季节性疟疾化学预防对贝宁北部儿童疟疾免疫力的影响 (ISAMIMA)

研究地点和人口 该研究将在两个不同地点同时进行，即位于贝宁北部的 Cobly 和 Tchaourou 卫生区。 这两个地区是根据卫生部实施 SMC 的计划选择的。 这两个站点在疟疾传播特征和流行病学方面非常相似，不同之处在于在 Cobly 实施了 SMC，而在 Tchaourou 尚未实施。 从 Cobly 卫生区的儿童身上采集的样本将被纳入干预组，而从 Tchaourou 的儿童身上采集的样本将作为对照，特别是在抗体反应的演变方面。 参与者将被充分告知 SMC 的重要性，并且将从每个孩子的父母或监护人那里收集书面知情同意书。 参与将完全自愿。

研究设计和程序 这是一项研究，重点关注接受 SMC 的 6 至 59 个月大的儿童以及未接受 SMC 的对照组超过 12 个月的随访。 该研究将与贝宁国家疟疾控制计划 (NMCP) 合作进行。 NMCP 提供的人口统计数据将允许从随机家庭中随机选择儿童。 在干预和控制地点，将包括相同数量的儿童。 研究小组将访问每个选定的家庭，将研究告知家庭成员，并将每月与社区卫生工作者举行会议。 将招募同意的父母或监护人的孩子，父母/监护人将通过研究人员或助理（临床医生）管理的问卷调查。将 1 毫升外周静脉血收集到收集管中，并转移到帕拉库大学的流行病学和公共卫生专业知识和加强研究中心 (CEEREPH)，在那里将从每个样本中制备血涂片。 将 50 微升血液转移到 Whatman 3MM 滤纸上并在室温下储存以用于 DNA 提取。 然后将剩余的全血离心，将血浆和红细胞等分。 在 12 个月的随访期间，将从两组中的每个儿童（6 至 59 个月接受或/未接受 SMC 的儿童）收集 4 次样品。 第一个样本将在 SMC 开始时（儿童接受 SMC 之前）收集，第二个样本在第三剂 SMC 当天收集，第三个样本在最后一剂 SMC 后三个月收集，第四个样本在最后一剂后六个月收集SMC 剂量）。

疟疾流行 将始终从所有样本中制备厚薄的血涂片。 Thinck 涂片将固定在甲醇中。 所有载玻片将风干并使用 3% 吉姆萨染料染色 45-60 分钟。 干燥后，将使用常规程序在显微镜下检查染色的厚血膜和薄血膜。 假设平均白细胞计数为 8,000/μl 血液，寄生虫密度将记录为寄生虫数量/μl 血液。 滤纸样本上的干血点将被风干并单独储存在带有干燥剂的小 Ziploc 袋中。 将使用 Quantstudio 仪器常规使用的实时聚合酶链反应 (qPCR) 进行疟原虫属检测。

抗 PfEMP1 抗体反应 恶性疟原​​虫编码的变异表面抗原 (VSA) 在受感染的红细胞 (IE) 表面表达，并介导与一系列内皮细胞受体的结合。 最具特征的 VSA 是 var 基因编码的恶性疟原虫红细胞膜蛋白 1 (PfEMP1) 家族，有两个外显子单位。 外显子 I 编码蛋白质的细胞外和可变部分以及跨膜区，外显子 II 编码细胞内和相对保守的酸性末端片段 (ATS)。 蛋白质最易变的部分包含一个 N 端片段，其后是由三种结构域类型组成的片段； Duffy 结合样域（DBL 域）：富含半胱氨酸的域间区域 (CIDR) 和 C2。 在这项研究中，将使用 Luminex 平台使用包含 28 种恶性疟原虫衍生抗原和破伤风类毒素的微球珠偶联蛋白对一组血浆 IgG 进行量化。 该面板包括 VAR2CSA（与胎盘疟疾相关的 VSA）和 25 个 HIS 标记的 CIDR 蛋白，代表 PfEMP1 的所有三个主要组。 此外，蛋白质阵列还包括裂殖子表面蛋白 1 (MSP1) 和顶膜抗原 1 (AMA1)。