Effekter av LiveSpo X-SECRET i støttende behandling av vaginitis

Vaginitt er en sykdom relatert til kvinners forplantningskanal inkludert bakteriell vaginose (bakteriell vaginose - BV), seksuelt overførbare sykdommer (kjønnssykdommer)... Dette anses som en vanlig infeksjon i verden, spesielt i utviklingsland og underutviklede tropiske land, med opptil 3/4 av befolkningen som lider av kjønnssykdommer, hovedsakelig i den reproduktive aldersgruppen 15-24 år. Det er mange mikrobielle midler som forårsaker gynekologiske sykdommer, inkludert bakterier, virus, sopp, flagellater... Bakteriell vaginose er en endogen vaginal infeksjon forårsaket av mer enn 30 forskjellige arter av bakterier, hovedsakelig anaerobe bakterier som Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... Vaginitt er ganske vanlig hos vietnamesiske kvinner. Dette er et problem i offentlig helsevesen fordi seksuelt overførbare sykdommer ofte har milde eller ingen symptomer, så de er enkle å ignorere. Dessuten kan bruk av bredspektrede antibiotika føre til bivirkninger som tap av appetitt, tretthet og seksuelle problemer, mens gjentatte behandlinger kan føre til forekomst av antibiotikaresistens, utgjør en betydelig utfordring for behandlingen av BV og kjønnssykdommer over hele verden. Sykdommen er vanligvis forårsaket av erstatning av Lactobacillus (en gruppe nyttige bakterier i skjeden) som fører til en overvekst av anaerobe bakterier. Probiotika er mikroorganismer som er gunstige for menneskers helse når de konsumeres i tilstrekkelige mengder, og spiller en viktig rolle i å opprettholde balansen i kroppens mikroflora, spesielt i tarmen og skjeden. Studier har funnet at probiotika kan bidra til å redusere forekomsten og alvorlighetsgraden av vaginale infeksjoner, inkludert bakteriell vaginose og soppinfeksjoner. For tiden studeres probiotika formulert som orale kapsler eller gynekologiske suppositorier som inneholder Bifidobacterium- eller Lactobacillus-stammer som en potensiell tilleggsterapi for behandling av vaginale infeksjoner. Imidlertid har disse stammene lav levedyktighet og er følsomme for temperatur, fuktighet og pH, noe som gjør konservering vanskelig. Effektiviteten deres avhenger derfor av de spesifikke stammene som brukes og dosen som kreves for å oppnå høye konsentrasjoner i vaginalkanalen. Nyttige bakterier av Bacillus-slekten har blitt studert i lang tid for deres sikkerhet. For eksempel er Bacillus subtilis, B. clausii og B. coagulans ofte aerobe eller fakultative anaerobe bakterier, i stand til å vokse raskt og danne sporer som er motstandsdyktige mot tøffe forhold som mangel på næring, mangel på oksygen, høye temperaturer og til og med antibiotika. I tillegg er disse bakteriene spesielt godt egnet for bruk som direkte og in-situ probiotiske vaginale sprayer siden de også kan skille ut antibakterielle forbindelser, melkesyre, H2O2, og aktivere slimhinnelaget i tarmens immunsystem. Den vaginale sprayende probiotikaterapien hjelper til med å støtte behandling og forebygging av seksuelt overførbare patogener, og gir en lovende støtte/alternativ løsning til tradisjonell antibiotikabehandling.

Målet med denne studien er å vurdere om vaginal-spraying av Bacillus probiotiske sporer kan redusere kliniske symptomer og forbedre ulike subkliniske markører for vaginitispasienter.

Metoder: Prospektiv design av randomisert, dobbeltblindet og kontrollert klinisk studie. Eksperimentet ble utført på kvinner med vaginitt og de oppnådde dataene ble sammenlignet enten mellom 2 grupper eller mellom to til fire tidspunkter for behandlingsperioden for samme gruppe. Kontrollgruppen ble påført rutinebehandlingen på sykehuset kombinert med spraying av 0,9 % NaCl fysiologisk saltvann inn i skjeden 3 ganger/gang x 2 ganger/dag kontinuerlig i 28 dager. Testgruppen ble påført rutinebehandling på sykehuset kombinert med spraying av LiveSpo X-SECRET inn i skjeden 3 ganger/gang x 2 ganger/dag kontinuerlig i 28 dager.

Prøver tas på dag 0 og ett eller flere av følgende tidspunkt: dag 3, 7, 14 og/eller 28, avhengig av hver forskningsenhets evne til å kontrollere prøvetakingen med bestemte intervaller under behandlingsprosedyren. I detalj ble prøver tatt på dag 0, 7 og 28 ved Hanoi OGH; og på dag 0, 3, 7, 14, 28 på Bac Ninh CDC. Subkliniske indikatorer relatert til vaginitt ble overvåket på forskjellige tidspunkter, inkludert:

• Bakterielle fargetester: Disse testene ble utført rutinemessig ved avdelingene for mikrobiologi, både ved Hanoi OGH og Bac Ninh CDC, på dag 0 og dag 28.
• Sanntids PCR-analyse for å oppdage 9 hovedmikroorganismer som forårsaker betennelse i vaginale vattpinneprøver: Gardnerella vaginalis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (CT); Candida albicans (CA); Trichomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); Humant alphaherpesvirus type 1 (HSV-1); Humant alphaherpesvirus type 2 (HSV-2). Denne analysen ble utført ved Institutt for mikrobiologi, sopp og parasitologitesting, Central Dermatology Hospital, ved bruk av kommersielle sett eller et "in-house" sett som nylig ble utviklet og publisert internasjonalt av forskerteamet (Bui et al. ., 2023 ). Analysen ble utført på dag 0, 7 og 28 for prøver samlet ved Hanoi OGH; og på dag 0, 3, 7, 14, 28 for prøver samlet ved Bac Ninh CDC.
• Sanntids PCR-analyse for å påvise Bacillus sp. inkludert B. subtilis, B. clausii og B. coagulans i vaginale vattpinneprøver. Dette eksperimentet ble utført ved Spobio Research Center, Anabio R&D. Analysen ble utført på dag 0, 7 og 28 for prøver samlet ved Hanoi OGH; og på dag 0, 3, 7, 14, 28 for prøver samlet ved Bac Ninh CDC.
• Analyse av immunindeks inkludert 5 typer cytokiner IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α og IgA ble utført ved bruk av ELISA-teknikk fra vaginale vattpinneprøver samlet på dag 0, 7 og 28 i Hanoi Kun OGH. Testene utføres ved Institutt for mikrobiologi, sopp og parasitologitesting, Central Dermatology Hospital eller Spobio Research Center, Anabio R&D.
• Endringer i mikrobiom ved bruk av 16S rRNA-metagenomanalyse: Denne mikrobiomanalysen ble utført for representative vaginale vattpinneprøver fra pasienter fra hver forskningsgruppe (forventet 10-15 pasienter/gruppe) ved bruk av ny generasjons sekvensering (NGS) på et Illumina MiSeq-system (Illumina, San) Diego, CA, USA) med en 2 × 250 bp kjørekonfigurasjon. Analysen ble utført på dag 0 og ett eller flere av de følgende tidspunktene dag 7 og 28 for prøver samlet ved både Hanoi OGH og Bac Ninh CDC.