Respuestas inmunitarias a la infección o vacunación por COVID-19

1. Antecedentes y descripción general Aditxt, Inc, en colaboración con investigadores de la Universidad de Stanford, tiene pruebas desarrolladas en laboratorio (LDT) para monitorear simultáneamente los anticuerpos anti-SARS-COV2 (IgG, IgA e IgM) dirigidos contra 3 antígenos diferentes de SARS-CoV-2 (RBD, S1 y NP), así como evaluar la actividad del anticuerpo neutralizante del SARS-CoV-2.

   Actualmente, estas pruebas se ofrecen de forma rutinaria al público como AditxtScoreTM en el laboratorio clínico acreditado por CAP y certificado por CLIA de Aditxt en Richmond, VA. Aditxt también realiza estas pruebas con fines de investigación y desarrollo en una instalación en Mountain View, CA. AditxtScore proporciona una plataforma ideal para las investigaciones del mundo real de las respuestas inmunitarias a la exposición al SARS-CoV-2, así como a las vacunas COVID-19.

   El propósito general de este estudio observacional de cohortes es caracterizar las respuestas inmunitarias específicas de la COVID a la exposición al SARS-CoV-2 o la vacunación contra la COVID en un entorno real. Se les pedirá a los participantes que proporcionen muestras de sangre (ya sea una extracción de sangre venosa normal, unas gotas de sangre obtenidas con un pequeño dispositivo de punción en el dedo, o ambas), así como una muestra de saliva o hisopado nasal en una serie de visitas. Los sujetos recibirán los resultados de las pruebas aprobadas para uso clínico de rutina (es decir, su AditxtScore), mientras que las muestras residuales de cada visita se almacenarán para futuras pruebas. Estos esfuerzos respaldarán el desarrollo continuo de la prueba AditxtScore y mejorarán la eficacia de su interpretación, lo que ayudará a maximizar los beneficios de las pruebas de laboratorio clínico en la respuesta a la pandemia.

2. Objetivos • Caracterizar las respuestas inmunitarias (p. ej., magnitud/fuerza y ​​dinámica temporal de la generación de anticuerpos, cambio de clase y persistencia de anticuerpos) después de la exposición al virus SARS-CoV-2 o la vacunación contra la COVID-19.

   • Para investigar las diferencias en las respuestas inmunitarias entre grupos (p. ej., vacuna frente a exposición natural) y dentro del grupo (es decir, variación individual).

   • Determinar la relación entre los componentes de AditxtScore y la actividad de los anticuerpos neutralizantes y otros correlatos potenciales de protección, y describir los posibles correlatos clínicos de las características de la respuesta inmunitaria.

   • Para respaldar las actividades de desarrollo de pruebas, como la determinación de los puntos de corte clínicos apropiados, la estabilidad de los analitos y la comparabilidad de los resultados de diferentes tipos de muestras (p. ej., extracción de sangre venosa frente a gota de sangre por punción digital, hisopo nasal frente a recolección de saliva). Estas actividades apoyarán el perfeccionamiento de las pruebas existentes, así como el desarrollo de pruebas futuras (p. Respuestas de células B, células T y células NK de memoria específicas de COVID-19).

3. Procedimientos de estudio 3a. Reclutamiento de sujetos El reclutamiento de sujetos consistirá principalmente en los esfuerzos de boca en boca del personal del estudio (p. redes de amigos y familiares) y otras partes interesadas en la comunidad local (por ejemplo, un puñado de médicos locales). No se prevé una campaña publicitaria amplia, aunque se utilizará un volante de anuncio del estudio que describa la oportunidad del estudio para apoyar los esfuerzos de reclutamiento. Se indicará a los sujetos potenciales que llamen a Aditxt para programar un horario para venir al laboratorio y obtener más información sobre el estudio.

Cualquier persona con un historial previo de exposición al SARS-CoV-2, una posible infección actual o un historial de vacunación es elegible para participar, además de los controles negativos cuando sea necesario. Se harán esfuerzos para incluir una combinación representativa de edades, géneros y etnias.

