Odpowiedzi immunologiczne na zakażenie lub szczepienie COVID-19

1. Informacje ogólne Aditxt, Inc, we współpracy z naukowcami z Uniwersytetu Stanforda, opracował testy laboratoryjne (LDT) do jednoczesnego monitorowania przeciwciał anty-SARS-COV2 (IgG, IgA i IgM) skierowanych przeciwko 3 różnym antygenom SARS-CoV-2 (RBD, S1 i NP), a także ocena aktywności przeciwciał neutralizujących SARS-CoV-2.

   Testy te są obecnie rutynowo oferowane publicznie jako AditxtScoreTM w laboratorium klinicznym Aditxt z certyfikatem CLIA i CAP w Richmond w Wirginii. Aditxt przeprowadza również te testy w celach badawczo-rozwojowych w ośrodku w Mountain View w Kalifornii. AditxtScore stanowi idealną platformę do rzeczywistych badań odpowiedzi immunologicznych na ekspozycję na SARS-CoV-2, a także na szczepionki COVID-19.

   Ogólnym celem tego obserwacyjnego badania kohortowego jest scharakteryzowanie specyficznych dla COVID odpowiedzi immunologicznych na ekspozycję na SARS-CoV-2 lub szczepienie przeciwko COVID w rzeczywistych warunkach. Uczestnicy zostaną poproszeni o dostarczenie próbek krwi (zwykłego pobrania krwi żylnej, kilku kropli krwi pobranej za pomocą małego palca lub obu), a także próbki śliny lub wymazu z nosa podczas serii wizyt. Pacjenci otrzymają wyniki testów, które są zatwierdzone do rutynowego użytku klinicznego (tj. ich wynik AditxtScore), podczas gdy pozostałe próbki z każdej wizyty będą przechowywane do przyszłych badań. Wysiłki te wesprą trwające prace rozwojowe nad testem AditxtScore i zwiększą skuteczność jego interpretacji – wspierając wysiłki na rzecz maksymalizacji korzyści z klinicznych badań laboratoryjnych w odpowiedzi na pandemię.

2. Cele • Scharakteryzowanie odpowiedzi immunologicznych (np. wielkość/siła i czasowa dynamika wytwarzania przeciwciał, zmiana klas i utrzymywanie się przeciwciał) po ekspozycji na wirusa SARS-CoV-2 lub szczepienie przeciwko COVID-19.

   • Zbadanie między grupami (np. szczepionka vs. naturalna ekspozycja) oraz wewnątrz grupy (tj. zmienność indywidualna) różnic w odpowiedziach immunologicznych.

   • Określenie związku między składnikami AditxtScore a aktywnością przeciwciał neutralizujących i innymi potencjalnymi korelatami ochrony oraz opisanie możliwych korelatów klinicznych cech odpowiedzi immunologicznej.

   • Wspieranie działań związanych z opracowywaniem testów, takich jak określanie odpowiednich klinicznych punktów odcięcia, stabilności analitu i porównywalności wyników z różnych typów próbek (np. pobranie krwi żylnej w porównaniu z kroplą krwi z opuszka palca, wymaz z nosa w porównaniu ze śliną). Działania te będą wspierać udoskonalanie istniejących testów, jak również opracowywanie przyszłych testów (np. specyficzne dla COVID-19 odpowiedzi komórek pamięci B, komórek T i komórek NK).

3. Procedury badania 3a. Rekrutacja przedmiotu Rekrutacja przedmiotu będzie polegać głównie na przekazie ustnym personelu badawczego (np. sieci przyjaciół i rodziny) oraz inne zainteresowane strony w lokalnej społeczności (np. garstka lokalnych lekarzy). Nie przewiduje się szerokiej kampanii reklamowej, chociaż ulotka z ogłoszeniem o badaniu opisująca możliwości studiowania zostanie wykorzystana do wsparcia wysiłków rekrutacyjnych. Potencjalni uczestnicy zostaną skierowani, aby zadzwonić do Aditxt, aby umówić się na wizytę w laboratorium i dowiedzieć się więcej o badaniu.

Każda osoba z wcześniejszą ekspozycją na SARS-CoV-2, potencjalną obecną infekcją lub historią szczepień jest uprawniona do udziału, oprócz kontroli negatywnych w razie potrzeby. Zostaną podjęte starania, aby uwzględnić reprezentatywną mieszankę wieku, płci i pochodzenia etnicznego.

