Efectos de LiveSpo X-SECRET en el tratamiento de apoyo de la vaginitis

La vaginitis es una enfermedad relacionada con el tracto reproductivo de la mujer que incluye la vaginosis bacteriana (Bacterial vaginosis - BV), las enfermedades de transmisión sexual (Sexually Transmitted Diseases - STDs)... Se considera una infección común en el mundo, especialmente en los países tropicales en desarrollo y subdesarrollados, donde hasta 3/4 de la población padece ETS, principalmente en el grupo de edad reproductiva de 15 a 24 años. Hay muchos agentes microbianos que causan enfermedades ginecológicas, entre ellos bacterias, virus, hongos, flagelados... La vaginosis bacteriana es una infección vaginal endógena causada por más de 30 especies diferentes de bacterias, principalmente bacterias anaerobias como Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... La vaginitis es bastante común en las mujeres vietnamitas. Este es un tema de gran preocupación en la atención de salud pública porque las enfermedades de transmisión sexual a menudo presentan síntomas leves o ningún síntoma, por lo que son fáciles de ignorar. Además, el uso de antibióticos de amplio espectro puede provocar efectos secundarios como pérdida de apetito, fatiga y problemas sexuales, mientras que los tratamientos repetidos pueden provocar la aparición de resistencia a los antibióticos, lo que plantea un desafío importante para el tratamiento de la VB y las ETS en todo el mundo. La enfermedad normalmente es causada por la sustitución de Lactobacillus (un grupo de bacterias beneficiosas de la vagina) que conduce a un crecimiento excesivo de bacterias anaeróbicas. Los probióticos son microorganismos beneficiosos para la salud humana cuando se consumen en cantidades suficientes y desempeñan un papel importante en el mantenimiento del equilibrio de la microflora del cuerpo, especialmente en los intestinos y la vagina. Los estudios han encontrado que los probióticos pueden ayudar a reducir la incidencia y la gravedad de las infecciones vaginales, incluidas la vaginosis bacteriana y las infecciones por hongos. Actualmente, los probióticos formulados como cápsulas orales o supositorios ginecológicos que contienen cepas de Bifidobacterium o Lactobacillus se están estudiando como una posible terapia complementaria para el tratamiento de infecciones vaginales. Sin embargo, estas cepas tienen baja viabilidad y son sensibles a la temperatura, la humedad y el pH, lo que dificulta su conservación. Por tanto, su eficacia depende de las cepas específicas utilizadas y de la dosis necesaria para alcanzar altas concentraciones en el tracto vaginal. Las bacterias beneficiosas del género Bacillus han sido estudiadas durante mucho tiempo por su seguridad. Por ejemplo, Bacillus subtilis, B. clausii y B. coagulans son a menudo bacterias aeróbicas o anaeróbicas facultativas, capaces de crecer rápidamente y formar esporas resistentes a condiciones duras como la falta de nutrición, la falta de oxígeno, las altas temperaturas e incluso los antibióticos. Además, estas bacterias son particularmente adecuadas para su uso como aerosoles vaginales probióticos directos e in situ, ya que también pueden secretar compuestos antibacterianos, ácido láctico, H2O2 y activar la capa mucosa del sistema inmunológico intestinal. La terapia con probióticos en pulverización vaginal ayuda a respaldar el tratamiento y la prevención de patógenos de transmisión sexual, proporcionando un soporte/solución alternativa prometedora a la terapia con antibióticos tradicional.

El objetivo de este estudio es evaluar si la pulverización vaginal de esporas de probióticos Bacillus puede reducir los síntomas clínicos y mejorar varios marcadores subclínicos de pacientes con vaginitis.

Métodos: Diseño prospectivo de ensayo clínico aleatorizado, doble ciego y controlado. El experimento se realizó en mujeres con vaginitis y los datos obtenidos se compararon entre 2 grupos o entre dos y cuatro momentos del período de tratamiento del mismo grupo. Al grupo de control se le aplicó el tratamiento de rutina en el hospital combinado con la pulverización de solución salina fisiológica de NaCl al 0,9% en la vagina 3 veces/vez x 2 veces/día de forma continua durante 28 días. Al grupo de prueba se le aplicó un tratamiento de rutina en el hospital combinado con la pulverización de LiveSpo X-SECRET en la vagina 3 veces/vez x 2 veces/día de forma continua durante 28 días.

Las muestras se toman el día 0 y uno o más de los siguientes momentos: día 3, 7, 14 y/o 28, dependiendo de la capacidad de cada unidad de investigación para controlar el muestreo en ciertos intervalos durante el procedimiento de tratamiento. En detalle, se tomaron muestras los días 0, 7 y 28 en Hanoi OGH; y los días 0, 3, 7, 14, 28 en Bac Ninh CDC. Se monitorearon indicadores subclínicos relacionados con la vaginitis en diferentes momentos, que incluyen:

• Pruebas de tinción bacteriana: estas pruebas se realizaron de forma rutinaria en los Departamentos de Microbiología, tanto en Hanoi OGH como en Bac Ninh CDC, el día 0 y el día 28.
• Ensayo de PCR en tiempo real para detectar 9 microorganismos principales que causan inflamación en muestras de hisopos vaginales: Gardnerella vaginalis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Clamidia trachomatis (CT); Candida albicans (CA); Tricomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); Alfaherpesvirus humano tipo 1 (HSV-1); Alfaherpesvirus humano tipo 2 (HSV-2). Este ensayo se realizó en el Departamento de Pruebas de Microbiología, Hongos y Parasitología del Hospital Central de Dermatología, utilizando kits comerciales o un kit "interno" que fue desarrollado y publicado recientemente internacionalmente por el equipo de investigación (Bui et al., 2023). ). El ensayo se llevó a cabo los días 0, 7 y 28 para muestras recolectadas en Hanoi OGH; y los días 0, 3, 7, 14, 28 para las muestras recolectadas en Bac Ninh CDC.
• Ensayo de PCR en tiempo real para detectar Bacillus sp. incluyendo B. subtilis, B. clausii y B. coagulans en muestras de hisopos vaginales. Este experimento se realizó en el Centro de Investigación Spobio, Anabio R&D. El ensayo se llevó a cabo los días 0, 7 y 28 para muestras recolectadas en Hanoi OGH; y los días 0, 3, 7, 14, 28 para las muestras recolectadas en Bac Ninh CDC.
• El análisis del índice inmunológico que incluye 5 tipos de citocinas IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IgA se realizó mediante la técnica ELISA a partir de muestras de hisopos vaginales recolectadas los días 0, 7 y 28 en Hanoi. Solo OGH. Las pruebas se realizan en el Departamento de Pruebas de Microbiología, Hongos y Parasitología, Hospital Central de Dermatología o Centro de Investigación Spobio, Anabio R&D.
• Cambios en el microbioma mediante análisis de metagenoma de ARNr 16S: este análisis de microbioma se realizó para muestras representativas de hisopos vaginales de pacientes de cada grupo de investigación (se espera entre 10 y 15 pacientes/grupo) mediante secuenciación de nueva generación (NGS) en un sistema Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, EE. UU.) con una configuración de ejecución de 2 × 250 pb. El ensayo se llevó a cabo el día 0 y uno o más de los siguientes puntos temporales, los días 7 y 28, para muestras recolectadas tanto en Hanoi OGH como en Bac Ninh CDC.