Wpływ LiveSpo X-SECRET we wspomagającym leczeniu zapalenia pochwy

Zapalenie pochwy to choroba związana z układem rozrodczym kobiet, obejmująca bakteryjne zapalenie pochwy (bakteryjne zapalenie pochwy – BV), choroby przenoszone drogą płciową (choroby przenoszone drogą płciową – STD)… Uważa się, że jest to powszechna infekcja na świecie, szczególnie w rozwijających się i słabo rozwiniętych krajach tropikalnych, gdzie aż 3/4 populacji cierpi na choroby przenoszone drogą płciową, głównie w grupie wieku reprodukcyjnego 15-24 lata. Istnieje wiele czynników drobnoustrojowych powodujących choroby ginekologiczne, w tym bakterie, wirusy, grzyby, wiciowce... Bakteryjne zapalenie pochwy to endogenna infekcja pochwy wywoływana przez ponad 30 różnych gatunków bakterii, głównie bakterie beztlenowe, takie jak Gardnerella pochwylis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... Zapalenie pochwy jest dość powszechne u wietnamskich kobiet. Jest to kwestia budząca duże zainteresowanie w publicznej służbie zdrowia, ponieważ choroby przenoszone drogą płciową często mają łagodne objawy lub nie dają ich wcale, więc łatwo je zignorować. Poza tym stosowanie antybiotyków o szerokim spektrum działania może prowadzić do skutków ubocznych, takich jak utrata apetytu, zmęczenie i problemy seksualne, podczas gdy powtarzane leczenie może prowadzić do pojawienia się antybiotykooporności, co stanowi istotne wyzwanie w leczeniu BV i chorób przenoszonych drogą płciową na całym świecie. Choroba jest zwykle spowodowana zastąpieniem Lactobacillus (grupy pożytecznych bakterii pochwy), co prowadzi do nadmiernego wzrostu bakterii beztlenowych. Probiotyki to mikroorganizmy, które spożywane w odpowiednich ilościach wywierają korzystny wpływ na zdrowie człowieka, odgrywając ważną rolę w utrzymaniu równowagi mikroflory organizmu, szczególnie w jelitach i pochwie. Badania wykazały, że probiotyki mogą pomóc zmniejszyć częstość występowania i nasilenie infekcji pochwy, w tym bakteryjnego zapalenia pochwy i infekcji drożdżakowych. Obecnie bada się probiotyki w postaci kapsułek doustnych lub czopków ginekologicznych zawierające szczepy Bifidobacterium lub Lactobacillus jako potencjalną terapię wspomagającą w leczeniu infekcji pochwy. Jednakże szczepy te mają niską żywotność i są wrażliwe na temperaturę, wilgotność i pH, co utrudnia konserwację. Ich skuteczność zależy zatem od konkretnych zastosowanych szczepów i dawki wymaganej do osiągnięcia wysokiego stężenia w przewodzie pochwowym. Pożyteczne bakterie z rodzaju Bacillus badano od dawna pod kątem ich bezpieczeństwa. Na przykład Bacillus subtilis, B. clausii i B. coagulans to często bakterie tlenowe lub fakultatywnie beztlenowe, zdolne do szybkiego wzrostu i tworzenia zarodników odpornych na trudne warunki, takie jak brak pożywienia, brak tlenu, wysokie temperatury, a nawet antybiotyki. Ponadto bakterie te szczególnie dobrze nadają się do stosowania jako bezpośrednie i probiotyczne spraye dopochwowe in situ, ponieważ mogą również wydzielać związki przeciwbakteryjne, kwas mlekowy, H2O2 i aktywować warstwę śluzową jelitowego układu odpornościowego. Terapia probiotyczna w postaci sprayu do pochwy pomaga wspierać leczenie i zapobieganie patogenom przenoszonym drogą płciową, zapewniając obiecujące wsparcie/alternatywne rozwiązanie dla tradycyjnej antybiotykoterapii.

Celem tego badania jest ocena, czy zarodniki probiotyczne Bacillus podawane dopochwowo mogą zmniejszyć objawy kliniczne i poprawić różne subkliniczne wskaźniki u pacjentek z zapaleniem pochwy.

