Réponses immunitaires à l'infection ou à la vaccination par le COVID-19

1. Contexte et aperçu Aditxt, Inc, en collaboration avec des chercheurs de l'Université de Stanford, a développé des tests en laboratoire (LDT) pour surveiller simultanément les anticorps anti-SARS-COV2 (IgG, IgA et IgM) dirigés contre 3 antigènes différents du SARS-CoV-2 (RBD, S1 et NP) ainsi que l'évaluation de l'activité des anticorps neutralisants du SRAS-CoV-2.

   Ces tests sont actuellement proposés régulièrement au public sous le nom d'AditxtScoreTM au laboratoire clinique agréé CLIA et accrédité CAP d'Aditxt à Richmond, en Virginie. Aditxt effectue également ces tests à des fins de recherche et de développement dans une installation de Mountain View, en Californie. L'AditxtScore fournit une plate-forme idéale pour les enquêtes dans le monde réel sur les réponses immunitaires à l'exposition au SRAS-CoV-2 ainsi qu'aux vaccins COVID-19.

   L'objectif général de cette étude de cohorte observationnelle est de caractériser les réponses immunitaires spécifiques au COVID à l'exposition au SRAS-CoV-2 ou à la vaccination au COVID dans un contexte réel. Les participants seront invités à fournir des échantillons de sang (soit une prise de sang veineux normal, quelques gouttes de sang obtenues avec un petit appareil à piquer le doigt, ou les deux), ainsi qu'un échantillon de salive ou d'écouvillon nasal lors d'une série de visites. Les sujets recevront les résultats des tests approuvés pour une utilisation clinique de routine (c'est-à-dire leur AditxtScore), tandis que les échantillons résiduels de chaque visite seront stockés pour des tests futurs. Ces efforts soutiendront le développement en cours du test AditxtScore et amélioreront l'efficacité de son interprétation, contribuant ainsi aux efforts visant à maximiser les avantages des tests de laboratoire clinique dans la réponse à la pandémie.

2. Objectifs • Caractériser les réponses immunitaires (par exemple, l'ampleur/la force et la dynamique temporelle de la génération d'anticorps, le changement de classe et la persistance des anticorps) suite à une exposition au virus SARS-CoV-2 ou à la vaccination contre la COVID-19.

   • Étudier les différences entre les groupes (p. ex. vaccin par rapport à l'exposition naturelle) et au sein du groupe (c.-à-d. variation individuelle) dans les réponses immunitaires.

   • Déterminer la relation entre les composants AditxtScore et l'activité des anticorps neutralisants et d'autres corrélats potentiels de protection, et décrire les corrélats cliniques possibles des caractéristiques de la réponse immunitaire.

   • Pour soutenir les activités de développement de tests telles que la détermination des seuils cliniques appropriés, la stabilité de l'analyte et la comparabilité des résultats de différents types d'échantillons (par exemple, prélèvement de sang veineux vs goutte de sang au bout du doigt, prélèvement nasal vs prélèvement de salive). Ces activités soutiendront le raffinement des tests existants ainsi que le développement de futurs tests (par ex. Réponses spécifiques des cellules B mémoire, des cellules T et des cellules NK à la COVID-19).

3. Procédures d'étude 3a. Recrutement des sujets Le recrutement des sujets consistera principalement en des efforts de bouche à oreille du personnel de l'étude (par ex. amis et réseaux familiaux) et d'autres parties intéressées dans la communauté locale (par exemple, une poignée de médecins locaux). Aucune campagne publicitaire à grande échelle n'est prévue, bien qu'un dépliant d'annonce d'étude décrivant l'opportunité d'étude sera utilisé pour soutenir les efforts de recrutement. Les sujets potentiels seront invités à appeler Aditxt pour planifier un moment pour venir au laboratoire et en savoir plus sur l'étude.

Toute personne ayant des antécédents d'exposition au SRAS-CoV-2, une infection actuelle possible ou des antécédents de vaccination est éligible pour participer, en plus des contrôles négatifs si nécessaire. Des efforts seront faits pour inclure un mélange représentatif d'âges, de sexes et d'ethnies.