W szczególnych okolicznościach, gdy potencjalny pacjent chciałby wziąć udział w badaniu, ale nie może przybyć do żadnej z lokalizacji Aditxt (w Richmond w Wirginii lub w Mountain View w Kalifornii) i ma dostęp do wykwalifikowanego flebotomisty, materiały do ​​pobrania mogą zostać wysłane do wykwalifikowanego flebotomisty w swoim regionie w celu pobrania. W takim przypadku próbki byłyby wysyłane z dnia na dzień do Aditxt w celu przetworzenia. Formularze zgody i kwestionariusz pacjenta zostaną przesłane uczestnikowi pocztą elektroniczną z wyprzedzeniem i przejrzane zdalnie z badaczem (np. za pomocą zoomu lub rozmowy telefonicznej), podpisane i przesłane do Aditxt wraz z próbkami.

3b. Administracja świadomej zgody i ochrona prywatności Potencjalni uczestnicy badania zostaną zabrani do prywatnego pokoju w placówce Aditxt w Richmond, VA lub Mountain View, CA, a formularz zgody zostanie im wyjaśniony przez członka zespołu badawczego. Po udzieleniu odpowiedzi na wszystkie pytania, jeśli zdecydują się wziąć udział, podpiszą formularz zgody. W sytuacji, gdy próbki będą pobierane w innym miejscu, formularze zgody i upoważnienia zostaną przesłane e-mailem do potencjalnego podmiotu, wydrukowane i zweryfikowane zdalnie (np. przez zoom lub telefon) z członkiem zespołu badawczego, aż wszystkie pytania odpowiedziano. Dokumenty zgody zostaną następnie podpisane i przesłane wraz z próbką.

Następnie personel naukowy przydzieli uczestnikowi numer przedmiotu i wprowadzi nazwę przedmiotu, numer przedmiotu i datę zgody w elektronicznym dzienniku rejestracji (w arkuszu kalkulacyjnym Excel). Dziennik rejestracji będzie przechowywany w bezpiecznym miejscu na serwerze plików Aditxt, a dostęp do niego będzie ograniczony tylko do wyznaczonego personelu badawczego.

Imię i nazwisko oraz data urodzenia pacjentów będą używane podczas wykonywania „rutynowych” testów podczas każdej wizyty (tj. testu na obecność wirusa PCR i testów na przeciwciała), a standardowe raporty kliniczne z ich nazwiskami – odpowiednie do rozmów z ich stałymi lekarzami – będą wygenerować i dostarczyć podmiotom. Jednak tylko numery pacjentów będą wykorzystywane do identyfikacji kwestionariuszy pacjentów i porcji próbek przechowywanych do przyszłych badań.

4c. Wypełnianie kwestionariusza pacjenta Po rejestracji pacjenci otrzymają krótki kwestionariusz do wypełnienia w celu zebrania informacji o danych demograficznych, wszelkich objawach, które mogą być związane z COVID, wszelkimi chorobami współistniejącymi i aktualnie przyjmowanymi lekami. Kwestionariusz uzupełniający zostanie dostarczony podczas każdej wizyty kontrolnej.

4d. Kolekcja próbek

• Środki ostrożności dotyczące zdrowia i bezpieczeństwa Ze względu na potencjalne ryzyko przeniesienia wirusa, przy każdym pobieraniu próbek do badań będą przestrzegane następujące środki ostrożności (są to te same środki ostrożności, których Aditxt wymaga dla wszystkich rutynowych pobrań próbek)

  - W strefie zbiórki może przebywać tylko jeden podmiot naraz.

  - Właściwy sprzęt ochrony osobistej (PPE) musi być zawsze noszony przez personel zbierający w odległości mniejszej niż 6 stóp od pacjenta. Obejmuje to fartuch ochronny, rękawiczki, maskę ochronną i osłonę twarzy.

  - Pacjenci muszą nosić maskę ochronną w miejscu pobierania, z wyjątkiem sytuacji, gdy wykonywany jest pomiar temperatury i pobieranie wymazu z nosa.

  - Personel laboratorium będzie czyścić miejsce pobierania chusteczką dezynfekującą pomiędzy kolejnymi pobraniami pacjentów.

  - Po pobraniu i opuszczeniu przez pacjenta obszaru pobierania personel laboratorium zmieni rękawiczki i użyje środka dezynfekującego do rąk na wielu etapach zdejmowania środków ochrony indywidualnej, jak opisano w sekcji Procedura poniżej, aby zapewnić brak zanieczyszczenia dotykanych powierzchni, w tym fartucha ochronnego, przyłbica i maska ​​ochronna.

  - Po zdjęciu środków ochrony indywidualnej pracownicy laboratorium umyją ręce mydłem i wodą przed rozpoczęciem pobierania kolejnego pacjenta.

