Vliv sezónní chemoprevence proti malárii na imunitu proti malárii u dětí v severním Beninu (ISAMIMA)

Umístění studie a populace Studie bude probíhat paralelně na dvou různých místech, ve zdravotních čtvrtích Cobly a Tchaourou nacházejících se v severním Beninu. Tyto dva okresy byly vybrány na základě programu Ministerstva zdravotnictví pro implementaci SMC. Tyto dvě lokality jsou velmi podobné, pokud jde o charakteristiky přenosu malárie a epidemiologii, s tím rozdílem, že SMC je implementováno v Cobly, ale zatím ne v Tchaourou. Vzorky odebrané dětem ve zdravotnickém obvodu Cobly budou zahrnuty jako intervenční skupina, zatímco vzorky odebrané dětem v Tchaourou budou sloužit jako kontroly, zejména s ohledem na vývoj protilátkových odpovědí. Účastníci budou plně informováni o důležitosti SMC a bude shromážděn písemný informovaný souhlas od rodiče nebo opatrovníka každého dítěte. Účast bude zcela dobrovolná.

Návrh studie a postupy Toto je studie, která se zaměřuje na sledování po dobu 12 měsíců u dětí ve věku 6 až 59 měsíců, které dostávají SMC, spolu s kontrolní skupinou, která SMC nedostává. Studie bude provedena ve spolupráci s Národním programem pro kontrolu malárie (NMCP) v Beninu. Demografické údaje poskytnuté NMCP umožní náhodný výběr dětí z náhodných domácností. Na intervenčních i kontrolních místech bude zahrnut stejný počet dětí. Studijní tým navštíví každou vybranou domácnost, aby informoval členy domácnosti o studii a bude pořádat měsíční setkání s komunitními zdravotnickými pracovníky. Budou přijaty děti souhlasných rodičů nebo opatrovníků a rodiče/opatrovníci budou vedeni prostřednictvím dotazníku, který zadá výzkumník nebo asistent (klinik). 1 ml periferní žilní krve bude odebráno do odběrových zkumavek a přeneseno do Centra expertního a zlepšujícího výzkumu v epidemiologii a veřejném zdraví (CEEREPH) na Univerzitě v Parakou, kde bude z každého vzorku připraven krevní nátěr. Padesát mikrolitrů krve se přenese na filtrační papír Whatman 3MM a uloží se při pokojové teplotě pro extrakci DNA. Zbývající plná krev se pak odstředí, plazma a červené krvinky se rozdělí na alikvoty. Vzorky budou odebírány 4krát od každého dítěte v obou skupinách (děti ve věku 6 až 59 měsíců, které dostávají nebo/nedostávají SMC) během 12měsíčního období sledování. První vzorky budou odebrány na začátku SMC (předtím, než děti dostanou SMC, druhý v den třetí dávky SMC, třetí tři měsíce po poslední dávce SMC a čtvrtý, šest měsíců po poslední dávce dávka SMC).

Prevalence malárie Ze všech vzorků budou vždy připraveny silné a tenké krevní nátěry. Thinck stěry budou fixovány v metanolu. Všechna sklíčka budou sušena na vzduchu a obarvena pomocí barviva Giemsa 3% po dobu 45-60 minut. Po zaschnutí budou obarvené tlusté a tenké krevní filmy zkoumány mikroskopicky pomocí běžného postupu. Hustoty parazitů budou zaznamenány jako počet parazitů/μl krve za předpokladu průměrného počtu leukocytů 8 000/μl krve. Zaschlé krevní skvrny na vzorcích filtračního papíru budou vysušeny na vzduchu a uloženy jednotlivě v malých sáčcích Ziploc s vysoušedlem. Detekce Plasmodium spp bude prováděna pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase (qPCR) při rutinním použití s ​​přístrojem Quantstudio.

Protilátková odpověď anti-PfEMP1 Variantní povrchové antigeny (VSA) kódované plazmodium falciparum jsou exprimovány na povrchu infikovaných erytrocytů (IE) a zprostředkovávají vazbu na řadu receptorů endoteliálních buněk. Nejlépe charakterizovanými VSA jsou genem var kódovaný P. falciparum erytrocytární membránový protein 1 (PfEMP1) rodina ve dvou exonových jednotkách. Exon I kóduje extracelulární a variabilní část proteinu a také transmembránovou oblast a exon II kóduje intracelulární a relativně konzervovaný kyselý terminální segment (ATS). Nejvariabilnější část proteinu obsahuje N-terminální segment následovaný segmenty složenými ze tří typů domén; Domény podobné vazbě Duffy (DBL-domény): interdoménové oblasti bohaté na cystein (CIDR) a C2. V této studii bude panel plazmatického IgG kvantifikován pomocí proteinů spřažených s mikrokuličkami obsahujících 28 antigenů odvozených od P. falciparum a tetanový toxoid pomocí platformy Luminex. Panel zahrnuje VAR2CSA (VSA asociovaný s placentární malárií) a 25 HIS-značených CIDR proteinů reprezentujících všechny tři hlavní skupiny PfEMP1. Kromě toho proteinové pole zahrnuje merozoitový povrchový protein 1 (MSP1) a apikální membránový antigen 1 (AMA1).