Screening del cancro anale e/o precanceroso: analisi delle prestazioni del test BD Onclarity™ HPV su campioni anali

Il cancro anale è una malattia rara nella popolazione generale, ma la sua incidenza è maggiore in alcuni gruppi a rischio, come gli individui immunodepressi, compresi quelli con infezioni da HIV e pazienti post-trapianto di organi, uomini che hanno rapporti sessuali con uomini e donne con Displasia o cancro del tratto genitale inferiore correlato all’HPV.

Una lesione anale intraepiteliale squamosa è la crescita displastica delle cellule epiteliali squamose nella zona di transizione del canale anale. Questa lesione è pre-maligna e può progredire in carcinoma a cellule squamose anali se non trattata.

L’infezione da papillomavirus umano (HPV) è stata implicata come causa necessaria per lo sviluppo della maggior parte dei tumori maligni anogenitali che rappresentano circa il 95% dei tumori anali. L'infezione persistente da HR-HPV promuove la progressione da lesioni intraepiteliali squamose di alto grado (H-SIL) a tumori anali invasivi. Nel canale anale, la lesione intraepiteliale di basso grado LSIL è correlata alla neoplasia intraepiteliale anale (AIN) -1 o al condiloma anale, mentre la lesione intraepiteliale squamosa di alto grado HSIL è correlata con AIN-2 e AIN-3.

La prevalenza dell'H-SIL è compresa tra il 40 e il 50% circa. La progressione da H-SIL al cancro anale è rispettivamente di circa 1/250 all'anno negli MSM HIV positivi e 1/5.000 all'anno negli MSM HIV negativi.

La diagnosi di AIN viene effettuata mediante citologia o biopsia durante gli esami di routine.

Ad oggi sono state proposte diverse linee guida per lo screening del cancro anale ma non sono uniformi. Questi includono 1) esame digitale ano-rettale, utile nei soggetti non riconosciuti ma sintomatici, e 2) citologia anale, utile nei soggetti asintomatici, solo se è disponibile l'anoscopia ad alta risoluzione.

Queste osservazioni supportano la necessità di implementare lo screening per prevenire precancerosi e tumori anali.

Al momento, nessun test HPV è stato convalidato per i campioni anali e nessuno è disponibile nel mercato della diagnostica molecolare.

La validazione dei metodi di tipizzazione dell’HPV su campioni anali potrebbe implementare lo screening del cancro anale senza una procedura invasiva e con un approccio semplice per il paziente.

Il BD Onclarity™ HPV Assay (BD Diagnostics, Sparks, USA) è un test PCR con reazione a catena della polimerasi in tempo reale che rileva il DNA genomico tipo-specifico. L'obiettivo del test sono i geni HPV E6 ed E7. Rileva simultaneamente tutti i 14 tipi di HPV ad alto rischio e può fornire informazioni genotipiche "estese" su sei genotipi individuali (HPV 16, 18, 31, 45, 51 e 52) e in tre gruppi distinti (33 e 58; 56, 59 e 66; e 35,39 e 68). In breve, il DNA è stato estratto utilizzando particelle magnetiche BD FOX™ e il DNA contenente l'eluato è stato utilizzato per impostare tre reazioni di genotipizzazione PCR: G1 rileva HPV 16, HPV 18 e HPV 45 più il controllo interno di beta globina; G2 rileva HPV 31, HPV 33_58 e HPV 56_59_66 più la beta globina interna.