A proteomika prediktív szerepe a vese denerváción átesett hipertóniás betegek vérnyomás-válaszában. (PREDICT-RDN)

A hipertónia (HTN) a kardiovaszkuláris morbiditással és mortalitással kapcsolatos legelterjedtebb módosítható kockázati tényező, míg prevalenciája világszerte növekszik. Annak ellenére, hogy biztonságos és hatékony vérnyomáscsökkentő gyógyszerek állnak rendelkezésre, a betegek nagy részénél nem sikerül elérni a vérnyomást (BP) az irányelv által javasolt célokhoz. A jelenlegi ismeretek szerint a szimpatikus idegrendszeri hiperaktivitás hozzájárul a HTN kialakulásához, fenntartásához és progressziójához.

A vese denerváció (RDN) egy minimálisan invazív katéter alapú módszer, amely a vese szimpatikus enervációjának megszakítására szolgál különböző ablációs technikák alkalmazásával, miközben a ΗΤΝ legszélesebb körben vizsgált eszközalapú terápiája. A jelenlegi endovaszkuláris katéterrendszerek hozzáférnek a veseartériákhoz, és rádiófrekvenciás energiát, ultrahang-energiát szállítanak, vagy neurotoxikus anyagokat, például alkoholt használnak, ami a periartériás afferens és efferens veseidegek pusztulását eredményezi. Az RDN az elmúlt évek vizsgálatai során hullámvölgyeket és hullámvölgyeket tapasztalt, mint a HTN lehetséges kezelési lehetőségeit. A kezdeti koncepciókon alapuló, nyílt klinikai vizsgálatok ígéretes eredményeket hoztak az RDN hatékonyságával kapcsolatban a vérnyomás csökkentésében, bár az első randomizált ál-kontrollos vizsgálat nem erősítette meg a korábbi biztató eredményeket. A legújabb, randomizált, ál-kontrollos, továbbfejlesztett tervezésű és módszertanú vizsgálatok azonban az irodai vérnyomás (OBP) és az ambuláns vérnyomás (ABP) jelentős csökkenését mutatták ki az RDN-n átesett betegeknél. Az RDN eljárás bizonyított hatékonysága és biztonságossága ellenére a betegek körülbelül 30-40%-a nem mutat klinikailag jelentős vérnyomáscsökkenést, még a legújabb, optimálisan tervezett klinikai vizsgálatok során sem. Ennek oka lehet a patofiziológiai szubsztrát ezekben a betegekben, míg a BP válasz biomarkerének azonosítása a jobb válaszreakcióval rendelkező betegek jobb kiválasztását eredményezheti.

A fehérjék dinamikus szerepe az élet fenntartásában a biológiai kutatások kezdeti szakaszai óta dokumentált. A proteom egy biológiai rendszer, például sejt, szövet, biológiai folyadék stb. teljes fehérjetartalmaként definiálható. A proteomika a proteomok nagyszabású vizsgálata, valamint ezen fehérjék azonosítása és mennyiségi meghatározása. A proteomikai elemzésnek van néhány alapvető lépése: mintavétel, fehérje extrakció, fehérje elválasztás, fehérjeszekvencia meghatározása és fehérje azonosítás bioinformatikai technikákkal referencia adatbázisokban. A kromatográfiás technikákat fehérje extrakcióra és nagy felbontású kétdimenziós elektroforézis technikákat alkalmaznak a fehérjék szétválasztására, míg a tömegspektrometriás (MS) alapú analízist széles körben alkalmazzák a fehérjeszekvencia meghatározására. A proteomikai analízist különféle kutatási körülmények között alkalmazzák a diagnosztikai biomarkerek kimutatására és a patogenitási mechanizmusok kiemelésére, az expressziós mintázatok különböző jelekre adott válaszként történő megváltoztatására vagy a funkcionális fehérjeútvonalak értelmezésére különböző betegségekben. A proteomika végső célja a molekuláris komplexitás jobb megértése, miközben diagnosztikai és terápiás egészségügyi algoritmusokat hoz létre a betegségek megelőzésére és kezelésére.

Α. A tanulmány célja:

A tanulmány fő célja a vizelet proteomikájának potenciális prediktív szerepének vizsgálata az RDN-n átesett betegek BP-válaszában. Ez a hipotézis biomarkerek megjelenéséhez vezethet a hipertóniás betegek vizeletében, hogy optimálisan kiválasszák azokat, akiket RDN-eljárás alá vetnek.