En la circunstancia especial de que un posible sujeto desee participar en el estudio pero no pueda ir a ninguna de las ubicaciones de Aditxt (en Richmond, VA o Mountain View, CA) y tenga acceso a un flebotomista calificado, los materiales de recolección pueden enviarse a un flebotomista calificado en su área para cobranzas. En este caso, las muestras se enviarían durante la noche a Aditxt para su procesamiento. Los formularios de consentimiento y el cuestionario del paciente se enviarán por correo electrónico al participante con anticipación y se revisarán con el investigador de forma remota (por ejemplo, a través de zoom o llamada telefónica), se firmarán y se enviarán a Aditxt junto con las muestras.

3b. Administración del consentimiento informado y protección de la privacidad Los posibles participantes del estudio serán llevados a una habitación privada en las instalaciones de Aditxt en Richmond, VA o Mountain View, CA, y un miembro del equipo del estudio les explicará el formulario de consentimiento. Una vez respondidas todas las preguntas, si eligen participar, firmarán el formulario de consentimiento. En una situación en la que las muestras se recolecten en un lugar diferente, los formularios de consentimiento y autorización se enviarán por correo electrónico al sujeto potencial, se imprimirán y revisarán con un miembro del equipo del estudio de forma remota (por ejemplo, a través de zoom o llamada telefónica) hasta que se respondan todas las preguntas. han sido contestadas. Los documentos de consentimiento se firmarán y enviarán junto con la muestra.

El personal del estudio luego asignará al participante un número de sujeto e ingresará el nombre del sujeto, el número del sujeto y la fecha del consentimiento en un registro de inscripción electrónico (en una hoja de cálculo de Excel). El registro de inscripción se mantendrá en una ubicación segura en el servidor de archivos de Aditxt con acceso restringido solo al personal designado del estudio.

El nombre y la fecha de nacimiento de los sujetos se usarán cuando se realicen las pruebas de "rutina" en cada visita (es decir, la prueba de virus PCR y las pruebas de anticuerpos), y los informes clínicos estándar con sus nombres, apropiados para hablar con sus médicos regulares, se generarse y entregarse a los sujetos. Sin embargo, solo se utilizarán los números de sujetos para identificar los cuestionarios de los pacientes y las alícuotas de las muestras almacenadas para futuras pruebas.

4c. Completar el cuestionario del paciente Una vez inscritos, a los sujetos se les proporcionará un breve cuestionario para que completen y capturen información sobre la demografía, cualquier síntoma que pueda estar relacionado con COVID, cualquier condición comórbida y los medicamentos que están tomando actualmente. Se proporcionará un cuestionario de seguimiento en cada visita de seguimiento.

4d. Coleccion de muestra

• Precauciones de salud y seguridad Debido al riesgo potencial de transmisión viral, se observarán las siguientes precauciones de seguridad para cada recolección de estudio (estas son las mismas precauciones requeridas por Aditxt para todas las recolectas de muestras de rutina)

  - Solo se permitirá un sujeto en el área de recolección a la vez.

  - El equipo de protección personal (PPE) adecuado siempre debe ser usado por el personal de recolección cuando se encuentre a menos de 6 pies del paciente. Esto incluye una bata protectora, guantes, máscara protectora y pantalla facial.

  - Los pacientes deben usar una máscara protectora en el área de recolección, excepto cuando se realiza la toma de temperatura y la recolección de hisopado nasal.

  - El personal de recolección del laboratorio limpiará el asiento de recolección con una toallita desinfectante entre colecciones de pacientes.

  - Después de la recolección y cuando el paciente haya abandonado el área de recolección, el personal de recolección del laboratorio cambiará los guantes y usará desinfectante de manos en varios pasos para quitarse el EPP, como se describe en la sección Procedimiento a continuación, para garantizar que no se contaminen las superficies tocadas, incluida la bata protectora. pantalla facial y máscara protectora.

  - Luego de retirarse el EPP, el personal de recolección del laboratorio se lavará las manos con agua y jabón antes de iniciar la siguiente recolección del paciente.

