Prediktivní role proteomiky v reakci krevního tlaku u hypertoniků podstupujících renální denervaci. (PREDICT-RDN)

Hypertenze (HTN) je nejrozšířenějším ovlivnitelným rizikovým faktorem spojeným s kardiovaskulární morbiditou a mortalitou, přičemž její prevalence celosvětově stoupá. Navzdory dostupnosti bezpečné a účinné antihypertenzní medikace se u velké části pacientů nepodaří dosáhnout kontroly krevního tlaku (TK) na doporučené cíle. Současné poznatky jsou takové, že hyperaktivita sympatického nervového systému přispívá k iniciaci, udržení a progresi HTN.

Renální denervace (RDN) je minimálně invazivní katetrizační metoda určená k narušení renální sympatické ervace pomocí různých ablačních technik, zatímco je nejrozsáhleji zkoumanou přístrojovou terapií pro ΗΤΝ. Současné endovaskulární katétrové systémy vstupují do renálních tepen a dodávají radiofrekvenční energii, ultrazvukovou energii nebo používají neurotoxická činidla, jako je alkohol, což vede k destrukci periarteriálních aferentních a eferentních renálních nervů. RDN zažila vzestupy a pády jako potenciální možnost léčby HTN v posledních letech výzkumu. Počáteční otevřené klinické studie prokazující koncepci přinesly slibné výsledky o účinnosti RDN při snižování TK, ačkoli první randomizovaná falešně kontrolovaná studie nepotvrdila předchozí povzbudivé výsledky. Nejnovější randomizované, falešně kontrolované studie s vylepšeným designem a metodologií však prokázaly významné snížení krevního tlaku v ordinaci (OBP) a ambulantního krevního tlaku (ABP) u pacientů podstupujících RDN. Navzdory prokázané účinnosti a bezpečnosti RDN postupu nedochází u přibližně 30 % až 40 % pacientů ke klinicky významnému snížení TK, a to ani v posledních optimálně navržených klinických studiích. To může být způsobeno patofyziologickým substrátem u těchto pacientů, zatímco identifikace biomarkeru odpovědi BP by mohla vést k lepšímu výběru pacientů s lepší odpovědí.

Dynamická role proteinů pro podporu života je dokumentována již od počátečních fází biologického výzkumu. Proteom lze definovat jako celkový obsah proteinů v biologickém systému, jako je buňka, tkáň, biologická tekutina atd. Proteomika je rozsáhlá studie proteomu, stejně jako identifikace a kvantifikace těchto proteinů. Existuje několik základních kroků proteomické analýzy: odběr vzorku, extrakce proteinu, separace proteinu, stanovení sekvence proteinu a identifikace proteinu bioinformatickými technikami v referenčních databázích. Techniky založené na chromatografii se používají pro extrakci proteinů a techniky dvourozměrné elektroforézy s vysokým rozlišením pro separaci proteinů, zatímco analýza založená na hmotnostní spektrometrii (MS) je široce používána pro stanovení sekvence proteinů. Proteomická analýza se používá v různých výzkumných prostředích při detekci diagnostických biomarkerů a zdůraznění mechanismů patogenity, změny vzorců exprese v reakci na různé signály nebo interpretaci funkčních proteinových drah u různých onemocnění. Konečným cílem proteomiky je lépe porozumět molekulární složitosti a zároveň vytvořit diagnostické a terapeutické algoritmy zdravotní péče pro prevenci a léčbu nemocí.

Α. Cíl studie:

Hlavním účelem této studie je prozkoumat potenciální prediktivní roli proteomiky moči v odpovědi BP pacientů podstupujících RDN. Tato hypotéza může vést ke vzniku biomarkerů v moči hypertoniků s cílem optimálně vybrat ty, kteří podstoupí RDN výkon.

