Účinky LiveSpo X-SECRET v podpůrné léčbě vaginitidy

Vaginitida je onemocnění související s ženským reprodukčním ústrojím včetně bakteriální vaginózy (Bakteriální vaginóza - BV), pohlavně přenosných chorob (Sexually Transmitted Diseases - STDs)... Toto je považováno za běžnou infekci ve světě, zejména v rozvojových a nerozvinutých tropických zemích, kde až 3/4 populace trpí pohlavně přenosnými chorobami, zejména v reprodukčním věku 15-24 let. Existuje mnoho mikrobiálních agens, kteří způsobují gynekologická onemocnění, včetně bakterií, virů, plísní, bičíkovců... Bakteriální vaginóza je endogenní vaginální infekce způsobená více než 30 různými druhy bakterií, především anaerobními bakteriemi jako Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... Zánět pochvy je u Vietnamek poměrně častý. Toto je problém ve veřejném zdravotnictví, protože sexuálně přenosné nemoci mají často mírné nebo žádné příznaky, takže je snadné je ignorovat. Kromě toho může použití širokospektrých antibiotik vést k vedlejším účinkům, jako je ztráta chuti k jídlu, únava a sexuální problémy, zatímco opakovaná léčba může vést ke vzniku rezistence na antibiotika, což představuje významnou výzvu pro léčbu BV a STD po celém světě. Onemocnění je normálně způsobeno nahrazením Lactobacillus (skupina prospěšných bakterií vagíny), což vede k přemnožení anaerobních bakterií. Probiotika jsou mikroorganismy, které jsou při konzumaci v dostatečném množství prospěšné lidskému zdraví, hrají důležitou roli při udržování rovnováhy tělesné mikroflóry, zejména ve střevech a pochvě. Studie zjistily, že probiotika mohou pomoci snížit výskyt a závažnost vaginálních infekcí, včetně bakteriální vaginózy a kvasinkových infekcí. V současné době se studují probiotika formulovaná jako perorální kapsle nebo gynekologické čípky obsahující kmeny Bifidobacterium nebo Lactobacillus jako potenciální doplňková terapie pro léčbu vaginálních infekcí. Tyto kmeny však mají nízkou životaschopnost a jsou citlivé na teplotu, vlhkost a pH, což ztěžuje uchování. Jejich účinnost proto závisí na konkrétních použitých kmenech a dávce potřebné k dosažení vysokých koncentrací ve vaginálním traktu. Prospěšné bakterie rodu Bacillus byly dlouho studovány z hlediska jejich bezpečnosti. Například Bacillus subtilis, B. clausii a B. coagulans jsou často aerobní nebo fakultativně anaerobní bakterie, schopné rychlého růstu a tvorby spór, které jsou odolné vůči drsným podmínkám, jako je nedostatek výživy, nedostatek kyslíku, vysoké teploty a dokonce i antibiotika. Kromě toho jsou tyto bakterie zvláště vhodné pro použití jako přímé a in situ probiotické vaginální spreje, protože mohou také vylučovat antibakteriální sloučeniny, kyselinu mléčnou, H2O2 a aktivovat slizniční vrstvu střevního imunitního systému. Probiotická terapie vaginálním sprejem pomáhá podporovat léčbu a prevenci sexuálně přenosných patogenů a představuje slibnou podporu/alternativní řešení tradiční antibiotické terapie.

Cílem této studie je posoudit, zda vaginální sprejování probiotických spor Bacillus může snížit klinické příznaky a zlepšit různé subklinické markery pacientek s vaginitidou.

Metody: Prospektivní design randomizované, dvojitě zaslepené a kontrolované klinické studie. Experiment byl proveden na ženách s vaginitidou a získaná data byla porovnána buď mezi 2 skupinami nebo mezi dvěma až čtyřmi časovými body léčebného období stejné skupiny. Kontrolní skupině byla aplikována rutinní léčba v nemocnici kombinovaná s rozprašováním 0,9% NaCl fyziologického roztoku do pochvy 3x/čas x 2x/den nepřetržitě po dobu 28 dnů. Testované skupině byla aplikována rutinní léčba v nemocnici kombinovaná s nástřikem LiveSpo X-SECRET do pochvy 3x/čas x 2x/den nepřetržitě po dobu 28 dnů.

Vzorky se odebírají v den 0 a jeden nebo více z následujících časových bodů: den 3, 7, 14 a/nebo 28, v závislosti na schopnosti každé výzkumné jednotky kontrolovat odběr vzorků v určitých intervalech během léčebného postupu. Podrobně, vzorky byly odebrány v den 0, 7 a 28 v Hanoi OGH; a v den 0, 3, 7, 14, 28 v Bac Ninh CDC. Subklinické ukazatele související s vaginitidou byly sledovány v různých časových bodech, včetně:

• Bakteriální barvící testy: Tyto testy byly rutinně prováděny na odděleních mikrobiologie, jak v Hanoi OGH, tak v Bac Ninh CDC, v den 0 a den 28.
• Test PCR v reálném čase k detekci 9 hlavních mikroorganismů, které způsobují zánět ve vzorcích vaginálních výtěrů: Gardnerella vaginalis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (CT); Candida albicans (CA); Trichomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); lidský alfaherpesvirus typu 1 (HSV-1); Lidský alfaherpesvirus typu 2 (HSV-2). Tento test byl proveden na Klinice mikrobiologického, houbového a parazitologického testování Ústřední dermatologické nemocnice s použitím komerčních souprav nebo „interní“ soupravy, která byla nedávno vyvinuta a publikována mezinárodně výzkumným týmem (Bui et al., 2023 ). Test byl proveden v den 0, 7 a 28 pro vzorky odebrané v Hanoi OGH; a v den 0, 3, 7, 14, 28 pro vzorky odebrané v Bac Ninh CDC.
• Test PCR v reálném čase k detekci Bacillus sp. včetně B. subtilis, B. clausii a B. coagulans ve vzorcích vaginálních výtěrů. Tento experiment byl proveden ve výzkumném centru Spobio, Anabio R&D. Test byl proveden v den 0, 7 a 28 pro vzorky odebrané v Hanoi OGH; a v den 0, 3, 7, 14, 28 pro vzorky odebrané v Bac Ninh CDC.
• Analýza imunitního indexu zahrnujícího 5 typů cytokinů IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α a IgA byla provedena pomocí techniky ELISA ze vzorků vaginálních výtěrů odebraných ve dnech 0, 7 a 28 v Hanoji Pouze OGH. Testy se provádějí na Oddělení mikrobiologie, plísňového a parazitologického testování Ústřední kožní nemocnice nebo Výzkumného centra Spobio, Anabio R&D.
• Změny v mikrobiomu pomocí analýzy metagenomu 16S rRNA: Tato analýza mikrobiomu byla provedena pro reprezentativní vzorky vaginálních výtěrů od pacientek každé výzkumné skupiny (očekává se 10–15 pacientek/skupina) pomocí sekvenování nové generace (NGS) na systému Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) s konfigurací běhu 2 × 250 bp. Test byl proveden v den 0 a jeden nebo více z následujících časových bodů den 7 a 28 pro vzorky odebrané v Hanoi OGH a Bac Ninh CDC.