Il ruolo predittivo della proteomica nella risposta della pressione arteriosa dei pazienti ipertesi sottoposti a denervazione renale. (PREDICT-RDN)

L’ipertensione (HTN) è il fattore di rischio modificabile più diffuso associato a morbilità e mortalità cardiovascolare, mentre la sua prevalenza è in aumento a livello globale. Nonostante la disponibilità di farmaci antipertensivi sicuri ed efficaci, in un’ampia percentuale di pazienti non viene raggiunto il controllo della pressione sanguigna (PA) entro gli obiettivi raccomandati dalle linee guida. La conoscenza attuale è che l’iperattività del sistema nervoso simpatico contribuisce all’inizio, al mantenimento e alla progressione dell’HTN.

La denervazione renale (RDN) è un metodo minimamente invasivo basato su catetere dedicato a interrompere l'innervazione simpatica renale utilizzando diverse tecniche di ablazione, mentre è la terapia basata su dispositivi più ampiamente studiata per ΗΤΝ. Gli attuali sistemi di cateteri endovascolari accedono alle arterie renali e forniscono energia a radiofrequenza, energia a ultrasuoni o utilizzano agenti neurotossici come l'alcol, con conseguente distruzione dei nervi renali afferenti ed efferenti peri-arteriosi. Negli ultimi anni di indagini l’RDN ha sperimentato alti e bassi come potenziale opzione terapeutica per l’HTN. I primi studi clinici in aperto, proof-of-concept, hanno prodotto risultati promettenti sull’efficacia dell’RDN nell’abbassamento della pressione arteriosa, sebbene il primo studio randomizzato controllato con simulazione non sia riuscito a confermare i precedenti risultati incoraggianti. Tuttavia, gli ultimi studi randomizzati e controllati con procedura simulata, con disegno e metodologia migliorati, hanno dimostrato riduzioni significative della pressione arteriosa ambulatoriale (OBP) e della pressione arteriosa ambulatoriale (ABP) nei pazienti sottoposti a RDN. Nonostante l’efficacia e la sicurezza dimostrate della procedura RDN, circa il 30%-40% dei pazienti non presenta una riduzione clinicamente significativa della pressione arteriosa, anche negli ultimi studi clinici progettati in modo ottimale. Ciò potrebbe essere dovuto al substrato fisiopatologico di questi pazienti, mentre l’identificazione di un biomarcatore della risposta pressoria potrebbe portare ad una migliore selezione dei pazienti con una migliore risposta.

Il ruolo dinamico delle proteine ​​nel sostenere la vita è documentato fin dalle fasi iniziali della ricerca biologica. Il proteoma può essere definito come il contenuto proteico complessivo di un sistema biologico come cellula, tessuto, fluido biologico, ecc. La proteomica è lo studio su larga scala del proteoma, nonché l'identificazione e la quantificazione di queste proteine. Ci sono alcune fasi fondamentali dell'analisi proteomica: acquisizione del campione, estrazione delle proteine, separazione delle proteine, determinazione della sequenza proteica e identificazione delle proteine ​​con tecniche bioinformatiche in database di riferimento. Le tecniche basate sulla cromatografia vengono utilizzate per l'estrazione delle proteine ​​e le tecniche di elettroforesi bidimensionale ad alta risoluzione per la separazione delle proteine, mentre l'analisi basata sulla spettrometria di massa (MS) è ampiamente applicata per la determinazione della sequenza proteica. L'analisi proteomica viene utilizzata in vari contesti di ricerca per rilevare biomarcatori diagnostici ed evidenziare meccanismi di patogenicità, alterazione dei modelli di espressione in risposta a diversi segnali o interpretazione dei percorsi proteici funzionali in diverse malattie. L’obiettivo finale della proteomica è comprendere meglio la complessità molecolare stabilendo algoritmi sanitari diagnostici e terapeutici per la prevenzione e il trattamento delle malattie.

A. Scopo dello studio:

Lo scopo principale di questo studio è quello di indagare il potenziale ruolo predittivo della proteomica delle urine nella risposta pressoria dei pazienti sottoposti a RDN. Questa ipotesi potrebbe portare alla comparsa di biomarcatori nelle urine dei pazienti ipertesi al fine di selezionare in modo ottimale coloro che verranno sottoposti alla procedura RDN.