Metody: Prospektywny projekt randomizowanego, podwójnie ślepego i kontrolowanego badania klinicznego. Eksperyment przeprowadzono na kobietach chorych na zapalenie pochwy, a uzyskane dane porównano pomiędzy 2 grupami lub pomiędzy 2-4 punktami czasowymi okresu leczenia tej samej grupy. Grupie kontrolnej poddano rutynowe leczenie szpitalne połączone z wstrzyknięciem do pochwy 0,9% roztworu soli fizjologicznej NaCl 3 razy x 2 razy dziennie w sposób ciągły przez 28 dni. Grupę badaną poddano rutynowemu leczeniu szpitalnemu połączonemu ze wstrzykiwaniem do pochwy LiveSpo X-SECRET 3 razy x 2 razy dziennie w sposób ciągły przez 28 dni.

Próbki pobiera się w dniu 0 oraz w jednym lub większej liczbie następujących punktów czasowych: dzień 3, 7, 14 i/lub 28, w zależności od zdolności każdej jednostki badawczej do kontrolowania pobierania próbek w określonych odstępach czasu podczas procedury leczenia. Szczegółowo, próbki pobrano w dniu 0, 7 i 28 w Hanoi OGH; oraz w dniach 0, 3, 7, 14, 28 w Bac Ninh CDC. Subkliniczne wskaźniki związane z zapaleniem pochwy monitorowano w różnych punktach czasowych, w tym:

• Testy barwienia bakterii: Testy te przeprowadzano rutynowo na wydziałach mikrobiologii, zarówno w Hanoi OGH, jak i Bac Ninh CDC, w dniu 0 i dniu 28.
• Test PCR w czasie rzeczywistym umożliwiający wykrycie 9 głównych mikroorganizmów powodujących stan zapalny w wymazach z pochwy: Gardnerella pochwylis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (CT); Candida albicans (Kalifornia); Trichomonas pochwy (telewizja); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); Ludzki alfaherpeswirus typu 1 (HSV-1); Ludzki alfaherpeswirus typu 2 (HSV-2). Test ten przeprowadzono na Oddziale Mikrobiologii, Grzybów i Parazytologii Centralnego Szpitala Dermatologicznego, przy użyciu zestawów komercyjnych lub zestawu „własnego”, który został niedawno opracowany i opublikowany na arenie międzynarodowej przez zespół badawczy (Bui i in., 2023). ). Test przeprowadzono w dniu 0, 7 i 28 dla próbek pobranych w Hanoi OGH; oraz w dniach 0, 3, 7, 14, 28 dla próbek pobranych w Bac Ninh CDC.
• Test PCR w czasie rzeczywistym do wykrywania Bacillus sp. w tym B. subtilis, B. clausii i B. coagulans w próbkach wymazu z pochwy. Eksperyment ten przeprowadzono w Centrum Badawczym Spobio, Anabio R&D. Test przeprowadzono w dniu 0, 7 i 28 dla próbek pobranych w Hanoi OGH; oraz w dniach 0, 3, 7, 14, 28 dla próbek pobranych w Bac Ninh CDC.
• Analizę wskaźnika odporności obejmującego 5 typów cytokin: IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α i IgA przeprowadzono techniką ELISA na podstawie próbek wymazu z pochwy pobranych w dniach 0, 7 i 28 w Hanoi Tylko OGH. Badania przeprowadzane są w Zakładzie Badań Mikrobiologii, Grzybów i Parazytologii Centralnego Szpitala Dermatologicznego lub w Centrum Badawczym Spobio, Anabio R&D.
• Zmiany w mikrobiomie przy użyciu analizy metagenomu 16S rRNA: Tę analizę mikrobiomu przeprowadzono dla reprezentatywnych próbek wymazu z pochwy od pacjentek z każdej grupy badawczej (oczekiwane 10-15 pacjentek w grupie) przy użyciu sekwencjonowania nowej generacji (NGS) w systemie Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, Kalifornia, USA) z konfiguracją przebiegu 2 × 250 pz. Test przeprowadzono w dniu 0 oraz w jednym lub większej liczbie następujących punktów czasowych w dniach 7 i 28 dla próbek pobranych zarówno w Hanoi OGH, jak i Bac Ninh CDC.