Impact de la chimioprévention du paludisme saisonnier sur l'immunité contre le paludisme chez les enfants du nord du Bénin (ISAMIMA)

Localisation et population de l'étude L'étude sera menée en parallèle dans deux sites différents, les districts sanitaires de Cobly et de Tchaourou situés au nord du Bénin. Ces deux districts ont été choisis sur la base de la programmation du Ministère de la Santé pour la mise en œuvre de la CPS. Les deux sites sont très similaires en termes de caractéristiques de transmission du paludisme et d'épidémiologie, à la différence que la CPS est mise en œuvre à Cobly mais pas encore à Tchaourou. Les échantillons prélevés sur les enfants du district sanitaire de Cobly seront inclus comme groupe d'intervention, tandis que les échantillons prélevés sur les enfants de Tchaourou serviront ainsi de témoins, notamment en ce qui concerne l'évolution des réponses anticorps. Les participants seront pleinement conseillés sur l'importance de la CPS et un consentement éclairé écrit sera recueilli auprès du parent ou du tuteur de chaque enfant. La participation sera entièrement volontaire.

Conception et procédures de l'étude Il s'agit d'une étude qui se concentre sur le suivi pendant 12 mois d'enfants âgés de 6 à 59 mois qui reçoivent la CPS, ainsi qu'un groupe témoin ne recevant pas de CPS. L'étude sera menée en collaboration avec le Programme National de Lutte contre le Paludisme (PNLP) du Bénin. Les données démographiques fournies par le PNLP permettront une sélection aléatoire d'enfants issus de ménages aléatoires. Dans les sites d'intervention et de contrôle, un nombre égal d'enfants sera inclus. L'équipe d'étude visitera chaque ménage sélectionné pour informer les membres du ménage de l'étude et tiendra des réunions mensuelles avec les agents de santé communautaires. Les enfants de parents ou tuteurs consentants seront recrutés et les parents/tuteurs seront soumis à un questionnaire administré par le chercheur ou un assistant (clinicien). 1 ml de sang veineux périphérique sera prélevé dans des tubes de prélèvement et transféré au Centre d'expertise et de valorisation de la recherche en épidémiologie et santé publique (CEEREPH) de l'Université de Parakou où un frottis sanguin sera préparé à partir de chaque prélèvement. Cinquante microlitres de sang seront transférés sur du papier filtre Whatman 3MM et stockés à température ambiante pour l'extraction de l'ADN. Le sang total restant sera ensuite centrifugé, le plasma et les globules rouges seront aliquotés aliquotés. Des échantillons seront prélevés à 4 reprises sur chaque enfant dans les deux groupes (enfants âgés de 6 à 59 mois recevant ou non une CPS) au cours de la période de suivi de 12 mois. Les premiers échantillons seront prélevés au début de la CPS (avant que les enfants ne reçoivent la CPS, le deuxième au jour de la troisième dose de CPS, le troisième à trois mois après la dernière dose de CPS et le quatrième, six mois après la dernière dose de SMC).

Prévalence du paludisme Des frottis sanguins épais et fluides seront préparés à partir de tous les échantillons à tout moment. Les frottis épais seront fixés dans du méthanol. Toutes les lames seront séchées à l'air et colorées à l'aide du colorant Giemsa à 3 % pendant 45 à 60 min. Une fois secs, les frottis sanguins épais et minces colorés seront examinés au microscope en utilisant une procédure de routine. Les densités parasitaires seront enregistrées comme le nombre de parasites/μl de sang en supposant un nombre moyen de leucocytes de 8 000/μl de sang. Les taches de sang séché sur les échantillons de papier filtre seront séchées à l'air et stockées individuellement dans de petits sacs Ziploc avec un déshydratant. La détection de Plasmodium spp sera effectuée à l'aide d'une réaction en chaîne par polymérase en temps réel (qPCR) en utilisation courante avec un instrument Quantstudio.

Réponse anticorps anti-PfEMP1 Les antigènes de surface variants codés par Plasmodium falciparum (VSA) sont exprimés à la surface des érythrocytes infectés (IE) et interviennent dans la liaison à une gamme de récepteurs de cellules endothéliales. Les VSA les mieux caractérisés sont la famille de la protéine 1 de la membrane érythrocytaire de P. falciparum codée par le gène var (PfEMP1) dans deux unités d'exon. L'exon I code pour la partie extracellulaire et variable de la protéine ainsi qu'une région transmembranaire et l'exon II code pour le segment terminal acide (ATS) intracellulaire et relativement conservé. La partie la plus variable de la protéine contient un segment N-terminal suivi de segments composés de trois types de domaines ; Domaines de type liaison Duffy (domaines DBL) : régions inter-domaines riches en cystéine (CIDR) et C2. Dans cette étude, un panel d'IgG plasmatiques sera quantifié à l'aide de protéines couplées à des microsphères comprenant 28 antigènes dérivés de P. falciparum et de l'anatoxine tétanique, à l'aide de la plateforme Luminex. Le panel comprend VAR2CSA (le VSA associé au paludisme placentaire) et 25 protéines CIDR marquées HIS représentant les trois principaux groupes de PfEMP1. De plus, le réseau de protéines comprend la protéine de surface de mérozoïte 1 (MSP1) et l'antigène membranaire apical 1 (AMA1).