Przewidywalna rola proteomiki w odpowiedzi ciśnienia krwi u pacjentów z nadciśnieniem tętniczym poddawanych odnerwieniu nerek. (PREDICT-RDN)

Nadciśnienie tętnicze (HTN) jest najczęstszym modyfikowalnym czynnikiem ryzyka związanym z zachorowalnością i śmiertelnością z przyczyn sercowo-naczyniowych, a jego częstość występowania rośnie na całym świecie. Pomimo dostępności bezpiecznych i skutecznych leków przeciwnadciśnieniowych u dużej części pacjentów nie udaje się osiągnąć kontroli ciśnienia krwi (BP) w stosunku do wartości docelowych zalecanych w wytycznych. Obecna wiedza jest taka, że ​​nadpobudliwość współczulnego układu nerwowego przyczynia się do inicjacji, utrzymywania się i postępu nadciśnienia tętniczego.

Odnerwienie nerek (RDN) to minimalnie inwazyjna metoda oparta na cewniku, mająca na celu przerwanie unerwienia współczulnego nerek przy użyciu różnych technik ablacji, będąca jednocześnie najdokładniej zbadaną metodą leczenia ΗΤΝ opartą na urządzeniach. Obecne systemy cewników wewnątrznaczyniowych uzyskują dostęp do tętnic nerkowych i dostarczają energię o częstotliwości radiowej, energię ultradźwiękową lub wykorzystują środki neurotoksyczne, takie jak alkohol, co powoduje zniszczenie okołotętniczych doprowadzających i odprowadzających nerwów nerkowych. W ostatnich latach badań RDN doświadczył wzlotów i upadków jako potencjalnej opcji leczenia nadciśnienia tętniczego. Wstępne, otwarte badania kliniczne weryfikujące koncepcję przyniosły obiecujące wyniki dotyczące skuteczności RDN w obniżaniu ciśnienia krwi, chociaż pierwsze randomizowane, pozornie kontrolowane badanie nie potwierdziło poprzednich zachęcających wyników. Jednakże najnowsze randomizowane, pozornie kontrolowane badania o ulepszonym projekcie i metodologii wykazały znaczne obniżenie ciśnienia krwi w gabinecie lekarskim (OBP) i ambulatoryjnym ciśnieniu krwi (ABP) u pacjentów poddawanych RDN. Pomimo wykazanej skuteczności i bezpieczeństwa procedury RDN, nawet w najnowszych optymalnie zaprojektowanych badaniach klinicznych u około 30–40% pacjentów nie stwierdza się klinicznie istotnej redukcji BP. Może to wynikać z podłoża patofizjologicznego u tych pacjentów, natomiast identyfikacja biomarkera odpowiedzi BP mogłaby skutkować lepszą selekcją pacjentów z lepszą odpowiedzią.

Dynamiczna rola białek w podtrzymywaniu życia jest dokumentowana już od początkowych etapów badań biologicznych. Proteom można zdefiniować jako całkowitą zawartość białka w układzie biologicznym, takim jak komórka, tkanka, płyn biologiczny itp. Proteomika to badanie proteomu na dużą skalę, a także identyfikacja i oznaczanie ilościowe tych białek. Istnieje kilka podstawowych etapów analizy proteomicznej: pobranie próbki, ekstrakcja białek, separacja białek, określenie sekwencji białek i identyfikacja białek za pomocą technik bioinformatycznych w referencyjnych bazach danych. Techniki oparte na chromatografii są stosowane do ekstrakcji białek, a techniki dwuwymiarowej elektroforezy o wysokiej rozdzielczości do rozdzielania białek, natomiast analiza oparta na spektrometrii mas (MS) jest szeroko stosowana do określania sekwencji białek. Analizę proteomiczną wykorzystuje się w różnych środowiskach badawczych do wykrywania biomarkerów diagnostycznych i podkreślania mechanizmów patogeniczności, zmiany wzorców ekspresji w odpowiedzi na różne sygnały lub interpretacji funkcjonalnych szlaków białkowych w różnych chorobach. Ostatecznym celem proteomiki jest lepsze zrozumienie złożoności molekularnej przy jednoczesnym ustaleniu diagnostycznych i terapeutycznych algorytmów opieki zdrowotnej w celu zapobiegania i leczenia chorób.

Α. Cel badania:

Głównym celem tego badania jest zbadanie potencjalnej predykcyjnej roli proteomiki moczu w odpowiedzi BP u pacjentów poddawanych RDN. Hipoteza ta może prowadzić do pojawienia się biomarkerów w moczu pacjentów z nadciśnieniem tętniczym w celu optymalnej selekcji tych, którzy zostaną poddani zabiegowi RDN.