B. Návrh studie:

Jedná se o prospektivní, neintervenční, observační studii zahrnující celkem 100 pacientů s nekontrolovanou hypertenzí, léčených i neléčených, ve věku 18–80 let, podstupujících RDN v rámci randomizovaných klinických studií. Při vstupním hodnocení bude diagnóza HTN potvrzena měřením OBP a ABP, přičemž všichni pacienti musí být neléčení nebo léčení maximálně 3 antihypertenzivy (alespoň na 50 % maximální dávky). Pacienti se středně těžkým až těžkým chronickým onemocněním ledvin (eGFR < 45 ml/min), abnormalitami renálních tepen, diabetes mellitus I. typu a sekundární HTN budou vyloučeni. Zapsané případy budou mít následnou návštěvu 3 měsíce po RDN. Údaje budou shromažďovány pomocí specifického formuláře (CRF). Patří mezi ně demografické a somatometrické údaje, anamnéza, měření OBP, měření ABP, laboratorní testy (odhad renálních funkcí, sérového draslíku, sérového sodíku a hladiny glukózy v séru). Všichni pacienti musí podepsat informovaný souhlas s účastí ve studii. Etický souhlas byl získán od rady etické komise nemocnice.

C. Metody:

Návštěva na obrazovce: Během základní návštěvy bude TK hodnocen pomocí měření OBP a ABP. Do studie budou zařazeni pacienti se systolickým OBP ≥140 mmHg a systolickým ABP ≥130 mmHg. Profil pacienta bude zahrnovat sérové ​​testy (glukóza, urea, kreatinin, sodík, draslík) a také ultrazvuk ledvin za účelem vyloučení anatomických nebo strukturálních abnormalit ledvin. Sekundární HTN budou vyloučeny podle směrnic HTN. Vzorky moči budou odebrány všem pacientům a uloženy v mrazáku až do jejich odeslání do Proteomics Research Unit k analýze.

Renální denervace: Procedura RDN bude provedena 1 až 2 týdny po screeningové návštěvě zkušeného intervenčního kardiologa s následnou 1denní hospitalizací.

Následná návštěva: Následná návštěva bude naplánována 3 měsíce po výkonu RDN. Budou odebírána nová měření OBP a ABP a sérové ​​testy (glukóza, urea, kreatinin, sodík, draslík). Sběr dat bude doplněn statistickou analýzou. Pacienti budou kategorizováni jako reagující nebo nereagující podle rozdílů OBP nebo/a ABP mezi základní návštěvou a 3měsíční následnou návštěvou. Snížení systolického ABP o 5 mmHg a snížení systolického OBP o 10 mmHg bude nastaveno jako hraniční hodnoty pro kategorizaci pacientů. V tomto časovém bodě přispějí výsledky proteomických analýz základních vzorků moči k identifikaci významných kvalitativních a kvantitativních rozdílů v proteinech mezi dvěma skupinami pacientů (respondéry a nerespondéry). Informace o identitě, struktuře, funkcích a metabolických drahách specifických proteinů, na kterých se podílejí, budou shromažďovány prostřednictvím biologických databází.

Statistická analýza: Normální rozložení všech dat bude kontrolováno Kolmogorov-Smirnovovým testem. Spojité proměnné budou vyjádřeny jako průměr a směrodatná odchylka (SD), zatímco kategorické proměnné budou uvedeny v procentech (%). Porovnání mezi kategorickými proměnnými bude provedeno pomocí χ2 (Pearsonův chí-kvadrát test). Porovnání mezi spojitými proměnnými s normálním rozdělením bude provedeno pomocí Studentova t-testu pro nepárové vzorky, zatímco srovnání mezi spojitými proměnnými, které sledují nenormální rozdělení, bude provedeno pomocí Mann-Whitney U testu. Korelační analýza bude provedena pomocí Pearsonova Phi koeficientu nebo Spearmanova rho (ρ) na základě rozložení souboru dat. Statisticky významné budou rozdíly s p-hodnotou <0,05. Analýza všech dat bude provedena softwarem SPSS 26 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA).

D. Odhadovaný výsledek výzkumu:

Očekává se, že výsledky studie určí prediktivní roli proteomiky moči v reakci krevního tlaku u hypertoniků podstupujících renální denervaci.