Effecten van LiveSpo X-SECRET bij de ondersteunende behandeling van vaginitis

Vaginitis is een ziekte die verband houdt met het voortplantingsstelsel van vrouwen, waaronder bacteriële vaginose (Bacteriële vaginose - BV), seksueel overdraagbare aandoeningen (Seksueel Overdraagbare Ziekten - SOA's)... Er wordt aangenomen dat dit een veel voorkomende infectie is in de wereld, vooral in ontwikkelingslanden en onderontwikkelde tropische landen, waarbij tot driekwart van de bevolking lijdt aan SOA's, voornamelijk in de reproductieve leeftijdsgroep van 15-24 jaar. Er zijn veel microbiële agentia die gynaecologische ziekten veroorzaken, waaronder bacteriën, virussen, schimmels, flagellaten... Bacteriële vaginose is een endogene vaginale infectie veroorzaakt door meer dan 30 verschillende soorten bacteriën, voornamelijk voornamelijk anaërobe bacteriën zoals Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... Vaginitis komt vrij vaak voor bij Vietnamese vrouwen. Dit is een punt van grote zorg in de publieke gezondheidszorg, omdat seksueel overdraagbare aandoeningen vaak milde of geen symptomen hebben en dus gemakkelijk te negeren zijn. Bovendien kan het gebruik van breedspectrumantibiotica leiden tot bijwerkingen zoals verlies van eetlust, vermoeidheid en seksuele problemen, terwijl herhaalde behandelingen kunnen leiden tot het optreden van antibioticaresistentie, wat een aanzienlijke uitdaging vormt voor de behandeling van BV en SOA's wereldwijd. De ziekte wordt normaal gesproken veroorzaakt door de vervanging van Lactobacillus (een groep nuttige bacteriën in de vagina), wat leidt tot een overmatige groei van anaerobe bacteriën. Probiotica zijn micro-organismen die gunstig zijn voor de menselijke gezondheid als ze in voldoende hoeveelheden worden geconsumeerd. Ze spelen een belangrijke rol bij het handhaven van de balans van de microflora van het lichaam, vooral in de darmen en de vagina. Uit onderzoek is gebleken dat probiotica de incidentie en ernst van vaginale infecties, waaronder bacteriële vaginose en schimmelinfecties, kunnen helpen verminderen. Momenteel worden probiotica, geformuleerd als orale capsules of gynaecologische zetpillen die Bifidobacterium- of Lactobacillus-stammen bevatten, bestudeerd als een potentiële aanvullende therapie voor de behandeling van vaginale infecties. Deze stammen hebben echter een lage levensvatbaarheid en zijn gevoelig voor temperatuur, vochtigheid en pH, waardoor conservering moeilijk wordt. Hun effectiviteit hangt daarom af van de specifieke gebruikte stammen en de dosering die nodig is om hoge concentraties in het vaginale kanaal te bereiken. Gunstige bacteriën van het Bacillus-geslacht worden al lange tijd onderzocht op hun veiligheid. Bacillus subtilis, B. clausii en B. coagulans zijn bijvoorbeeld vaak aerobe of facultatieve anaerobe bacteriën, die snel kunnen groeien en sporen kunnen vormen die bestand zijn tegen zware omstandigheden zoals gebrek aan voeding, gebrek aan zuurstof, hoge temperaturen en zelfs antibiotica. Bovendien zijn deze bacteriën bijzonder geschikt voor gebruik als directe en in-situ probiotische vaginale sprays, omdat ze ook antibacteriële stoffen, melkzuur en H2O2 kunnen afscheiden en de slijmvlieslaag van het darmimmuunsysteem kunnen activeren. De probiotische therapie met vaginale spray ondersteunt de behandeling en preventie van seksueel overdraagbare ziekteverwekkers en biedt een veelbelovende ondersteuning/alternatieve oplossing voor traditionele antibioticatherapie.

Het doel van deze studie is om te beoordelen of het vaginaal spuiten van Bacillus probiotische sporen de klinische symptomen kan verminderen en verschillende subklinische markers van vaginitispatiënten kan verbeteren.

