Indvirkning af sæsonbestemt malaria kemoforebyggelse på immunitet mod malaria blandt børn i det nordlige Benin (ISAMIMA)

Undersøgelsens placering og befolkning Undersøgelsen vil blive udført parallelt på to forskellige steder, sundhedsdistrikterne Cobly og Tchaourou beliggende i det nordlige Benin. Disse to distrikter er valgt ud fra Sundhedsministeriets programmering for implementering af SMC. De to steder er meget ens med hensyn til malariatransmissionskarakteristika og epidemiologi, med den forskel, at SMC er implementeret i Cobly, men endnu ikke i Tchaourou. Prøver indsamlet fra børn i Cobly sundhedsdistrikt vil blive inkluderet som interventionsgruppen, mens prøver indsamlet fra børn i Tchaourou således vil tjene som kontroller, især med hensyn til udviklingen af ​​antistofresponser. Deltagerne vil blive fuldt vejledt om vigtigheden af ​​SMC, og skriftligt informeret samtykke vil blive indsamlet fra forælderen eller værgen til hvert barn. Deltagelse vil være helt frivillig.

Undersøgelsesdesign og procedurer Dette er en undersøgelse, der fokuserer på opfølgning over 12 måneder af børn i alderen 6 til 59 måneder, der modtager SMC, sammen med en kontrolgruppe, der ikke modtager SMC. Undersøgelsen vil blive udført i samarbejde med National Malaria Control Program (NMCP) i Benin. Demografiske data leveret af NMCP vil give mulighed for et tilfældigt udvalg af børn fra tilfældige husstande. På både interventions- og kontrolsteder vil lige mange børn blive inkluderet. Undersøgelsesteamet vil besøge hver udvalgt husstand for at informere husstandsmedlemmer om undersøgelsen og vil holde månedlige møder med lokale sundhedsarbejdere. Børn af samtykkende forældre eller værger vil blive rekrutteret, og forældre/værger vil blive taget gennem et spørgeskema administreret af forskeren eller en assistent (kliniker). 1 ml perifert veneblod vil blive opsamlet i opsamlingsrør og overført til Center for Expertise and Enhancing Research in Epidemiology and Public Health (CEEREPH) ved University of Parakou, hvor en blodudstrygning vil blive fremstillet fra hver prøve. Halvtreds mikroliter blod vil blive overført til Whatman 3MM filterpapir og opbevaret ved stuetemperatur til DNA-ekstraktion. Det resterende fuldblod vil derefter blive centrifugeret, plasma og røde blodlegemer vil blive uddelt i alikvoter. Der vil blive indsamlet prøver 4 gange fra hvert barn i begge grupper (børn i alderen 6 til 59 måneder, der modtager eller/ikke får SMC) i løbet af den 12 måneder lange opfølgningsperiode. De første prøver vil blive indsamlet i begyndelsen af ​​SMC (før børn får SMC, den anden på dagen for den tredje dosis af SMC, den tredje tre måneder efter den sidste dosis af SMC og den fjerde, seks måneder efter den sidste dosis af SMC).

Malariaprævalens Tykke og tynde blodudstrygninger vil til enhver tid blive forberedt fra alle prøver. Tynde udstrygninger vil blive fikset i methanol. Alle objektglas vil blive lufttørret og farvet med Giemsa-farve 3% i 45-60 min. Når de er tørre, vil de farvede tykke og tynde blodfilm blive undersøgt mikroskopisk ved hjælp af en rutineprocedure. Parasittætheder vil blive registreret som antallet af parasitter/μl blod under antagelse af et gennemsnitligt leukocyttal på 8.000/μl blod. Tørrede blodpletter på filterpapirprøver lufttørres og opbevares individuelt i små Ziploc-poser med et tørremiddel. Plasmodium spp detektion vil blive udført ved hjælp af en real-time polymerase kædereaktion (qPCR) i rutinemæssig brug med et Quantstudio instrument.

Anti-PfEMP1-antistofrespons Plasmodium falciparum-kodede variantoverfladeantigener (VSA) udtrykkes på overfladen af ​​inficerede erytrocytter (IE) og medierer binding til en række endotelcellereceptorer. De bedst karakteriserede VSA er den var-genkodede P. falciparum erytrocytmembranprotein 1 (PfEMP1)-familie i to exon-enheder. Exon I koder for den ekstracellulære og variable del af proteinet samt en transmembranregion, og Exon II koder for det intracellulære og relativt konserverede sure terminale segment (ATS). Den mest variable del af proteinet indeholder et N-terminalt segment efterfulgt af segmenter sammensat af tre domænetyper; Duffy bindingslignende domæner (DBL-domæner): Cysteinrige interdomæneregioner (CIDR'er) og C2. I denne undersøgelse vil et panel af plasma-IgG blive kvantificeret ved hjælp af mikrosfære-perle-koblede proteiner omfattende 28 P. falciparum-afledte antigener og tetanustoxoid, ved hjælp af Luminex-platformen. Panelet omfatter VAR2CSA (VSA forbundet med placental malaria) og 25 HIS-mærkede CIDR-proteiner, der repræsenterer alle tre hovedgrupper af PfEMP1. Derudover inkluderer proteinarrayet merozoitoverfladeprotein 1 (MSP1) og apikalt membranantigen 1 (AMA1).