Badania przesiewowe w kierunku raka odbytu i/lub stanu przedrakowego: analiza wydajności testu BD Onclarity™ HPV Assay na próbkach z odbytu

Rak odbytu jest rzadką chorobą w populacji ogólnej, ale jego częstość występowania jest większa w niektórych grupach ryzyka, takich jak osoby z obniżoną odpornością, w tym osoby zakażone wirusem HIV i pacjenci po przeszczepieniu narządu, mężczyźni uprawiający seks z mężczyznami oraz kobiety z Dysplazja lub nowotwór dolnych dróg rodnych związany z HPV.

Śródnabłonkowa zmiana płaskonabłonkowa odbytu to dysplastyczny wzrost komórek nabłonka płaskiego w strefie przejściowej kanału odbytu. Zmiana ta ma charakter przedzłośliwy i nieleczona może przekształcić się w raka płaskonabłonkowego odbytu.

Zakażenie wirusem brodawczaka ludzkiego (HPV) uznano za niezbędną przyczynę rozwoju większości nowotworów odbytu i narządów płciowych, odpowiadających za około 95% nowotworów odbytu. Trwałe zakażenie HR-HPV sprzyja progresji od śródnabłonkowych zmian płaskonabłonkowych wysokiego stopnia (H-SIL) do inwazyjnych nowotworów odbytu. W kanale odbytu zmiana śródnabłonkowa niskiego stopnia LSIL koreluje z śródnabłonkową neoplazją odbytu (AIN)-1 lub kłykciną odbytu, natomiast śródnabłonkowa zmiana śródnabłonkowa dużego stopnia HSIL koreluje z AIN-2 i AIN-3.

Częstość występowania H-SIL wynosi około 40 do 50%. Progresja od H-SIL do raka odbytu wynosi odpowiednio około 1/250 rocznie u MSM zakażonych wirusem HIV i 1/5000 rocznie u MSM niezakażonych wirusem HIV.

Rozpoznanie AIN stawia się na podstawie cytologii lub biopsji podczas rutynowych badań.

Do chwili obecnej zaproponowano różne wytyczne dotyczące badań przesiewowych w kierunku raka odbytu, ale nie są one jednolite. Należą do nich: 1) cyfrowe badanie odbytowo-odbytnicze, przydatne u nierozpoznanych, ale objawowych osób, oraz 2) cytologia odbytu, przydatna u osób bezobjawowych, tylko jeśli dostępna jest anoskopia o wysokiej rozdzielczości.

Obserwacje te potwierdzają potrzebę wdrożenia badań przesiewowych w celu zapobiegania stanom przedrakowym i nowotworom odbytu.

W chwili obecnej żaden test HPV nie został zatwierdzony do stosowania w próbkach z odbytu i żaden nie jest dostępny na rynku diagnostyki molekularnej.

Walidacja metod typowania wirusa HPV na próbkach z odbytu mogłaby umożliwić wdrożenie badań przesiewowych w kierunku raka odbytu bez procedury inwazyjnej i przy łatwym podejściu do pacjenta.

Test BD Onclarity™ HPV Assay (BD Diagnostics, Sparks, USA) to test PCR wykorzystujący reakcję łańcuchową polimerazy w czasie rzeczywistym, który wykrywa specyficzny dla typu genomowy DNA. Celem testu są geny HPV E6 i E7. Wykrywa jednocześnie wszystkie 14 typów HPV wysokiego ryzyka i może dostarczyć „rozszerzonych” informacji o genotypach sześciu poszczególnych genotypów (HPV 16, 18, 31, 45, 51 i 52) oraz w trzech odrębnych grupach (33 i 58; 56, 59 i 66 oraz 35, 39 i 68). W skrócie, DNA ekstrahowano przy użyciu cząstek magnetycznych BD FOX™, a DNA zawierający eluat wykorzystano do przygotowania trzech reakcji genotypowania PCR: G1 wykrywa HPV 16, HPV 18 i HPV 45 oraz wewnętrzną kontrolę beta globiny; G2 wykrywa HPV 31, HPV 33_58 i HPV 56_59_66 oraz wewnętrzną beta globinę.