Methoden: Prospectief ontwerp van gerandomiseerde, dubbelblinde en gecontroleerde klinische onderzoeken. Het experiment werd uitgevoerd bij vrouwen met vaginitis en de verkregen gegevens werden vergeleken tussen twee groepen of tussen twee tot vier tijdstippen van de behandelingsperiode van dezelfde groep. De controlegroep kreeg de routinebehandeling in het ziekenhuis gecombineerd met het continu sproeien van 0,9% NaCl fysiologische zoutoplossing in de vagina, 3 keer per keer x 2 keer per dag gedurende 28 dagen. De testgroep kreeg een routinebehandeling in het ziekenhuis gecombineerd met het continu spuiten van LiveSpo X-SECRET in de vagina, 3 keer per keer x 2 keer per dag gedurende 28 dagen.

Er worden monsters genomen op dag 0 en op een of meer van de volgende tijdstippen: dag 3, 7, 14 en/of 28, afhankelijk van het vermogen van elke onderzoekseenheid om de monstername met bepaalde tussenpozen tijdens de behandelingsprocedure te controleren. In details werden monsters genomen op dag 0, 7 en 28 in Hanoi OGH; en op dag 0, 3, 7, 14, 28 bij Bac Ninh CDC. Subklinische indicatoren gerelateerd aan vaginitis werden op verschillende tijdstippen gevolgd, waaronder:

• Bacteriële kleuringstests: Deze tests werden routinematig uitgevoerd bij de afdelingen Microbiologie, zowel in Hanoi OGH als Bac Ninh CDC, op dag 0 en dag 28.
• Real-time PCR-test om 9 belangrijke micro-organismen te detecteren die ontstekingen veroorzaken in vaginale uitstrijkjes: Gardnerella vaginalis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (CT); Candida albicans (CA); Trichomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); Humaan alfaherpesvirus type 1 (HSV-1); Humaan alfaherpesvirus type 2 (HSV-2). Deze test werd uitgevoerd bij de afdeling Microbiologie, Schimmels en Parasitologietesten van het Centraal Dermatologieziekenhuis, met behulp van commerciële kits of een "in-house" kit die onlangs door het onderzoeksteam is ontwikkeld en internationaal gepubliceerd (Bui et al., 2023). ). De test werd uitgevoerd op dag 0, 7 en 28 voor monsters verzameld bij Hanoi OGH; en op dag 0, 3, 7, 14, 28 voor monsters verzameld bij Bac Ninh CDC.
• Real-time PCR-test om Bacillus sp. te detecteren. waaronder B. subtilis, B. clausii en B. coagulans in vaginale uitstrijkjes. Dit experiment werd uitgevoerd in het Spobio Research Center, Anabio R&D. De test werd uitgevoerd op dag 0, 7 en 28 voor monsters verzameld bij Hanoi OGH; en op dag 0, 3, 7, 14, 28 voor monsters verzameld bij Bac Ninh CDC.
• Analyse van de immuunindex inclusief 5 typen cytokines IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α en IgA werd uitgevoerd met behulp van ELISA-techniek op basis van vaginale uitstrijkjes verzameld op dag 0, 7 en 28 in Hanoi Alleen OGH. De tests worden uitgevoerd bij de afdeling Microbiologie, Schimmels en Parasitologietesten, het Centraal Dermatologieziekenhuis of het Spobio Onderzoekscentrum, Anabio R&D.
• Veranderingen in het microbioom met behulp van 16S rRNA-metagenoomanalyse: deze microbioomanalyse werd uitgevoerd voor representatieve vaginale uitstrijkjes van patiënten van elke onderzoeksgroep (naar verwachting 10-15 patiënten/groep) met behulp van nieuwe generatie sequencing (NGS) op een Illumina MiSeq-systeem (Illumina, San Diego, CA, VS) met een runconfiguratie van 2 x 250 bp. De test werd uitgevoerd op dag 0 en op een of meer van de volgende tijdstippen, dag 7 en 28, voor monsters die waren verzameld bij zowel Hanoi OGH als Bac Ninh CDC.