B. Projekt badania:

Jest to prospektywne, nieinterwencyjne badanie obserwacyjne, w którym wzięło udział łącznie 100 pacjentów w wieku 18–80 lat z niekontrolowanym nadciśnieniem tętniczym, leczonych lub nieleczonych, poddawanych RDN w kontekście randomizowanych badań klinicznych. Podczas oceny wyjściowej rozpoznanie nadciśnienia tętniczego zostanie potwierdzone pomiarami OBP i ABP, przy czym wszyscy pacjenci muszą być nieleczeni lub leczeni maksymalnie 3 lekami hipotensyjnymi (co najmniej w 50% dawki maksymalnej). Z badania zostaną wykluczeni pacjenci z umiarkowaną do ciężkiej przewlekłą chorobą nerek (eGFR <45 ml/min), nieprawidłowościami w tętnicach nerkowych, cukrzycą typu I i wtórnym nadciśnieniem tętniczym. Zarejestrowane przypadki odbędą wizytę kontrolną 3 miesiące po RDN. Dane będą zbierane za pomocą specjalnego formularza (CRF). Należą do nich dane demograficzne i somatometryczne, przebyty wywiad, pomiary OBP, pomiary ABP, badania laboratoryjne (oszacowana czynność nerek, stężenie potasu, sodu i glukozy w surowicy). Każdy pacjent musi podpisać świadomą zgodę na udział w badaniu. Uzyskano zgodę komisji etycznej szpitala.

C. Metody:

Wizyta przesiewowa: Podczas wizyty początkowej BP zostanie ocenione na podstawie pomiarów OBP i ABP. Do badania zostaną włączeni pacjenci ze skurczowym OBP ≥140 mmHg i skurczowym ABP ≥130 mmHg. Profil pacjenta obejmie badania surowicy (glukozy, mocznika, kreatyniny, sodu, potasu), a także USG nerek w celu wykluczenia nieprawidłowości anatomicznych lub strukturalnych nerek. Zgodnie z wytycznymi HTN, wtórny HTN zostanie wykluczony. Od wszystkich pacjentów zostaną pobrane próbki moczu i przechowywane w zamrażarce do czasu wysłania ich do Jednostki Badań Proteomicznych w celu analizy.

Odnerwienie nerek: Zabieg RDN zostanie wykonany 1–2 tygodnie po wizycie przesiewowej przez doświadczonego kardiologa interwencyjnego, po czym następuje 1-dniowy pobyt w szpitalu.

Wizyta kontrolna: Wizyta kontrolna zostanie wyznaczona 3 miesiące po zabiegu RDN. Zostaną pobrane nowe pomiary OBP i ABP oraz badania surowicy (glukoza, mocznik, kreatynina, sód, potas). Gromadzenie danych zostanie zakończone analizą statystyczną. Pacjenci zostaną sklasyfikowani jako reagujący lub niereagujący na podstawie różnic w OBP i/lub ABP pomiędzy wizytą wyjściową a wizytą kontrolną po 3 miesiącach. Redukcja skurczowego ABP o 5 mmHg i redukcja skurczowego OBP o 10 mmHg zostaną ustawione jako wartości odcięcia w celu kategoryzacji pacjentów. W tym momencie wyniki analiz proteomicznych wyjściowych próbek moczu przyczynią się do identyfikacji znaczących jakościowych i ilościowych różnic w białkach pomiędzy obiema grupami pacjentów (osoby odpowiadające i niereagujące). Informacje na temat tożsamości, struktury, funkcji i szlaków metabolicznych poszczególnych białek, w których biorą udział, będą gromadzone za pośrednictwem biologicznych baz danych.

Analiza statystyczna: Rozkład normalny wszystkich danych zostanie sprawdzony za pomocą testu Kołmogorowa-Smirnowa. Zmienne ciągłe będą wyrażane jako średnia i odchylenie standardowe (SD), natomiast zmienne kategoryczne będą prezentowane jako wartości procentowe (%). Porównania pomiędzy zmiennymi kategorycznymi zostaną przeprowadzone za pomocą χ2 (test chi-kwadrat Pearsona). Porównania między zmiennymi ciągłymi o rozkładzie normalnym zostaną przeprowadzone za pomocą testu t-Studenta dla niesparowanych próbek, natomiast porównania między zmiennymi ciągłymi o rozkładzie innym niż normalny zostaną przeprowadzone za pomocą testu U Manna-Whitneya. Analiza korelacji zostanie przeprowadzona za pomocą współczynnika Pearsona Phi lub rho Spearmana (ρ) w oparciu o rozkład zbioru danych. Statystycznie istotne będą różnice przy wartości p < 0,05. Analiza wszystkich danych zostanie przeprowadzona za pomocą oprogramowania SPSS 26 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA).

D. Szacunkowy wynik badań:

Oczekuje się, że wyniki badania pozwolą określić predykcyjną rolę proteomiki moczu w odpowiedzi na ciśnienie krwi u pacjentów z nadciśnieniem tętniczym poddawanych denerwacji nerek.