Impact van seizoensgebonden malaria-chemopreventie op de immuniteit tegen malaria bij kinderen in Noord-Benin (ISAMIMA)

Studielocatie en populatie De studie zal parallel worden uitgevoerd op twee verschillende locaties, de gezondheidsdistricten Cobly en Tchaourou in het noorden van Benin. Deze twee districten zijn gekozen op basis van de programmering van het ministerie van Volksgezondheid voor de implementatie van SMC. De twee sites lijken erg op elkaar wat betreft kenmerken van malariaoverdracht en epidemiologie, met het verschil dat SMC is geïmplementeerd in Cobly maar nog niet in Tchaourou. Monsters van kinderen in het gezondheidsdistrict Cobly zullen worden opgenomen als de interventiegroep, terwijl monsters die zijn verzameld van kinderen in Tchaourou dus dienen als controles, in het bijzonder met betrekking tot de evolutie van antilichaamresponsen. Deelnemers zullen volledig worden voorgelicht over het belang van SMC en schriftelijke geïnformeerde toestemming zal worden verkregen van de ouder of voogd van elk kind. Deelname zal geheel vrijwillig zijn.

Onderzoeksopzet en procedures Dit is een onderzoek dat zich richt op de follow-up gedurende 12 maanden van kinderen van 6 tot 59 maanden die SMC krijgen, samen met een controlegroep die geen SMC krijgt. De studie zal worden uitgevoerd in samenwerking met het National Malaria Control Program (NMCP) van Benin. Door de NMCP verstrekte demografische gegevens maken een willekeurige selectie van kinderen uit willekeurige huishoudens mogelijk. Op zowel interventie- als controlelocaties zullen evenveel kinderen worden opgenomen. Het onderzoeksteam zal elk geselecteerd huishouden bezoeken om de leden van het huishouden te informeren over het onderzoek en zal maandelijks vergaderen met de gezondheidswerkers in de gemeenschap. Kinderen van instemmende ouders of voogden zullen worden geworven en ouders/verzorgers zullen een vragenlijst afnemen die wordt afgenomen door de onderzoeker of een assistent (arts). 1 ml perifeer veneus bloed wordt verzameld in verzamelbuisjes en overgebracht naar het Centre for Expertise and Enhancing Research in Epidemiology and Public Health (CEEREPH) aan de Universiteit van Parakou, waar van elk monster een bloeduitstrijkje wordt gemaakt. Vijftig microliter bloed wordt overgebracht naar Whatman 3MM filtreerpapier en bij kamertemperatuur bewaard voor DNA-extractie. Het resterende volbloed wordt vervolgens gecentrifugeerd, het plasma en de rode bloedcellen worden in porties verdeeld. Tijdens de follow-upperiode van 12 maanden zullen er bij elk kind in beide groepen 4 keer monsters worden genomen (kinderen van 6 tot 59 maanden die al dan niet SMC krijgen). De eerste monsters worden verzameld aan het begin van de SMC (voordat kinderen de SMC krijgen, de tweede op de dag van de derde dosis SMC, de derde drie maanden na de laatste dosis SMC en de vierde zes maanden na de laatste dosis). dosis SMC).

Malariaprevalentie Van alle monsters worden altijd dikke en dunne bloeduitstrijkjes gemaakt. Dunne uitstrijkjes worden gefixeerd in methanol. Alle objectglaasjes worden aan de lucht gedroogd en gekleurd met Giemsa-kleurstof 3% gedurende 45-60 minuten. Eenmaal droog, zullen de gekleurde dikke en dunne bloedfilms microscopisch worden onderzocht met behulp van een routinematige procedure. Parasietdichtheden worden geregistreerd als het aantal parasieten/μl bloed uitgaande van een gemiddeld aantal leukocyten van 8.000/μl bloed. Gedroogde bloedvlekken op filtreerpapiermonsters worden aan de lucht gedroogd en afzonderlijk opgeslagen in kleine Ziploc-zakjes met een droogmiddel. Plasmodium spp-detectie zal worden uitgevoerd met behulp van een real-time polymerasekettingreactie (qPCR) die routinematig wordt gebruikt met een Quantstudio-instrument.

Anti-PfEMP1-antilichaamrespons Door Plasmodium falciparum gecodeerde variante oppervlakteantigenen (VSA) worden tot expressie gebracht op het oppervlak van geïnfecteerde erytrocyten (IE) en bemiddelen binding aan een reeks endotheelcelreceptoren. De best gekarakteriseerde VSA zijn de var-gen-gecodeerde P. falciparum erytrocytmembraaneiwit 1 (PfEMP1) familie in twee exon-eenheden. Exon I codeert voor het extracellulaire en variabele deel van het eiwit evenals een transmembraangebied en Exon II codeert voor het intracellulaire en relatief geconserveerde zure terminale segment (ATS). Het meest variabele deel van het eiwit bevat een N-terminaal segment gevolgd door segmenten die zijn samengesteld uit drie domeintypen; Duffy-bindingachtige domeinen (DBL-domeinen): cysteïnerijke interdomeinregio's (CIDR's) en C2. In deze studie zal een panel plasma-IgG worden gekwantificeerd met behulp van aan microbolletjes gekoppelde eiwitten die 28 van P. falciparum afgeleide antigenen en tetanustoxoïde omvatten, met behulp van het Luminex-platform. Het panel omvat VAR2CSA (de VSA geassocieerd met placentale malaria) en 25 HIS-gelabelde CIDR-eiwitten die alle drie de hoofdgroepen van PfEMP1 vertegenwoordigen. Daarnaast omvat de eiwitarray merozoïet oppervlakte-eiwit 1 (MSP1) en apicaal membraanantigeen 1 (AMA1).