Validering av äggbaserad diagnostik och molekylära markörer för spridning av anthelmintisk resistens (StarwormsWP1)

Bakgrund Jordöverförda helminter (STH) är en grupp parasitmaskar som infekterar miljontals barn i subtropiska och tropiska länder, vilket resulterar i undernäring, tillväxthämning, intellektuell retardation och kognitiva brister. För att kontrollera sjukligheten på grund av dessa maskar, implementeras skolbaserade avmaskningsprogram, där anthelmintiska läkemedel ges till barn utan föregående diagnos. Den fortsatta kampen mot dessa maskar stöds av Londondeklarationen om försummade tropiska sjukdomar, som hjälper till att upprätthålla och utöka det globala läkemedelsdonationsprogrammet, vilket resulterar i en oöverträffad ökning av avmaskningsprogram. för att illustrera, under de senaste fyra åren har täckningen av massläkemedelsadministration (MDA) fördubblats från 30 till 60 %, och pågående globala ansträngningar görs för att i slutändan nå milstolpen på 75 % till 2020.

Hot Även om det lovvärda långsiktiga målet är att eliminera STH som ett folkhälsoproblem till 2020, och att så småningom förklara riktade geografiska områden fria från infektioner, gör denna höga grad av läkemedelstryck avmaskningsprogram sårbara för utvecklingen av resistens mot anthelmintika eftersom programmen bara lita på ett läkemedel med ibland suboptimal effekt och det finns ingen tillgång till alternativa läkemedel.

Utmaningar

För närvarande finns det inget övervakningssystem för att övervaka uppkomsten och spridningen av anthelmintikaresistens. Det är fortfarande oklart i vilken utsträckning läkemedlens effekt kan ha minskat och om resistens mot anthelmintika redan finns. Att utveckla ett sådant system är dock inte okomplicerat. Avmaskningsprogram fungerar vanligtvis i miljöer med begränsade resurser, och programansvariga kräver viss flexibilitet för att minimera både ekonomiska och tekniska resurser, samtidigt som de säkerställer en tillförlitlig bedömning av läkemedlets effektivitet. De viktigaste hindren för att globalt övervaka mönster av förändrad läkemedelseffektivitet och spridning av resistens mot anthelmintika är följande:

• bristen på diagnoslaboratorier med erfaren personal för att utföra undersökningarna och analysera och rapportera erhållna data
• avsaknaden av ett kvalitetssäkringssystem som garanterar revisionsbara resultat
• bristen på vägledning vid utformningen av undersökningar när programmen fortskrider
• bristen på data som stöder giltigheten av molekylära markörer för att upptäcka anthelmintisk resistens hos mänskliga STH
• bristen på känsliga och point-of-care-verktyg som tillåter detektering av låga frekvenser av anthelmintikaresistens Huvudmål Detta projekt syftar till att stärka övervakningen och övervakningen av läkemedelseffekt och anthelmintikaresistens i STH-program. Som sådan kommer det att stödja avmaskningsprogram i deras strävan att eliminera STH som ett folkhälsoproblem till 2020.

De specifika målen för den första delen av projektet är att validera diagnostiska verktyg för att övervaka läkemedelseffektivitet och spridningen av anthelmintikaresistens, och att validera molekylära markörer för bensimidazolresistens.

Studieprotokoll Denna studie kommer att genomföras på fyra olika platser i Afrika (Etiopien och Tanzania), Asien (Laos PDR) och Latinamerika (Brasilien). Valet av dessa platser är baserat på deras erfarenhet av att bedöma läkemedelseffektivitet och utvärdera prestandan hos diagnostiska verktyg, tillgången på välutrustade diagnostiska faciliteter och kunnig personal samt deras nationella MDA-historik.

Studien kommer att fokusera på barn i skolåldern (åldern 5 till 14 år). Vid baslinjen kommer försökspersoner att bli ombedda att ge ett färskt (inom 4 timmar) avföringsprov på minst 9 gram. Alla avföringsprover kommer att bearbetas med FECPAKG2, ett duplikat Kato-Katz tjockt utstryk (den vanligaste tekniken för avföring av äggräkning (FEC)) och Mini-Flotac (en ny teknik som har en känslighet som är minst lika med den för Kato- Katz). Alla barn som ger ett avföringsprov kommer att ges en oral dos på ALB 400 mg under övervakning. Fjorton till 21 dagar efter behandlingen kommer ett andra avföringsprov att samlas in från alla barn som visat sig positiva för någon STH-art vid baslinjen för att bestämma FEC.

Vid varje provtagning lagras 2x1 gram avföring i konserveringsmedel för nedströms molekylär analys. Förvarad avföring kommer att skickas till Belgien för DNA-extraktion och qPCR-analys. En delmängd av proverna kommer att analyseras med Pyrosequencing för att utvärdera enkelnukleotidpolymorfismerna i b-tubulingenen.

Poolning av de lagrade proverna kommer också att utföras för att jämföra med de värden som erhålls från analys av enskilda prover.

Datahantering Data kommer först att registreras på specifika studiejournalformulär. Dessa resultat kommer sedan att matas in i de specialdesignade Excel-filerna av två olika datainmatningstjänstemän för att minimera fel i data på grund av felaktig datainmatning.

Studieledning Studier på de olika platserna kommer att organiseras och stödjas från Gents universitet. Projektgruppens medlemmar kommer att resa till varje enskild prövningsplats för att utbilda lokal personal i de olika koprologiska teknikerna och för att bekanta dem med prövningsprotokollet och dokumenten.