Dans le cas particulier où un sujet potentiel aimerait participer à l'étude mais est incapable de se rendre à l'un ou l'autre des sites Aditxt (à Richmond, VA ou Mountain View, CA) et a accès à un phlébotomiste qualifié, les matériaux de collecte peuvent être expédiés à un phlébotomiste qualifié dans leur région pour les prélèvements. Dans ce cas, les échantillons seraient expédiés du jour au lendemain à Aditxt pour traitement. Les formulaires de consentement et le questionnaire du patient seront envoyés par e-mail au participant à l'avance et examinés à distance avec l'investigateur (par exemple, via un zoom ou un appel téléphonique), signés et soumis à Aditxt avec les échantillons.

3b. Administration du consentement éclairé et protection de la vie privée Les participants potentiels à l'étude seront emmenés dans une salle privée des installations d'Aditxt à Richmond, en Virginie ou à Mountain View, en Californie, et le formulaire de consentement leur sera expliqué par un membre de l'équipe d'étude. Une fois toutes les questions répondues, s'ils choisissent de participer, ils signeront le formulaire de consentement. Dans une situation où les échantillons sont prélevés à un endroit différent, les formulaires de consentement et d'autorisation seront envoyés par courrier électronique au sujet potentiel, imprimés et examinés à distance avec un membre de l'équipe d'étude (par exemple via zoom ou appel téléphonique) jusqu'à ce que toutes les questions ont été répondus. Les documents de consentement seront ensuite signés et soumis avec l'échantillon.

Le personnel de l'étude attribuera ensuite au participant un numéro de sujet et entrera le nom du sujet, le numéro de sujet et la date de consentement sur un journal d'inscription électronique (dans une feuille de calcul Excel). Le journal d'inscription sera conservé dans un emplacement sécurisé sur le serveur de fichiers d'Aditxt avec un accès limité uniquement au personnel de l'étude désigné.

Le nom et la date de naissance des sujets seront utilisés lors de l'exécution des tests "de routine" à chaque visite (c'est-à-dire le test de virus PCR et les tests d'anticorps), et les rapports cliniques standard avec leurs noms - appropriés pour parler à leurs médecins habituels - seront être générés et livrés aux sujets. Cependant, seuls les numéros de sujets seront utilisés pour identifier les questionnaires des patients et les aliquotes d'échantillons stockés pour les tests futurs.

4c. Remplir le questionnaire du patient Une fois inscrits, les sujets recevront un bref questionnaire à remplir pour saisir des informations sur la démographie, tout symptôme pouvant être lié au COVID, toute condition comorbide et les médicaments qu'ils prennent actuellement. Un questionnaire de suivi sera fourni à chaque visite de suivi.

4d. Collecte d'échantillons

• Précautions de santé et de sécurité En raison du risque potentiel de transmission virale, les précautions de sécurité suivantes seront respectées pour chaque collecte d'étude (il s'agit des mêmes précautions requises par Aditxt pour toutes les collectes d'échantillons de routine)

  - Un seul sujet sera autorisé dans la zone de collecte à la fois.

  - Un équipement de protection individuelle (EPI) approprié doit toujours être porté par le personnel de collecte lorsqu'il se trouve à moins de 6 pieds du patient. Cela comprend une blouse de protection, des gants, un masque de protection et un écran facial.

  - Les patients doivent porter un masque de protection dans la zone de prélèvement sauf lors de la prise de température et du prélèvement nasal.

  - Le personnel de prélèvement du laboratoire nettoiera le siège de prélèvement avec une lingette désinfectante entre les prélèvements de patients.

  - Après la collecte et le départ du patient de la zone de collecte, le personnel de collecte du laboratoire changera de gants et utilisera un désinfectant pour les mains à plusieurs étapes du retrait de l'EPI, comme indiqué dans la section Procédure ci-dessous pour garantir l'absence de contamination des surfaces touchées, y compris la blouse de protection, écran facial et masque de protection.

  - Après avoir retiré l'EPI, le personnel de collecte du laboratoire se lavera les mains à l'eau et au savon avant de commencer la prochaine collecte de patients.

