoV-2 или вакцинацию против COVID в реальных условиях. Участникам будет предложено предоставить образцы крови (либо обычный забор венозной крови, либо несколько капель крови, полученных с помощью небольшого устройства для прокола пальца, либо и то, и другое), а также образцы слюны или мазка из носа во время серии посещений. Субъекты получат результаты тестирования, одобренные для рутинного клинического использования (т. е. их AditxtScore), в то время как остаточные образцы от каждого посещения будут храниться для будущего тестирования. Эти усилия будут поддерживать текущую разработку тестов AditxtScore и повышать эффективность их интерпретации, помогая максимизировать преимущества клинических лабораторных испытаний в ответ на пандемию.

2. Цели • Охарактеризовать иммунные реакции (например, величину/силу и временную динамику выработки антител, переключение классов и персистенцию антител) после воздействия вируса SARS-CoV-2 или вакцинации против COVID-19.

   • Исследовать межгрупповые (например, вакцинация против естественного воздействия) и внутригрупповые (т.е. индивидуальные различия) различия в иммунных реакциях.

   • Определить взаимосвязь между компонентами AditxtScore и активностью нейтрализующих антител и другими потенциальными коррелятами защиты, а также описать возможные клинические корреляты характеристик иммунного ответа.

   • Для поддержки мероприятий по разработке тестов, таких как определение соответствующих клинических пороговых значений, стабильность аналита и сопоставимость результатов различных типов образцов (например, забор венозной крови и капля крови из пальца, мазок из носа и сбор слюны). Эти действия будут способствовать усовершенствованию существующих тестов, а также разработке будущих тестов (например, Специфичные для COVID-19 реакции В-клеток, Т-клеток и NK-клеток памяти).

3. Процедуры исследования 3а. Набор испытуемых Набор испытуемых будет состоять, в основном, из уст в уста исследовательского персонала (например, сети друзей и семьи) и другие заинтересованные стороны в местном сообществе (например, несколько местных врачей). Широкая рекламная кампания не предполагается, хотя листовка с объявлением об исследовании, описывающая возможность обучения, будет использоваться для поддержки усилий по набору. Потенциальным испытуемым будет предложено позвонить в Aditxt, чтобы назначить время, чтобы прийти в лабораторию и узнать больше об исследовании.

Любой, у кого в анамнезе был контакт с SARS-CoV-2, возможная текущая инфекция или история вакцинации, имеет право участвовать, в дополнение к отрицательному контролю, когда это необходимо. Будут предприняты усилия, чтобы включить репрезентативное сочетание возрастов, полов и этнических групп.

В особых случаях, когда потенциальный субъект хотел бы участвовать в исследовании, но не может приехать ни в один из офисов Aditxt (в Ричмонде, Вирджиния, или в Маунтин-Вью, Калифорния) и имеет доступ к квалифицированному флеботомисту, материалы для сбора могут быть отправлены в квалифицированный флеботомист в своей области для коллекций. В этом случае образцы будут отправлены в течение ночи в Aditxt для обработки. Формы согласия и анкета пациента будут отправлены участнику по электронной почте заранее и рассмотрены исследователем удаленно (например, через масштабирование или телефонный звонок), подписаны и отправлены в Aditxt вместе с образцами.

3б. Управление информированным согласием и защита конфиденциальности Потенциальные участники исследования будут доставлены в отдельную комнату на объекте Aditxt либо в Ричмонде, штат Вирджиния, либо в Маунтин-Вью, Калифорния, и член исследовательской группы объяснит им форму согласия. После ответа на все вопросы, если они решат участвовать, они подпишут форму согласия. В ситуации, когда образцы собираются в другом месте, формы согласия и разрешения будут отправлены потенциальному субъекту по электронной почте, распечатаны и удаленно рассмотрены членом исследовательской группы (например, с помощью масштабирования или телефонного звонка) до тех пор, пока не будут получены ответы на все вопросы. были даны ответы. Затем документы о согласии будут подписаны и отправлены вместе с образцом.

Затем исследовательский персонал присвоит участнику номер субъекта и введет имя субъекта, номер субъекта и дату согласия в электронном журнале регистрации (в электронной таблице Excel). Журнал регистрации будет храниться в защищенном месте на файловом сервере Aditxt, доступ к которому будет ограничен только назначенным исследовательским персоналом.

Имя и дата рождения субъекта будут использоваться при проведении «рутинного» тестирования при каждом посещении (т. е. ПЦР-теста на вирус и тестов на антитела), а стандартные клинические отчеты с их именами — подходящие для общения с их обычными врачами — будут генерироваться и передаваться субъектам. Однако для идентификации анкет пациентов и аликвот образцов, сохраненных для будущего тестирования, будут использоваться только номера субъектов.

4в. Заполнение анкеты пациента После регистрации субъектам будет предоставлена ​​краткая анкета для заполнения, чтобы получить информацию о демографических данных, любых симптомах, которые могут быть связаны с COVID, любых сопутствующих заболеваниях и текущих лекарствах, которые они принимают. Последующая анкета будет предоставляться при каждом последующем посещении.

