Validering af ægbaseret diagnostik og molekylære markører for spredning af anthelmintisk resistens (StarwormsWP1)

Baggrund Jordoverførte helminths (STH'er) er en gruppe af parasitiske orme, der inficerer millioner af børn i subtropiske og tropiske lande, hvilket resulterer i underernæring, væksthæmning, intellektuel retardering og kognitive mangler. For at kontrollere sygeligheden på grund af disse orme, implementeres skolebaserede ormekureprogrammer, hvor anthelmintiske lægemidler administreres til børn uden forudgående diagnose. Den fortsatte kamp mod disse orme er hjulpet af London-erklæringen om forsømte tropiske sygdomme, som hjælper med at opretholde og udvide det globale lægemiddeldonationsprogram, hvilket resulterer i en hidtil uset vækst af ormekureprogrammer. for at illustrere er dækningen af ​​masselægemiddeladministration (MDA) i de sidste fire år fordoblet fra 30 til 60 %, og der gøres en igangværende globale indsats for i sidste ende at nå milepælen på 75 % i 2020.

Trusler Mens det prisværdige langsigtede mål er at eliminere STH'er som et folkesundhedsproblem inden 2020 og i sidste ende at erklære målrettede geografiske områder fri for infektioner, gør denne høje grad af lægemiddelpres ormebehandlingsprogrammer sårbare over for udviklingen af ​​ormemiddelresistens, fordi programmerne kun stole på ét lægemiddel med nogle gange suboptimal effekt, og der er ingen tilgængelighed af alternative lægemidler.

Udfordringer

På nuværende tidspunkt er der ikke noget overvågningssystem til at overvåge fremkomsten og spredningen af ​​anthelmintikaresistens. Det er stadig uklart, i hvilket omfang lægemidlernes effektivitet kan være faldet, og om der allerede er anthelmintikaresistens. Det er dog ikke ligetil at udvikle et sådant system. Ormebehandlingsprogrammer fungerer typisk i ressourcebegrænsede omgivelser, og programledere kræver en vis fleksibilitet for at minimere både økonomiske og tekniske ressourcer, samtidig med at de sikrer en pålidelig vurdering af lægemidlets effektivitet. De vigtigste hindringer for globalt at overvåge mønstre for ændret lægemiddeleffektivitet og spredning af anthelmintikaresistens er følgende:

• manglen på diagnostiske laboratorier med erfarent personale til at udføre undersøgelserne og analysere og rapportere de opnåede data
• fraværet af et kvalitetssikringssystem, der garanterer reviderbare resultater
• manglen på vejledning i udformningen af ​​undersøgelser, efterhånden som programmerne skrider frem
• manglen på data, der understøtter gyldigheden af ​​molekylære markører til at påvise anthelmintisk resistens i humane STH'er
• manglen på følsomme og point-of-care værktøjer, der tillader påvisning af lave frekvenser af anthelmintikaresistens Hovedformål Dette projekt har til formål at styrke overvågningen og overvågningen af ​​lægemiddeleffektivitet og anthelmintikaresistens i STH-programmer. Som sådan vil det støtte ormekurprogrammer i deres søgen efter at eliminere STH'er som et folkesundhedsproblem inden 2020.

De specifikke mål for den første del af projektet er at validere diagnostiske værktøjer til at overvåge lægemiddeleffektivitet og spredningen af ​​anthelmintikaresistens og at validere molekylære markører for benzimidazolresistens.

Undersøgelsesprotokol Denne undersøgelse vil blive udført på fire forskellige steder i Afrika (Etiopien og Tanzania), Asien (Laos PDR) og Latinamerika (Brasilien). Udvælgelsen af ​​disse steder er baseret på deres erfaring med at vurdere lægemiddeleffektivitet og evaluering af diagnostiske værktøjers ydeevne, tilgængeligheden af ​​veludstyrede diagnostiske faciliteter og kvalificeret personale og deres nationale MDA-historie.

Undersøgelsen vil fokusere på børn i skolealderen (i alderen 5 til 14 år). Ved baseline vil forsøgspersoner blive bedt om at give en nylig (inden for 4 timer) afføringsprøve på mindst 9 gram. Alle afføringsprøver vil blive behandlet ved hjælp af FECPAKG2, en duplikat Kato-Katz tyk udstrygning (den mest almindeligt anvendte teknik til fækalægtælling (FEC)) og Mini-Flotac (en ny teknik, der har en følsomhed, der mindst svarer til den for Kato- Katz). Alle børn, der giver en afføringsprøve, vil få en enkelt oral dosis på ALB 400 mg under opsyn. Fjorten til 21 dage efter behandlingen vil en anden afføringsprøve blive indsamlet fra alle de børn, der viste sig positive for enhver STH-art ved baseline for at bestemme FEC'erne.

Ved hver prøvetagning opbevares 2 x 1 gram afføring i konserveringsmiddel til nedstrøms molekylær analyse. Opbevaret afføring vil blive sendt til Belgien til DNA-ekstraktion og qPCR-analyse. En undergruppe af prøverne vil blive analyseret ved Pyrosequencing for at evaluere de enkelte nukleotidpolymorfismer i b-tubulingenet.

Pooling af de lagrede prøver vil også blive udført for at sammenligne med værdierne opnået ved at analysere individuelle prøver.

Datahåndtering Data vil først blive registreret på specifikke undersøgelsesskemaer. Disse resultater vil derefter blive indtastet i de specialdesignede Excel-filer af to forskellige dataindtastningsassistenter for at minimere fejl i data på grund af forkert dataindtastning.

Studieledelse Studier på de forskellige steder vil blive organiseret og støttet fra Gent Universitet. Projektteamets medlemmer vil rejse til hvert enkelt forsøgssted for at træne lokalt personale i de forskellige koprologiske teknikker og for at gøre dem bekendt med forsøgsprotokollen og dokumenterne.