Immuunivasteet COVID-19-infektiolle tai rokotukselle

1. Tausta ja yleiskatsaus Aditxt, Inc on yhteistyössä Stanfordin yliopiston tutkijoiden kanssa laboratoriossa kehittämiä testejä (LDT:t) kolmea eri SARS-CoV-2-antigeeniä vastaan ​​suunnattujen anti-SARS-COV2-vasta-aineiden (IgG, IgA ja IgM) samanaikaiseen seurantaan. (RBD, S1 ja NP) sekä arvioida SARS-CoV-2:ta neutraloivaa vasta-aineaktiivisuutta.

   Näitä testejä tarjotaan tällä hetkellä rutiininomaisesti yleisölle nimellä AditxtScoreTM Aditxtin CLIA-sertifioidussa CAP-akkreditoidussa kliinisessä laboratoriossa Richmondissa, VA. Aditxt suorittaa nämä testit myös tutkimus- ja kehitystarkoituksiin Mountain View'n Kaliforniassa sijaitsevassa laitoksessa. AditxtScore tarjoaa ihanteellisen alustan SARS-CoV-2-altistuksen sekä COVID-19-rokotteiden immuunivasteiden todellisiin tutkimuksiin.

   Tämän havainnollisen kohorttitutkimuksen yleisenä tarkoituksena on karakterisoida COVID-spesifisiä immuunivasteita SARS-CoV-2-altistukselle tai COVID-rokotteelle tosielämässä. Osallistujia pyydetään toimittamaan verinäytteitä (joko normaali laskimoverenotto, muutama tippa verta pienellä sormenpäälaitteella tai molemmat) sekä sylki- tai nenäpuikkonäyte useiden käyntien yhteydessä. Koehenkilöt saavat rutiinikliiniseen käyttöön hyväksytyt testitulokset (eli AditxtScore), kun taas jokaisen käynnin jäännösnäytteet tallennetaan myöhempää testausta varten. Nämä toimet tukevat jatkuvaa AditxtScore-testien kehitystä ja parantavat sen tulkinnan tehokkuutta – auttaen pyrkimyksiä maksimoida kliinisen laboratoriotestauksen hyödyt pandemiavasteessa.

2. Tavoitteet • Luonnehtia immuunivasteita (esim. vasta-ainemuodostuksen suuruus/voimakkuus ja ajallinen dynamiikka, luokan vaihto ja vasta-aineiden pysyvyys) SARS-CoV-2-virukselle altistumisen tai COVID-19-rokotteen jälkeen.

   • Tutkia immuunivasteiden eroja ryhmän välillä (esim. rokote vs. luonnollinen altistuminen) ja ryhmän sisällä (eli yksilöllinen vaihtelu).

   • Määrittää AditxtScore-komponenttien ja neutraloivan vasta-aineaktiivisuuden sekä muiden mahdollisten suojan korrelaatioiden välistä suhdetta ja kuvata immuunivasteen ominaisuuksien mahdollisia kliinisiä korrelaatteja.

   • Tukea testikehitystoimia, kuten sopivien kliinisten raja-arvojen määrittämistä, analyytin stabiilisuutta ja eri näytetyyppien tulosten vertailukelpoisuutta (esim. laskimoverenotto vs. sormenpääveripisara, nenäpuikko vs. syljen kerääminen). Nämä toimet tukevat olemassa olevien testien jalostusta sekä tulevien testien (esim. COVID-19-spesifiset muisti-B-solu-, T-solu- ja NK-soluvasteet).

3. Tutkimusmenettelyt 3a. Aiherekrytointi Aiherekrytointi koostuu ensisijaisesti opiskeluhenkilöstön suusta suuhun (esim. ystävä- ja perheverkostot) ja muut paikallisyhteisön kiinnostuneet tahot (esim. kourallinen paikallisia lääkäreitä). Laajaa mainoskampanjaa ei ole odotettavissa, mutta rekrytointityötä tuetaan opintomahdollisuutta kuvaavalla opinto-ilmoituksella. Potentiaaliset koehenkilöt ohjataan soittamaan Aditxtille, jotta he voivat varata ajan laboratorioon tuloa varten ja tiedustellakseen lisää tutkimuksesta.

Kaikki, joilla on aiempi SARS-CoV-2-altistus, mahdollinen infektio tai rokotushistoria, voivat osallistua tarvittaessa negatiivisten kontrollien lisäksi. Pyrkimyksenä on saada mukaan edustava yhdistelmä ikä-, sukupuoli- ja etnisiä ryhmiä.

