Proteomiikan ennakoiva rooli verenpainevasteessa munuaisten denervaatioon saavien hypertensiivisten potilaiden hoidossa. (PREDICT-RDN)

Hypertensio (HTN) on yleisin muunnettavissa oleva riskitekijä, joka liittyy sydän- ja verisuonisairauksiin ja -kuolleisuuteen, ja sen esiintyvyys on kasvussa maailmanlaajuisesti. Turvallisten ja tehokkaiden verenpainetta alentavien lääkkeiden saatavuudesta huolimatta suurella osalla potilaista verenpaineen (BP) hallintaa ohjesuositusten mukaisesti ei saavuteta. Nykytiedon mukaan sympaattisen hermoston hyperaktiivisuus edistää HTN:n alkamista, ylläpitoa ja etenemistä.

Munuaisten denervaatio (RDN) on minimaalisesti invasiivinen katetripohjainen menetelmä, joka on omistettu häiritsemään munuaisten sympaattista enervaatiota käyttämällä erilaisia ​​ablaatiotekniikoita, ja se on laajimmin tutkittu laitepohjainen ΗΤΝ-hoito. Nykyiset endovaskulaariset katetrijärjestelmät pääsevät munuaisvaltimoihin ja toimittavat radiotaajuista energiaa, ultraäänienergiaa tai käyttävät neurotoksisia aineita, kuten alkoholia, mikä johtaa perivaltimon afferenttien ja efferenttien munuaishermojen tuhoutumiseen. RDN on kokenut ylä- ja alamäkiä mahdollisena hoitovaihtoehtona HTN:lle viime vuosien tutkimusten aikana. Ensimmäiset konseptin todisteet avoimet kliiniset tutkimukset tuottivat lupaavia tuloksia RDN:n tehokkuudesta verenpaineen alentamisessa, vaikka ensimmäinen satunnaistettu valekontrolloitu tutkimus ei vahvistanut aiempia rohkaisevia tuloksia. Kuitenkin viimeisimmät satunnaistetut, valekontrolloidut tutkimukset, joissa on parannettu suunnittelu ja metodologia, osoittivat merkittävää laskua toimistoverenpaineessa (OBP) ja ambulatorisessa verenpaineessa (ABP) potilailla, joille tehdään RDN. Huolimatta RDN-toimenpiteen osoitetusta tehokkuudesta ja turvallisuudesta noin 30–40 prosentilla potilaista ei esiinny kliinisesti merkittävää verenpaineen laskua edes viimeisimmissä optimaalisesti suunnitelluissa kliinisissä tutkimuksissa. Tämä saattaa johtua näiden potilaiden patofysiologisesta substraatista, kun taas verenpainevasteen biomarkkerin tunnistaminen voi johtaa parempaan potilaiden valintaan, joilla on parempi vaste.

Proteiinien dynaaminen rooli elämän tukemisessa on dokumentoitu biologisen tutkimuksen alkuvaiheista lähtien. Proteomi voidaan määritellä biologisen järjestelmän, kuten solun, kudoksen, biologisen nesteen jne. kokonaisproteiinisisällöksi. Proteomiikka on proteomin laajamittaista tutkimusta sekä näiden proteiinien tunnistamista ja kvantifiointia. Proteomisen analyysin perusvaiheita on: näytteenotto, proteiinien erottaminen, proteiinien erottaminen, proteiinisekvenssin määritys ja proteiinin tunnistus bioinformaattisilla tekniikoilla referenssitietokannoista. Kromatografiaan perustuvia tekniikoita käytetään proteiinien uuttamiseen ja korkearesoluutioisia kaksiulotteisia elektroforeesitekniikoita proteiinien erottamiseen, kun taas massaspektrometriaan (MS) perustuvaa analyysiä käytetään laajasti proteiinisekvenssin määrittämiseen. Proteomista analyysiä käytetään erilaisissa tutkimusympäristöissä diagnostisten biomarkkerien havaitsemiseen ja patogeenisuusmekanismien tuomiseen, ilmentymismallien muuttamiseen vasteena erilaisiin signaaleihin tai funktionaalisten proteiinireittien tulkintaan eri sairauksissa. Proteomiikan perimmäisenä tavoitteena on ymmärtää paremmin molekyylien monimutkaisuus ja samalla luoda diagnostisia ja terapeuttisia terveydenhuollon algoritmeja sairauksien ehkäisyyn ja hoitoon.

Α. Tutkimuksen tavoite:

Tämän tutkimuksen päätarkoitus on tutkia virtsan proteomiikan mahdollista ennustavaa roolia RDN-potilaiden verenpainevasteessa. Tämä hypoteesi voi johtaa biomarkkerien ilmaantumiseen verenpainepotilaiden virtsaan, jotta voidaan valita optimaalisesti ne, joille tehdään RDN-menettely.

