Effets de LiveSpo X-SECRET dans le traitement de soutien de la vaginite

La vaginite est une maladie liée à l'appareil reproducteur de la femme comprenant la vaginose bactérienne (Vaginose bactérienne - BV), les maladies sexuellement transmissibles (Maladies sexuellement transmissibles - MST)... Il s'agit d'une infection courante dans le monde, en particulier dans les pays tropicaux en développement et sous-développés, où jusqu'à 3/4 de la population souffre de MST, principalement dans la tranche d'âge reproductif de 15 à 24 ans. Il existe de nombreux agents microbiens qui provoquent des maladies gynécologiques, notamment des bactéries, des virus, des champignons, des flagellés... La vaginose bactérienne est une infection vaginale endogène provoquée par plus de 30 espèces différentes de bactéries, principalement des bactéries anaérobies comme Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... La vaginite est assez fréquente chez les femmes vietnamiennes. Il s’agit d’une question très préoccupante dans le domaine des soins de santé publique, car les maladies sexuellement transmissibles présentent souvent des symptômes légers, voire inexistants, et sont donc faciles à ignorer. En outre, l’utilisation d’antibiotiques à large spectre peut entraîner des effets secondaires tels qu’une perte d’appétit, de la fatigue et des problèmes sexuels, tandis que des traitements répétés peuvent conduire à l’apparition d’une résistance aux antibiotiques, ce qui constitue un défi important pour le traitement de la VB et des MST dans le monde entier. La maladie est normalement provoquée par le remplacement des Lactobacilles (un groupe de bactéries bénéfiques du vagin) conduisant à une prolifération de bactéries anaérobies. Les probiotiques sont des micro-organismes bénéfiques pour la santé humaine lorsqu'ils sont consommés en quantité suffisante, jouant un rôle important dans le maintien de l'équilibre de la microflore de l'organisme, notamment au niveau des intestins et du vagin. Des études ont montré que les probiotiques peuvent aider à réduire l’incidence et la gravité des infections vaginales, notamment la vaginose bactérienne et les infections à levures. Actuellement, des probiotiques formulés sous forme de capsules orales ou de suppositoires gynécologiques contenant des souches de Bifidobacterium ou de Lactobacillus sont étudiés comme traitement d'appoint potentiel pour le traitement des infections vaginales. Cependant, ces souches ont une faible viabilité et sont sensibles à la température, à l’humidité et au pH, ce qui rend leur conservation difficile. Leur efficacité dépend donc des souches spécifiques utilisées et du dosage nécessaire pour atteindre des concentrations élevées dans le tractus vaginal. Les bactéries bénéfiques du genre Bacillus sont étudiées depuis longtemps pour leur sécurité. Par exemple, Bacillus subtilis, B. clausii et B. coagulans sont souvent des bactéries aérobies ou anaérobies facultatives, capables de se développer rapidement et de former des spores résistantes à des conditions difficiles telles que le manque de nutrition, le manque d'oxygène, les températures élevées et même les antibiotiques. De plus, ces bactéries sont particulièrement adaptées à une utilisation en spray vaginal probiotique direct et in situ, car elles peuvent également sécréter des composés antibactériens, de l'acide lactique, du H2O2 et activer la couche muqueuse du système immunitaire intestinal. La thérapie probiotique par pulvérisation vaginale aide à soutenir le traitement et la prévention des agents pathogènes sexuellement transmissibles, offrant ainsi un soutien/une solution alternative prometteuse à l’antibiothérapie traditionnelle.

Le but de cette étude est d'évaluer si la pulvérisation vaginale des spores probiotiques de Bacillus peut réduire les symptômes cliniques et améliorer divers marqueurs sous-cliniques des patientes atteintes de vaginite.

Méthodes : Conception prospective d'un essai clinique randomisé, en double aveugle et contrôlé. L'expérience a été menée sur des femmes atteintes de vaginite et les données obtenues ont été comparées soit entre 2 groupes, soit entre deux à quatre moments de la période de traitement du même groupe. Le groupe témoin a reçu le traitement de routine à l'hôpital combiné à la pulvérisation d'une solution saline physiologique NaCl à 0,9 % dans le vagin 3 fois/heure x 2 fois/jour en continu pendant 28 jours. Le groupe test a reçu un traitement de routine à l'hôpital associé à la pulvérisation de LiveSpo X-SECRET dans le vagin 3 fois/heure x 2 fois/jour en continu pendant 28 jours.

Les échantillons sont prélevés au jour 0 et à un ou plusieurs des moments suivants : jours 3, 7, 14 et/ou 28, en fonction de la capacité de chaque unité de recherche à contrôler l'échantillonnage à certains intervalles pendant la procédure de traitement. En détail, des échantillons ont été prélevés aux jours 0, 7 et 28 à l'OGH de Hanoi ; et aux jours 0, 3, 7, 14, 28 au CDC de Bac Ninh. Les indicateurs subcliniques liés à la vaginite ont été surveillés à différents moments, notamment :

• Tests de coloration bactérienne : Ces tests ont été effectués en routine dans les départements de microbiologie de l'OGH de Hanoi et du CDC de Bac Ninh, aux jours 0 et 28.
• Test PCR en temps réel pour détecter 9 principaux micro-organismes responsables de l'inflammation dans des échantillons vaginaux sur écouvillon : Gardnerella vaginalis (GV) ; Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (CT); Candida albicans (CA); Trichomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasme génital (MG); Alphaherpèsvirus humain de type 1 (HSV-1) ; Alphaherpèsvirus humain de type 2 (HSV-2). Ce test a été réalisé au Département de tests de microbiologie, de champignons et de parasitologie de l'Hôpital central de dermatologie, à l'aide de kits commerciaux ou d'un kit « interne » récemment développé et publié au niveau international par l'équipe de recherche (Bui et al. ., 2023 ). Le test a été effectué aux jours 0, 7 et 28 pour les échantillons collectés à l'OGH de Hanoi ; et aux jours 0, 3, 7, 14, 28 pour les échantillons collectés au CDC de Bac Ninh.
• Test PCR en temps réel pour détecter Bacillus sp. y compris B. subtilis, B. clausii et B. coagulans dans des échantillons vaginaux sur écouvillon. Cette expérience a été réalisée au Centre de Recherche Spobio, Anabio R&D. Le test a été effectué aux jours 0, 7 et 28 pour les échantillons collectés à l'OGH de Hanoi ; et aux jours 0, 3, 7, 14, 28 pour les échantillons collectés au CDC de Bac Ninh.
• L'analyse de l'indice immunitaire comprenant 5 types de cytokines IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α et IgA a été réalisée à l'aide de la technique ELISA à partir d'échantillons vaginaux prélevés aux jours 0, 7 et 28 à Hanoï. OGH uniquement. Les tests sont effectués au Département d'analyses de microbiologie, de champignons et de parasitologie, de l'Hôpital central de dermatologie ou du Centre de recherche Spobio, Anabio R&D.
• Modifications du microbiome à l'aide de l'analyse du métagénome de l'ARNr 16S : Cette analyse du microbiome a été réalisée sur des échantillons vaginaux représentatifs de patients de chaque groupe de recherche (attendus 10 à 15 patients/groupe) à l'aide du séquençage de nouvelle génération (NGS) sur un système Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) avec une configuration d'exécution de 2 × 250 pb. Le test a été effectué au jour 0 et à un ou plusieurs des moments suivants, les jours 7 et 28, pour les échantillons collectés à la fois à l'OGH de Hanoi et au CDC de Bac Ninh.