Siinä erityistilanteessa, että mahdollinen tutkimushenkilö haluaisi osallistua tutkimukseen, mutta ei pysty saapumaan kumpaankaan Aditxt-paikkaan (Richmondissa, VA:ssa tai Mountain View'ssa, Kaliforniassa) ja hänellä on pääsy pätevän flebotomistin puoleen, keräysmateriaalit voidaan lähettää pätevä flebotomi omalla alueellaan kokoelmiin. Tässä tapauksessa näytteet lähetettäisiin yön yli Aditxtille käsittelyä varten. Suostumuslomakkeet ja potilaskysely lähetetään osallistujalle sähköpostitse etukäteen ja tarkastetaan tutkijan kanssa etänä (esim. zoomin tai puhelun kautta), allekirjoitetaan ja lähetetään Aditxtille näytteiden mukana.

3b. Tietoon perustuvan suostumuksen hallinta ja yksityisyyden suoja Mahdolliset tutkimuksen osallistujat viedään Aditxtin laitoksen yksityiseen huoneeseen joko Richmondissa, VA:ssa tai Mountain View'ssa, Kaliforniassa, ja tutkimusryhmän jäsen selittää heille suostumuslomakkeen. Kun kaikkiin kysymyksiin on vastattu, he allekirjoittavat suostumuslomakkeen, jos he haluavat osallistua. Tilanteessa, jossa näytteitä kerätään eri paikasta, suostumus- ja valtuutuslomakkeet lähetetään sähköpostilla mahdolliselle tutkittavalle, tulostetaan ja käydään läpi tutkimusryhmän jäsenen kanssa etänä (esim. zoomin tai puhelun kautta), kunnes kaikki kysymykset täyttyvät. on vastattu. Tämän jälkeen suostumusasiakirjat allekirjoitetaan ja toimitetaan näytteen mukana.

Tämän jälkeen opintohenkilöstö antaa osallistujalle ainenumeron ja syöttää opiskelijoiden nimen, oppiaineen numeron ja suostumuksen päivämäärän sähköiseen ilmoittautumislokiin (Excel-taulukkoon). Ilmoittautumislokia säilytetään suojatussa paikassa Aditxt:n tiedostopalvelimella, johon pääsy on rajoitettu vain nimetyillä tutkimushenkilöstöllä.

Koehenkilön nimeä ja syntymäaikaa käytetään "rutiini"-testien suorittamisessa jokaisella käynnillä (eli PCR-virustesti ja vasta-ainetestit), ja tavalliset kliiniset raportit, joissa on heidän nimensä - sopivat tavallisten lääkäreiden kanssa puhumiseen - luodaan ja toimitetaan aiheille. Kuitenkin vain koehenkilöiden numeroita käytetään tunnistamaan potilaskyselyt ja tulevaa testausta varten tallennetut näyteerät.

4c. Potilaskyselyn täyttäminen Ilmoittautuessaan koehenkilöille toimitetaan lyhyt kyselylomake, joka sisältää tietoja väestötiedoista, kaikista COVID-tautiin mahdollisesti liittyvistä oireista, mahdollisista samanaikaisista sairauksista ja nykyisistä lääkkeistään. Jokaisella seurantakäynnillä toimitetaan seurantakysely.

4d. Näytekokoelma

• Terveys- ja turvallisuustoimenpiteet Viruksen leviämisriskin vuoksi seuraavia turvatoimia noudatetaan jokaisessa tutkimuskokoelmassa (nämä ovat samat varotoimet, joita Aditxt vaatii kaikille rutiininäytekeräyksille)

  - Keräysalueella saa olla vain yksi aihe kerrallaan.

  - Noutohenkilökunnan on aina käytettävä asianmukaisia ​​henkilökohtaisia ​​suojavarusteita, kun ne ovat 6 jalan etäisyydellä potilaasta. Tämä sisältää suojapuvun, käsineet, suojanaamion ja kasvosuojan.

  - Potilaiden on käytettävä suojanaamaria keräysalueella paitsi silloin, kun lämpötilamittaus ja nenäpuikkojen kerääminen suoritetaan.

  - Laboratorion keräyshenkilöstö puhdistaa keräysistuimen desinfiointipyyhkeellä potilaskeräyksen välillä.

  - Keräyksen jälkeen ja potilas on poistunut keräysalueelta, laboratorion keräyshenkilöstö vaihtaa käsineet ja käyttää käsien desinfiointiainetta henkilösuojainten poistamisessa useissa vaiheissa alla olevan menettelyn mukaisesti varmistaakseen, että kosketetut pinnat, mukaan lukien suojatakki, eivät kontaminoidu. kasvosuojus ja suojanaamari.

  - Henkilösuojainten poistamisen jälkeen laboratorion keräyshenkilöstö pesee kädet saippualla ja vedellä ennen seuraavan potilaskeräyksen aloittamista.