B. Tanulmánytervezés:

Ez egy prospektív, nem intervenciós, megfigyeléses vizsgálat, amely összesen 100, nem kontrollált magas vérnyomásban szenvedő, kezelt vagy nem kezelt, 18-80 év közötti, RDN-n áteső beteget von be randomizált klinikai vizsgálatok keretében. A kiindulási értékelés során a HTN diagnózist OBP és ABP mérések igazolják, miközben minden betegnek kezeletlennek kell lennie, vagy maximum 3 vérnyomáscsökkentő gyógyszerrel kell kezelni (legalább a maximális dózis 50%-ával). Közepesen súlyos vagy súlyos krónikus vesebetegségben (eGFR <45 ml/perc), veseartéria-rendellenességben, I-es típusú diabetes mellitusban és másodlagos HTN-ben szenvedő betegeket kizárják. A bejegyzett eseteket az RDN után 3 hónappal utóellenőrző látogatásra várják. Az adatok gyűjtése speciális űrlap (CRF) használatával történik. Ide tartoznak a demográfiai és szomatometriai adatok, korábbi kórtörténet, OBP mérések, ABP mérések, laboratóriumi vizsgálatok (becsült vesefunkció, szérum kálium, szérum nátrium és szérum glükóz szint). Minden betegnek alá kell írnia egy tájékozott beleegyezését a vizsgálatban való részvételhez. A kórház etikai bizottsága megkapta az etikai jóváhagyást.

C. Módszerek:

Szűrőlátogatás: A kiindulási vizit során a vérnyomást OBP és ABP mérésekkel értékelik. A vizsgálatba olyan betegeket vonnak be, akiknek szisztolés OBP ≥140 Hgmm és szisztolés ABP ≥130 Hgmm. A betegprofil tartalmazni fogja a szérumteszteket (glükóz, karbamid, kreatinin, nátrium, kálium), valamint a vese ultrahangját a vesék anatómiai vagy szerkezeti rendellenességeinek kizárása érdekében. A másodlagos HTN a HTN-irányelveknek megfelelően kizárásra kerül. A vizeletmintákat minden betegtől gyűjtik, és fagyasztószekrényben tárolják, amíg el nem küldik a Proteomikai Kutatóegységhez elemzés céljából.

Vese denervációja: Az RDN-eljárást 1-2 héttel a szűrővizsgálat után egy tapasztalt intervenciós kardiológus végzi, majd 1 napos kórházi tartózkodást követ.

Nyomon követési látogatás: Az RDN eljárás után 3 hónappal nyomon követési látogatásra kerül sor. Új OBP és ABP méréseket és szérumteszteket (glükóz, karbamid, kreatinin, nátrium, kálium) gyűjtenek. Az adatgyűjtést statisztikai elemzéssel fejezzük be. A betegeket a kiindulási vizit és a 3 hónapos követési vizit közötti OBP és/vagy ABP különbségek alapján reagáló vagy nem reagáló kategóriába sorolják. A szisztolés ABP 5 Hgmm-es és a szisztolés OBP 10 Hgmm-es csökkenése lesz beállítva a betegek kategorizálásához. Ekkor a kiindulási vizeletminták proteomikai analízisének eredményei hozzájárulnak a fehérjék jelentős minőségi és mennyiségi különbségeinek azonosításához a két betegcsoport (reagáló és nem reagáló) között. Az egyes fehérjék azonosságáról, szerkezetéről, funkcióiról és metabolikus útvonalairól, amelyekben részt vesznek, biológiai adatbázisokon keresztül gyűjtik az információkat.

Statisztikai elemzés: Az összes adat normál eloszlását Kolmogorov-Smirnov teszttel ellenőrizzük. A folytonos változókat átlagban és szórásban (SD), míg a kategorikus változókat százalékban (%) adjuk meg. A kategorikus változók összehasonlítása χ2-vel történik (Pearson-khi-négyzet teszt). A normál eloszlású folytonos változók összehasonlítása a párosítatlan minták Student-féle t-próbájával történik, míg a nem normális eloszlást követő folytonos változók összehasonlítása Mann-Whitney U teszttel történik. A korrelációs elemzést Pearson Phi együttható vagy Spearman rho (ρ) segítségével végezzük az adatkészlet eloszlása ​​alapján. Statisztikailag szignifikánsak azok a különbségek, amelyek p-értéke <0,05. Az összes adat elemzését az SPSS 26 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA) szoftver végzi.

D. A kutatás becsült eredménye:

A vizsgálati eredmények várhatóan meghatározzák a vizelet proteomikájának prediktív szerepét a vese denerváción átesett hipertóniás betegek vérnyomásválaszában.