4д. Сбор образцов

• Меры предосторожности для здоровья и безопасности В связи с потенциальным риском передачи вируса, следующие меры предосторожности будут соблюдаться для каждого сбора образцов для исследования (это те же меры предосторожности, которые Aditxt требует для всех рутинных сборов образцов).

  - Одновременно в зоне сбора может находиться только один субъект.

  - Персонал, занимающийся сбором отходов, всегда должен носить надлежащие средства индивидуальной защиты (СИЗ), если они находятся на расстоянии менее 6 футов от пациента. Это включает в себя защитный халат, перчатки, защитную маску и щиток для лица.

  - Пациенты должны носить защитную маску в зоне сбора, за исключением случаев, когда проводится измерение температуры и забор мазка из носа.

  - Персонал лаборатории будет очищать место для сбора дезинфицирующей салфеткой между сборами пациентов.

  - После сбора и ухода пациента из зоны сбора персонал лаборатории по сбору меняет перчатки и использует дезинфицирующее средство для рук на нескольких этапах удаления СИЗ, как указано в разделе «Процедура» ниже, чтобы гарантировать отсутствие загрязнения поверхностей, к которым прикасаются, включая защитный халат, лицевой щиток и защитная маска.

  - После снятия средств индивидуальной защиты персонал лаборатории по сбору отходов вымоет руки с мылом и водой перед началом сбора следующего пациента.

  • Лицевые щитки будут протираться дезинфицирующей салфеткой между каждым сбором пациентов.
  • Защитные маски и халаты могут храниться для повторного использования между сборами пациентов, если не наблюдается или не подозревается загрязнение СИЗ.
• Образцы крови для флеботомии будут собираться так же, как и те, которые обычно собираются для клинической практики, как описано в СОП 6037 Aditxt «Процедура флеботомии против SARS-CoV-2».
• Слюна Участников попросят прополоскать рот водой за 5 минут до сбора. Им дадут пробирку объемом 3 мл и попросят заполнить ее (позволив слюне скапливаться во рту, а затем выплюнув ее в пробирку).
• Назальные мазки Образцы назальных мазков будут собираться так же, как и те, которые обычно собираются для клинической практики, как описано в SOP 6036 Aditxt «Процедура сбора назальных мазков для SARS-CoV-2».
• палец-палочка

Забор капиллярной крови из пальца проводится следующим образом:

• Протрите место прокола (кончик любого пальца субъекта) спиртовой салфеткой и снимите защитный чехол с ланцета.
• Расположите ланцет перпендикулярно нижней стороне пальца и проколите кожу, осторожно прижимая ланцет к месту прокола, пока он не активируется.
• Аккуратно надавите на окружающие ткани. Отбросьте первую каплю крови.
• Держите палец и капиллярную трубку в нижнем положении. Прикоснитесь кончиком капилляра к капле крови. Трубка заполнится автоматически благодаря капиллярному эффекту. Соберите 3-4 капли крови (150-250 мкл).
• После забора крови извлеките капилляр из пробирки, утилизируйте и прижмите место прокола.
• После сбора осторожно переверните пробирку несколько раз.

• Наложите лейкопластырь на место прокола.

  4е. Последующие визиты Субъектам будет рекомендовано возвращаться в Aditxt каждые 1-2 месяца для сбора дополнительных образцов на срок до 2 лет. Обновленный вопросник будет заполняться субъектом при каждом последующем посещении. Анкетные и лабораторные данные будут храниться в базе данных исследований и идентифицироваться только по номеру субъекта, что позволит провести дополнительные исследования на уже неидентифицированных данных.

  4ф. Лабораторные процедуры/отчетность Антитела против SARS-CoV-2 и активность нейтрализующих антител будут оцениваться методом проточной цитометрии AditxtScoreTM от Aditx Therapeutics. Тестирование на антиген/вирус будет проводиться на системе iAMP COVID-19 от Atila Biosystems. Субъектам будут предоставлены клинические лабораторные отчеты с описанием результатов этого тестирования (точно так же, как если бы они приобрели тестирование напрямую).

Кроме того, будут соблюдаться требования к отчетности, установленные Министерством здравоохранения США и Министерством здравоохранения Вирджинии. Наш подход к представлению всех обычных результатов соответствует руководству FDA (Политика в отношении тестов на коронавирусную болезнь-2019 во время чрезвычайной ситуации в области общественного здравоохранения (пересмотренная)). Результаты будущих экспериментальных испытаний, проведенных на хранящихся образцах, будут деидентифицированы. Физические лица не будут уведомлены о результатах будущих экспериментальных испытаний.

AditxtScoreTM

o Новый метод на основе проточной цитометрии, который позволяет одновременно отслеживать антитела IgG, IgA и IgM против 3 различных антигенов COVID, сопровождаемый тестом на активность соответствующих нейтрализующих антител.

Система iAMP COVID-19 (Atila Biosystems)

• Технология изотермической амплификации ПЦР, выявляющая последовательности как гена «N», так и гена ORF-1ab вируса SARS-CoV-2.
• Одобрено для использования FDA в соответствии с EUA Aditxt в настоящее время регулярно предлагает эту услугу тестирования).