  • Kasvosuojat puhdistetaan desinfiointipyyhkeellä jokaisen potilaskeräyksen välillä.
  • Suojanaamarit ja -takit voidaan säilyttää uudelleenkäyttöä varten potilaskeräyksen välillä, jos henkilönsuojaimen kontaminoitumista ei havaita tai epäillä.
• Flebotomia Verinäytteet kerätään identtisesti kliiniseen käytäntöön rutiininomaisesti otettavien näytteet Aditxtin SOP 6037 Anti-SARS-CoV-2 -flebotomiamenettelyssä kuvatulla tavalla.
• Sylki Osallistujia pyydetään huuhtelemaan suunsa vedellä 5 minuuttia ennen keräystä. Heille toimitetaan 3 ml:n letku, ja niitä pyydetään täyttämään se (annalla syljen kerääntyä heidän suuhunsa ja sylkeä se sitten putkeen).
• Nenäpyyhkäisynäytteet Nenäpyyhkäisynäytteet otetaan identtisesti kliinistä käytäntöä varten rutiininomaisesti kerättyjen näytteiden kanssa Aditxtin SOP 6036 SARS-CoV-2 -nenävanupuikkojen keräysmenettelyssä kuvatulla tavalla.
• Sormipuikko

Sormenpään kapillaariverenotto suoritetaan seuraavasti:

• Pyyhi pistokohta (sen sormen kärki, jonka kohde haluaa) alkoholityynyllä ja poista lansetin suojakansi.
• Aseta lansetti kohtisuoraan sormen alapuolelle ja puhkaise iho painamalla lansettia varovasti pistoskohtaa vasten, kunnes se aktivoituu.
• Paina kevyesti ympäröivää kudosta. Hävitä ensimmäinen veripisara.
• Pidä sormi ja kapillaariletku alaspäin. Kosketa kapillaarin kärkeä veripisaraan. Putki täyttyy automaattisesti kapillaarivaikutuksen ansiosta. Kerää 3-4 tippaa verta (150-250 mikrolitraa).
• Verenoton jälkeen poista kapillaari putkesta, hävitä ja paina pistoskohtaa.
• Keräämisen jälkeen käännä putki varovasti ylösalaisin useita kertoja.

• Levitä pistoskohtaan sideainetta.

  4e. Seurantakäynnit Tutkittavia rohkaistaan ​​palaamaan Aditxtiin 1–2 kuukauden välein lisänäytteiden keräämiseksi enintään 2 vuoden ajan. Tutkittava täyttää päivitetyn kyselylomakkeen jokaisella seurantakäynnillä. Kyselylomake ja laboratoriotiedot tallennetaan tutkimustietokantaan ja ne tunnistetaan vain kohdenumeron perusteella, mikä mahdollistaa lisätutkimuksien suorittamisen nyt tunnistamattomille tiedoille.

  4f. Laboratoriotoimenpiteet / Raportointi Anti-SARS-CoV-2-vasta-aineet ja neutraloivien vasta-aineiden aktiivisuus arvioidaan Aditx Therapeuticsin AditxtScoreTM-virtaussytometriamenetelmällä. Antigeeni-/virustestaus suoritetaan Atila Biosystemsin iAMP COVID-19 -järjestelmällä. Koehenkilöille toimitetaan kliiniset laboratorioraportit, joissa kuvataan tämän testin tuloksia (täsmälleen niin kuin he olisivat ostaneet testin suoraan).

Lisäksi Yhdysvaltain terveysministeriön ja Virginian terveysministeriön asettamia raportointivaatimuksia noudatetaan. Lähestymistapamme kaikkien rutiinitulosten raportoinnissa on yhdenmukainen FDA:n ohjeiden kanssa (Policy for Coronavirus Disease-2019 Tests during the Public Health Emergency (tarkistettu)). Säilytetyillä näytteillä suoritettujen tulevien kokeellisten testien tulokset poistetaan. Yksityishenkilöille ei ilmoiteta tulevista koetuloksista.

AditxtScoreTM

o Uusi virtaussytometriaan perustuva menetelmä, joka mahdollistaa IgG-, IgA- ja IgM-vasta-aineiden samanaikaisen monitoroinnin kolmea eri COVID-antigeeniä vastaan ​​sekä vastaavan neutraloivan vasta-aineaktiivisuuden testin.

iAMP COVID-19 -järjestelmä (Atila Biosystems)

• Isoterminen monistus-PCR-tekniikka, joka havaitsee sekvenssejä sekä SARS-CoV-2-viruksen "N"- että ORF-1ab-geenistä
• FDA:n EUA Aditxt:n mukaisesti hyväksymä testipalvelu tarjoaa tällä hetkellä tätä testipalvelua rutiininomaisesti).