  • Przyłbice będą czyszczone chusteczką dezynfekującą pomiędzy każdym przyjęciem pacjenta.
  • Maski i fartuchy ochronne można przechowywać do ponownego użycia między kolejnymi zbiórkami pacjentów, jeśli nie zaobserwowano ani nie podejrzewa się zanieczyszczenia środków ochrony indywidualnej.
• Próbki krwi do pobierania krwi będą pobierane identycznie jak te rutynowo pobierane w praktyce klinicznej, jak opisano w SOP 6037 Procedury upuszczania krwi Aditxt przeciwko SARS-CoV-2.
• Ślina Uczestnicy zostaną poproszeni o przepłukanie ust wodą na 5 minut przed pobraniem. Otrzymają rurkę o pojemności 3 ml i zostaną poproszeni o jej napełnienie (pozwalając zgromadzić ślinę w ustach, a następnie wypluć ją do probówki).
• Wymazy z nosa Próbki wymazów z nosa będą pobierane w taki sam sposób, jak te rutynowo pobierane w praktyce klinicznej, zgodnie z procedurą pobierania wymazów z nosa SOP 6036 SARS-CoV-2 firmy Aditxt.
• Palec

Pobieranie krwi włośniczkowej z opuszka palca zostanie przeprowadzone w następujący sposób:

• Przetrzyj miejsce nakłucia (końcówkę dowolnego palca preferowanego przez pacjenta) gazikiem nasączonym alkoholem i zdejmij osłonę ochronną z lancetu.
• Umieścić lancet prostopadle do dolnej części palca i nakłuć skórę, delikatnie dociskając lancet do miejsca nakłucia, aż się aktywuje.
• Delikatnie uciskaj otaczającą tkankę. Odrzuć pierwszą kroplę krwi.
• Trzymaj palec i rurkę kapilarną w pozycji skierowanej w dół. Dotknij końcówką kapilary kropli krwi. Rurka napełni się automatycznie z powodu efektu kapilarnego. Zbierz 3-4 krople krwi (150-250 mikrol).
• Po pobraniu krwi wyjąć kapilarę z probówki, wyrzucić i ucisnąć miejsce nakłucia.
• Po pobraniu delikatnie odwrócić probówkę kilka razy.

• Zastosuj plaster do miejsca nakłucia.

  4e. Wizyty kontrolne Pacjenci będą zachęcani do powrotu do Aditxt co 1-2 miesiące w celu dodatkowego pobrania próbek przez okres do 2 lat. Zaktualizowany kwestionariusz zostanie wypełniony przez uczestnika podczas każdej wizyty kontrolnej. Kwestionariusz i dane laboratoryjne będą przechowywane w bazie danych badań i identyfikowane wyłącznie za pomocą numeru podmiotu, co pozwoli na przeprowadzenie dodatkowych badań na danych, które zostały już zdeidentyfikowane.

  4f. Procedury laboratoryjne / raporty Aktywność przeciwciał anty-SARS-CoV-2 i przeciwciał neutralizujących zostanie oceniona metodą cytometrii przepływowej AditxtScoreTM firmy Aditx Therapeutics. Testy antygenowe/wirusowe zostaną przeprowadzone na systemie iAMP COVID-19 firmy Atila Biosystems. Kliniczne raporty laboratoryjne opisujące wyniki tych testów zostaną dostarczone uczestnikom (dokładnie tak, jakby kupili test bezpośrednio).

Ponadto przestrzegane będą wymagania dotyczące raportowania określone przez Departament HHS Stanów Zjednoczonych i Departament Zdrowia Wirginii. Nasze podejście do zgłaszania wszystkich rutynowych wyników jest zgodne z wytycznymi FDA (Polityka dotycząca testów na chorobę koronawirusową – 2019 podczas stanu zagrożenia zdrowia publicznego (poprawione)). Wyniki przyszłych testów eksperymentalnych przeprowadzonych na przechowywanych próbkach zostaną pozbawione elementów umożliwiających identyfikację. Osoby nie zostaną powiadomione o przyszłych wynikach testów eksperymentalnych.

AditxtScoreTM

o Nowatorska metoda oparta na cytometrii przepływowej, która pozwala na jednoczesne monitorowanie przeciwciał IgG, IgA i IgM przeciwko 3 różnym antygenom COVID wraz z testem na aktywność odpowiadających im przeciwciał neutralizujących

System iAMP COVID-19 (Atila Biosystems)

• Izotermiczna amplifikacja Technologia PCR wykrywająca sekwencje zarówno z genu „N”, jak i genu ORF-1ab wirusa SARS-CoV-2
• Zatwierdzony do użytku przez FDA w ramach EUA Aditxt obecnie rutynowo oferuje tę usługę testową).