  • Los protectores faciales se limpiarán con una toallita desinfectante entre cada recolección de pacientes.
  • Las máscaras y batas protectoras se pueden almacenar para su reutilización entre colecciones de pacientes si no se observa o sospecha contaminación del PPE.
• Flebotomía Las muestras de sangre se recolectarán de manera idéntica a las recolectadas de forma rutinaria para la práctica clínica, como se describe en el Procedimiento de flebotomía anti-SARS-CoV-2 SOP 6037 de Aditxt.
• Saliva Se pedirá a los participantes que se enjuaguen la boca con agua 5 minutos antes de la recolección. Se les proporcionará un tubo de 3 ml y se les pedirá que lo llenen (permitiendo que la saliva se acumule en la boca y luego escupiéndola en el tubo).
• Hisopos nasales Las muestras de hisopos nasales se recolectarán de manera idéntica a las recolectadas de forma rutinaria para la práctica clínica, como se describe en el Procedimiento de recolección de hisopos nasales SARS-CoV-2 de Aditxt SOP 6036.
• pinchazo en el dedo

La extracción de sangre capilar por punción digital se realizará de la siguiente manera:

• Limpie el lugar de la punción (la punta del dedo que prefiera el sujeto) con una toallita con alcohol y retire la cubierta protectora de la lanceta.
• Coloque la lanceta de forma perpendicular a la parte inferior del dedo y perfore la piel presionando suavemente la lanceta contra el lugar de la punción hasta que se active.
• Aplique presión suavemente sobre el tejido circundante. Deseche la primera gota de sangre.
• Sostenga el dedo y el tubo capilar en una posición hacia abajo. Toque la punta del capilar con la gota de sangre. El tubo se llenará automáticamente debido al efecto capilar. Recoja 3-4 gotas de sangre (150-250 microL).
• Después de la extracción de sangre, retire el capilar del tubo, deséchelo y aplique presión en el lugar de la punción.
• Después de la recolección, invierta el tubo suavemente varias veces.

• Aplique una curita en el sitio de la punción.

  4e. Visitas de seguimiento Se alentará a los sujetos a regresar a Aditxt cada 1 o 2 meses para obtener muestras adicionales durante un máximo de 2 años. El sujeto completará un cuestionario actualizado en cada visita de seguimiento. Los datos del cuestionario y del laboratorio se almacenarán en la base de datos del estudio y se identificarán solo por número de sujeto, lo que permitirá realizar estudios adicionales en los datos ahora anonimizados.

  4f. Informes/procedimientos de laboratorio Los anticuerpos anti-SARS-CoV-2 y la actividad de los anticuerpos neutralizantes se evaluarán mediante el método de citometría de flujo AditxtScoreTM de Aditx Therapeutics. Las pruebas de antígeno/virus se realizarán en el sistema iAMP COVID-19 de Atila Biosystems. Los informes de laboratorio clínico que describen los resultados de esta prueba se proporcionarán a los sujetos (exactamente como si hubieran comprado la prueba directamente).

Además, se cumplirán los requisitos de información establecidos por el Departamento de HHS de EE. UU. y el Departamento de Salud de Virginia. Nuestro enfoque para informar todos los resultados de rutina es consistente con la guía de la FDA (Política para las pruebas de la enfermedad del coronavirus-2019 durante la emergencia de salud pública (revisada)). Los resultados de futuras pruebas experimentales realizadas en muestras almacenadas serán desidentificados. No se notificará a las personas sobre los resultados de pruebas experimentales futuras.

AditxtScoreTM

o Método novedoso basado en citometría de flujo que permite el monitoreo simultáneo de anticuerpos IgG, IgA e IgM contra 3 antígenos diferentes de COVID, acompañado de una prueba para la actividad de anticuerpos neutralizantes correspondiente

Sistema iAMP COVID-19 (Atila Biosystems)

• Tecnología de PCR de amplificación isotérmica que detecta secuencias tanto del gen "N" como del gen ORF-1ab del virus SARS-CoV-2
• Aprobado para su uso por la FDA bajo una EUA Aditxt actualmente ofrece este servicio de prueba de forma rutinaria).