Screening análního karcinomu a/nebo prekancerózy: Analýza výkonnosti testu BD Onclarity™ HPV na análních vzorcích

Rakovina konečníku je vzácné onemocnění v běžné populaci, ale jeho výskyt je vyšší u určitých rizikových skupin, jako jsou imunosuprimovaní jedinci, včetně pacientů s HIV infekcí a pacientů po transplantaci orgánů, mužů, kteří mají sex s muži, a žen s Dysplazie nebo rakovina dolního genitálního traktu související s HPV.

Skvamózní intraepiteliální anální léze je dysplastický růst buněk dlaždicového epitelu v přechodové zóně análního kanálu. Tato léze je premaligní a může progredovat do análního spinocelulárního karcinomu, pokud není léčena.

Infekce lidským papilomavirem (HPV) je považována za nezbytnou příčinu pro rozvoj většiny anogenitálních malignit, které představují přibližně 95 % análních rakovin. Přetrvávající infekce HR-HPV podporuje progresi z dlaždicových intraepiteliálních lézí vysokého stupně (H-SIL) k invazivním análním karcinomům. V análním kanálu koreluje intraepiteliální léze LSIL nízkého stupně s anální intraepiteliální neoplazií (AIN)-1 nebo análním kondylomem, zatímco skvamózní intraepiteliální léze HSIL vysokého stupně koreluje s AIN-2 a AIN-3.

Prevalence H-SIL se pohybuje kolem 40 až 50 %. Progrese z H-SIL do análního karcinomu je asi 1/250 za rok u HIV pozitivního MSM a 1/5000 za rok u HIV-negativního MSM.

Diagnóza AIN se stanoví z cytologie nebo biopsie při rutinních vyšetřeních.

Doposud byly navrženy různé pokyny pro screening rakoviny konečníku, ale nejsou jednotné. Patří mezi ně 1) digitální anorektální vyšetření, užitečné u nerozpoznaných, ale symptomatických subjektů, a 2) anální cytologie, užitečná u asymptomatických subjektů, pouze pokud je k dispozici anoskopie s vysokým rozlišením.

Tato pozorování podporují potřebu zavést screening, aby se zabránilo análním prekancerům a rakovinám.

V tuto chvíli nebyl žádný test HPV validován pro anální vzorky a žádný není dostupný na trhu molekulární diagnostiky.

Validace metod typizace HPV na análních vzorcích by mohla zavést screening análního karcinomu bez invazivního postupu a se snadným přístupem pro pacienta.

BD Onclarity™ HPV Assay (BD Diagnostics, Sparks, USA) je PCR test s polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase, který detekuje typově specifickou genomovou DNA. Cílem testu jsou E6 a E7 HPV geny. Současně detekuje všech 14 vysoce rizikových typů HPV a může poskytnout "rozšířenou" genotypovou informaci o šesti jednotlivých genotypech (HPV 16, 18, 31, 45, 51 a 52) a ve třech odlišných skupinách (33 a 58; 56, 59 a 66 a 35, 39 a 68). Stručně řečeno, DNA byla extrahována pomocí magnetických částic BD FOX™ a DNA obsahující eluát byla použita k nastavení tří PCR genotypizačních reakcí: G1 detekuje HPV 16, HPV 18 a HPV 45 plus interní beta globinovou kontrolu; G2 detekuje HPV 31, HPV 33_58 a HPV 56_59_66 plus vnitřní beta globin.