B. Tutkimuksen suunnittelu:

Tämä on prospektiivinen, ei interventio, havainnointitutkimus, johon osallistui yhteensä 100 potilasta, joilla on hallitsematon verenpainetauti, hoidettu tai hoitamaton, iältään 18–80 vuotta ja joille tehdään RDN satunnaistettujen kliinisten tutkimusten yhteydessä. Perustilan arvioinnin aikana HTN-diagnoosi vahvistetaan OBP- ja ABP-mittauksilla, kun taas kaikkien potilaiden tulee olla hoitamattomia tai niitä tulee hoitaa enintään kolmella verenpainelääkkeellä (vähintään 50 % enimmäisannoksesta). Potilaat, joilla on keskivaikea tai vaikea krooninen munuaissairaus (eGFR < 45 ml/min), munuaisvaltimoiden poikkeavuudet, tyypin I diabetes ja sekundaarinen HTN, suljetaan pois. Ilmoittautuneille tapauksille tehdään seurantakäynti 3 kuukautta RDN:n jälkeen. Tiedot kerätään käyttämällä erityistä lomaketta (CRF). Näitä ovat demografiset ja somatometriset tiedot, aiempi sairaushistoria, OBP-mittaukset, ABP-mittaukset, laboratoriotutkimukset (arvioitu munuaisten toiminta, seerumin kalium-, seerumin natrium- ja seerumin glukoosipitoisuus). Kaikkien potilaiden on allekirjoitettava tietoinen suostumus osallistuakseen tutkimukseen. Eettinen hyväksyntä on saatu sairaalan eettiseltä lautakunnalta.

C. Menetelmät:

Näytön käynti: Perustilan käynnin aikana verenpaine arvioidaan OBP- ja ABP-mittauksilla. Potilaat, joiden systolinen ABP on ≥140 mmHg ja systolinen ABP ≥130 mmHg, otetaan mukaan tutkimukseen. Potilasprofiili sisältää seerumitutkimukset (glukoosi, urea, kreatiniini, natrium, kalium) sekä munuaisten ultraäänitutkimukset munuaisten anatomisten tai rakenteellisten poikkeavuuksien poissulkemiseksi. Toissijainen HTN suljetaan pois HTN-ohjeiden mukaisesti. Kaikilta potilailta otetaan virtsanäytteitä ja säilytetään pakastimessa, kunnes ne lähetetään proteomiikan tutkimusyksikköön analyyseja varten.

Munuaisten denervaatio: RDN-toimenpide suoritetaan 1–2 viikon kuluttua kokeneen interventiokardiologin seulontakäynnistä, jota seuraa 1 päivän sairaalahoito.

Seurantakäynti: Seurantakäynti ajoitetaan 3 kuukautta RDN-toimenpiteen jälkeen. Uudet OBP- ja ABP-mittaukset ja seerumit (glukoosi, urea, kreatiniini, natrium, kalium) kerätään. Tiedonkeruu viimeistellään tilastollisella analyysillä. Potilaat luokitellaan reagoiviksi tai ei-vastettaviksi OBP- ja/tai ABP-erojen perusteella lähtötilanteen ja 3 kuukauden seurantakäynnin välillä. Systolisen ABP:n lasku 5 mmHg ja systolisen ABP:n lasku 10 mmHg asetetaan raja-arvoiksi potilaiden luokittelemiseksi. Tuolloin lähtötilanteen virtsanäytteiden proteomisten analyysien tulokset auttavat tunnistamaan merkittäviä kvalitatiivisia ja kvantitatiivisia eroja proteiineissa kahden potilasryhmän välillä (reagoivat ja ei-reagoivat). Tietoa tiettyjen proteiinien identiteetistä, rakenteesta, toiminnoista ja aineenvaihduntareiteistä, joihin ne osallistuvat, kerätään biologisten tietokantojen kautta.

Tilastollinen analyysi: Kaikkien tietojen normaalijakauma tarkistetaan Kolmogorov-Smirnov-testillä. Jatkuvat muuttujat ilmaistaan ​​keskiarvona ja keskihajonnana (SD), kun taas kategorialliset muuttujat esitetään prosentteina (%). Kategoristen muuttujien vertailu tehdään χ2:lla (Pearsonin khin neliötesti). Normaalijakauman jatkuvien muuttujien vertailu tehdään Studentin t-testillä parittomille näytteille, kun taas ei-normaalijakaumia noudattavien jatkuvien muuttujien vertailut tehdään Mann-Whitney U -testillä. Korrelaatioanalyysi tehdään Pearson Phi -kertoimella tai Spearmanin rho:lla (ρ) datajoukon jakautumisen perusteella. Tilastollisesti merkitseviä eroja ovat p-arvo <0,05. Kaikkien tietojen analysointi suoritetaan SPSS 26 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA) -ohjelmistolla.

D. Arvioitu tutkimustulos:

Tutkimustulosten odotetaan määrittävän virtsan proteomiikan ennustavan roolin verenpainevasteessa munuaisten denervaatiossa olevien hypertensiivisten potilaiden osalta.