Efeitos do LiveSpo X-SECRET no tratamento de suporte da vaginite

A vaginite é uma doença relacionada ao trato reprodutivo da mulher, incluindo vaginose bacteriana (Vaginose bacteriana - VB), doenças sexualmente transmissíveis (Doenças Sexualmente Transmissíveis - DST)... Esta é considerada uma infecção comum no mundo, especialmente nos países tropicais em desenvolvimento e subdesenvolvidos, com até 3/4 da população sofrendo de DST, principalmente na faixa etária reprodutiva de 15 a 24 anos. Existem muitos agentes microbianos que causam doenças ginecológicas, incluindo bactérias, vírus, fungos, flagelados... A vaginose bacteriana é uma infecção vaginal endógena causada por mais de 30 espécies diferentes de bactérias, principalmente bactérias anaeróbicas, como Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... A vaginite é bastante comum em mulheres vietnamitas. Esta é uma questão de grande preocupação nos cuidados de saúde pública porque as doenças sexualmente transmissíveis apresentam frequentemente sintomas ligeiros ou inexistentes, pelo que são fáceis de ignorar. Além disso, o uso de antibióticos de amplo espectro pode levar a efeitos colaterais como perda de apetite, fadiga e problemas sexuais, enquanto tratamentos repetidos podem levar ao aparecimento de resistência aos antibióticos, representando um desafio significativo para o tratamento de VB e DSTs em todo o mundo. A doença é normalmente causada pela substituição de Lactobacillus (um grupo de bactérias benéficas da vagina), levando ao crescimento excessivo de bactérias anaeróbicas. Os probióticos são microrganismos benéficos à saúde humana quando consumidos em quantidades suficientes, desempenhando um papel importante na manutenção do equilíbrio da microflora do organismo, principalmente no intestino e na vagina. Estudos descobriram que os probióticos podem ajudar a reduzir a incidência e a gravidade das infecções vaginais, incluindo vaginose bacteriana e infecções fúngicas. Atualmente, probióticos formulados como cápsulas orais ou supositórios ginecológicos contendo cepas de Bifidobacterium ou Lactobacillus estão sendo estudados como uma potencial terapia adjuvante para o tratamento de infecções vaginais. Porém, essas cepas apresentam baixa viabilidade e são sensíveis à temperatura, umidade e pH, dificultando a preservação. A sua eficácia depende, portanto, das estirpes específicas utilizadas e da dosagem necessária para atingir concentrações elevadas no trato vaginal. Bactérias benéficas do gênero Bacillus têm sido estudadas há muito tempo quanto à sua segurança. Por exemplo, Bacillus subtilis, B. clausii e B. coagulans são frequentemente bactérias aeróbicas ou anaeróbicas facultativas, capazes de crescer rapidamente e formar esporos resistentes a condições adversas, como falta de nutrição, falta de oxigénio, altas temperaturas e até antibióticos. Além disso, essas bactérias são particularmente adequadas para uso como sprays vaginais probióticos diretos e in-situ, uma vez que também podem secretar compostos antibacterianos, ácido láctico, H2O2 e ativar a camada mucosa do sistema imunológico intestinal. A terapia probiótica com pulverização vaginal ajuda a apoiar o tratamento e a prevenção de patógenos sexualmente transmissíveis, fornecendo um suporte/solução alternativa promissora à terapia antibiótica tradicional.

O objetivo deste estudo é avaliar se a pulverização vaginal de esporos probióticos de Bacillus pode reduzir os sintomas clínicos e melhorar vários marcadores subclínicos de pacientes com vaginite.

Métodos: Desenho prospectivo de ensaio clínico randomizado, duplo-cego e controlado. O experimento foi realizado em mulheres com vaginite e os dados obtidos foram comparados entre dois grupos ou entre dois a quatro momentos do período de tratamento do mesmo grupo. O grupo controle recebeu o tratamento de rotina no hospital combinado com pulverização de solução salina fisiológica NaCl a 0,9% na vagina 3 vezes/vez x 2 vezes/dia continuamente por 28 dias. O grupo de teste recebeu tratamento de rotina no hospital combinado com pulverização de LiveSpo X-SECRET na vagina 3 vezes/tempo x 2 vezes/dia continuamente durante 28 dias.

As amostras são coletadas no dia 0 e em um ou mais dos seguintes momentos: dia 3, 7, 14 e/ou 28, dependendo da capacidade de cada unidade de pesquisa de controlar a amostragem em determinados intervalos durante o procedimento de tratamento. Em detalhes, as amostras foram coletadas nos dias 0, 7 e 28 no Hanoi OGH; e nos dias 0, 3, 7, 14, 28 no Bac Ninh CDC. Indicadores subclínicos relacionados à vaginite foram monitorados em diferentes momentos, incluindo:

• Testes de coloração bacteriana: Esses testes foram realizados rotineiramente nos Departamentos de Microbiologia, tanto no Hanoi OGH quanto no Bac Ninh CDC, no dia 0 e no dia 28.
• Ensaio de PCR em tempo real para detectar 9 principais microrganismos que causam inflamação em amostras de esfregaços vaginais: Gardnerella vaginalis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (CT); Candida albicans (CA); Trichomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); Alfaherpesvírus humano tipo 1 (HSV-1); Alfaherpesvírus humano tipo 2 (HSV-2). Este ensaio foi realizado no Departamento de Microbiologia, Fungos e Parasitologia do Hospital Central de Dermatologia, utilizando kits comerciais ou um kit "interno" que foi recentemente desenvolvido e publicado internacionalmente pela equipe de pesquisa (Bui et al., 2023 ). O ensaio foi realizado nos dias 0, 7 e 28 para amostras coletadas no OGH de Hanói; e nos dias 0, 3, 7, 14, 28 para amostras coletadas no Bac Ninh CDC.
• Ensaio de PCR em tempo real para detecção de Bacillus sp. incluindo B. subtilis, B. clausii e B. coagulans em amostras de esfregaços vaginais. Este experimento foi realizado no Spobio Research Center, Anabio R&D. O ensaio foi realizado nos dias 0, 7 e 28 para amostras coletadas no OGH de Hanói; e nos dias 0, 3, 7, 14, 28 para amostras coletadas no Bac Ninh CDC.
• A análise do índice imunológico incluindo 5 tipos de citocinas IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IgA foi realizada usando a técnica ELISA a partir de amostras de esfregaços vaginais coletadas nos dias 0, 7 e 28 em Hanói OH apenas. Os testes são realizados no Departamento de Microbiologia, Fungos e Parasitologia, Hospital Central de Dermatologia ou Centro de Pesquisa Spobio, Anabio R&D.
• Mudanças no microbioma usando análise de metagenoma 16S rRNA: Esta análise de microbioma foi conduzida para amostras representativas de esfregaços vaginais de pacientes de cada grupo de pesquisa (esperado 10-15 pacientes/grupo) usando sequenciamento de nova geração (NGS) em um sistema Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, EUA) com configuração de execução de 2 × 250 pb. O ensaio foi realizado no dia 0 e em um ou mais dos seguintes pontos de tempo, dias 7 e 28, para amostras coletadas em Hanoi OGH e Bac Ninh CDC.