B. Progettazione dello studio:

Si tratta di uno studio osservazionale prospettico, non interventistico, che ha arruolato un totale di 100 pazienti, con ipertensione non controllata, trattata o non trattata, di età compresa tra 18 e 80 anni, sottoposti a RDN nel contesto di studi clinici randomizzati. Durante la valutazione basale la diagnosi di HTN sarà confermata dalle misurazioni OBP e ABP, mentre tutti i pazienti dovranno essere non trattati o trattati con un massimo di 3 farmaci antipertensivi (almeno il 50% della dose massima). Saranno esclusi i pazienti con malattia renale cronica da moderata a grave (eGFR <45 ml/min), anomalie dell'arteria renale, diabete mellito di tipo I e HTN secondaria. I casi arruolati avranno una visita di follow-up 3 mesi dopo la RDN. I dati verranno raccolti mediante apposito form (CRF). Questi includono dati demografici e somatometrici, anamnesi pregressa, misurazioni OBP, misurazioni ABP, test di laboratorio (funzionalità renale stimata, livelli di potassio sierico, sodio sierico e livelli di glucosio sierico). Tutti i pazienti devono firmare un consenso informato per partecipare allo studio. L'approvazione etica è stata ottenuta dal comitato etico dell'ospedale.

C. Metodi:

Visita di screening: durante la visita basale la PA verrà valutata con misurazioni OBP e ABP. Saranno inclusi nello studio i pazienti con pressione arteriosa sistolica ≥ 140 mmHg e pressione arteriosa sistolica ≥ 130 mmHg. Il profilo del paziente includerà test sierici (glucosio, urea, creatinina, sodio, potassio), nonché ecografia renale per escludere anomalie anatomiche o strutturali dei reni. L'HTN secondario sarà escluso, secondo le linee guida HTN. I campioni di urina verranno raccolti da tutti i pazienti e conservati in congelatore fino all'invio all'Unità di Ricerca di Proteomica per le analisi.

Denervazione renale: la procedura RDN verrà eseguita da 1 a 2 settimane dopo la visita di screening da un cardiologo interventista esperto seguita da una degenza ospedaliera di 1 giorno.

Visita di follow-up: una visita di follow-up sarà programmata 3 mesi dopo la procedura RDN. Verranno raccolte nuove misurazioni OBP e ABP e test sierici (glucosio, urea, creatinina, sodio, potassio). La raccolta dei dati sarà completata da analisi statistiche. I pazienti saranno classificati come rispondenti o non rispondenti in base alle differenze OBP e/o ABP tra la visita di base e la visita di follow-up a 3 mesi. Una riduzione di 5 mmHg della pressione arteriosa sistolica e una riduzione di 10 mmHg della pressione arteriosa sistolica verranno impostate come valori cut-off per classificare i pazienti. A quel punto, i risultati delle analisi proteomiche dei campioni di urina basali contribuiranno all'identificazione di differenze qualitative e quantitative significative nelle proteine ​​tra i due gruppi di pazienti (responder e non-responder). Le informazioni sull'identità, la struttura, le funzioni e le vie metaboliche in cui sono coinvolte di specifiche proteine ​​saranno raccolte attraverso database biologici.

Analisi statistica: la distribuzione normale di tutti i dati sarà controllata con il test di Kolmogorov-Smirnov. Le variabili continue saranno espresse come media e deviazione standard (SD), mentre le variabili categoriali saranno presentate come percentuali (%). I confronti tra variabili categoriali verranno effettuati con χ2 (test del chi quadrato di Pearson). I confronti tra variabili continue con distribuzione normale verranno effettuati tramite il test t di Student per campioni non appaiati, mentre i confronti tra variabili continue che seguono distribuzioni non normali verranno effettuati tramite il test U di Mann-Whitney. L'analisi della correlazione verrà effettuata tramite il coefficiente Phi di Pearson o il rho (ρ) di Spearman in base alla distribuzione del set di dati. Statisticamente significative saranno le differenze con valore p <0,05. L'analisi di tutti i dati verrà eseguita dal software SPSS 26 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA).

D. Risultato stimato della ricerca:

Si prevede che i risultati dello studio determineranno il ruolo predittivo della proteomica dell'urina nella risposta pressoria dei pazienti ipertesi sottoposti a denervazione renale.