  • Les écrans faciaux seront nettoyés avec une lingette désinfectante entre chaque collecte de patients.
  • Les masques et blouses de protection peuvent être stockés pour être réutilisés entre les collectes de patients si aucune contamination de l'EPI n'est observée ou suspectée.
• Les échantillons de sang de phlébotomie seront prélevés de la même manière que ceux prélevés régulièrement pour la pratique clinique, comme décrit dans la procédure de phlébotomie SOP 6037 Anti-SARS-CoV-2 d'Aditxt.
• Salive Les participants seront invités à se rincer la bouche avec de l'eau 5 minutes avant le prélèvement. On leur fournira un tube de 3 ml et on leur demandera de le remplir (en laissant la salive s'accumuler dans leur bouche puis en la crachant dans le tube).
• Écouvillons nasaux Les échantillons d'écouvillons nasaux seront prélevés de la même manière que ceux prélevés régulièrement pour la pratique clinique, comme décrit dans la procédure de prélèvement d'écouvillons nasaux SOP 6036 SARS-CoV-2 d'Aditxt.
• Doigt-bâton

Le prélèvement de sang capillaire au bout du doigt sera effectué comme suit :

• Essuyez le site de ponction (le bout de n'importe quel doigt que le sujet préfère) avec un tampon imbibé d'alcool et retirez le couvercle de protection de la lancette.
• Positionnez la lancette perpendiculairement au dessous du doigt et percez la peau en appuyant doucement la lancette contre le site de ponction jusqu'à ce qu'elle s'active.
• Appliquez doucement une pression sur les tissus environnants. Jeter la première goutte de sang.
• Maintenez le doigt et le tube capillaire dans une position vers le bas. Touchez la pointe du capillaire à la gouttelette de sang. Le tube se remplira automatiquement par effet capillaire. Recueillir 3-4 gouttes de sang (150-250 microL).
• Après le prélèvement sanguin, retirez le capillaire du tube, jetez-le et appliquez une pression sur le site de ponction.
• Après le prélèvement, retourner délicatement le tube plusieurs fois.

• Appliquez un pansement sur le site de ponction.

  4e. Visites de suivi Les sujets seront encouragés à revenir à Aditxt tous les 1 à 2 mois pour une collecte d'échantillons supplémentaires pendant 2 ans maximum. Un questionnaire mis à jour sera rempli par le sujet à chaque visite de suivi. Les données du questionnaire et du laboratoire seront stockées dans la base de données de l'étude et identifiées uniquement par le numéro de sujet, ce qui permettra d'effectuer des études supplémentaires sur les données désormais anonymisées.

  4f. Procédures de laboratoire / Rapports Les anticorps anti-SARS-CoV-2 et l'activité des anticorps neutralisants seront évalués par la méthode de cytométrie en flux AditxtScoreTM d'Aditx Therapeutics. Les tests d'antigène/virus seront effectués sur le système iAMP COVID-19 d'Atila Biosystems. Des rapports de laboratoire clinique décrivant les résultats de ces tests seront fournis aux sujets (exactement comme s'ils avaient acheté les tests directement).

De plus, les exigences de déclaration établies par le département américain du HHS et le département de la santé de Virginie seront respectées. Notre approche de communication de tous les résultats de routine est conforme aux directives de la FDA (Policy for Coronavirus Disease-2019 Tests during the Public Health Emergency (Revised)). Les résultats des futurs tests expérimentaux effectués sur des échantillons stockés seront anonymisés. Les personnes ne seront pas informées des futurs résultats des tests expérimentaux.

AditxtScoreTM

o Nouvelle méthode basée sur la cytométrie en flux qui permet une surveillance simultanée des anticorps IgG, IgA et IgM contre 3 antigènes COVID différents, accompagnée d'un test pour l'activité des anticorps neutralisants correspondants

Système iAMP COVID-19 (Atila Biosystems)

• Technologie PCR d'amplification isotherme détectant les séquences du gène "N" et du gène ORF-1ab du virus SARS-CoV-2
• Approuvé pour une utilisation par la FDA dans le cadre d'un EUA Aditxt propose actuellement ce service de test de manière routinière).