Validación de diagnósticos basados ​​en huevos y marcadores moleculares para la propagación de la resistencia a los antihelmínticos (StarwormsWP1)

Antecedentes Los helmintos transmitidos por el suelo (STH, por sus siglas en inglés) son un grupo de gusanos parásitos que infectan a millones de niños en países subtropicales y tropicales, lo que provoca desnutrición, retraso en el crecimiento, retraso intelectual y déficit cognitivo. Para controlar la morbilidad por estos parásitos se implementan programas de desparasitación escolar, en los cuales se administran medicamentos antihelmínticos a los niños sin diagnóstico previo. La lucha continua contra estos gusanos cuenta con la ayuda de la Declaración de Londres sobre Enfermedades Tropicales Desatendidas, que ayuda a mantener y expandir el programa global de donación de medicamentos, lo que resulta en un crecimiento sin precedentes de los programas de desparasitación. para ilustrar, en los últimos cuatro años, la cobertura de la administración masiva de medicamentos (MDA) se ha duplicado del 30 al 60 %, y se están realizando esfuerzos globales continuos para finalmente alcanzar el hito del 75 % para 2020.

Amenazas Si bien el loable objetivo a largo plazo es eliminar las geohelmintiasis como problema de salud pública para 2020 y eventualmente declarar áreas geográficas objetivo libres de infecciones, este alto grado de presión de las drogas hace que los programas de desparasitación sean vulnerables al desarrollo de resistencia a los antihelmínticos porque los programas solo dependen de un fármaco con una eficacia a veces subóptima y no hay disponibilidad de fármacos alternativos.

Desafíos

En la actualidad, no existe un sistema de vigilancia para controlar la aparición y propagación de la resistencia a los antihelmínticos. No está claro en qué medida puede haber disminuido la eficacia de los medicamentos y si ya existe resistencia a los antihelmínticos. Sin embargo, desarrollar un sistema de este tipo no es sencillo. Los programas de desparasitación suelen operar en entornos con recursos limitados, y los administradores de programas requieren cierta flexibilidad para minimizar los recursos financieros y técnicos, al tiempo que garantizan una evaluación confiable de la eficacia del fármaco. Los obstáculos más importantes para monitorear globalmente los patrones de cambio en la eficacia de los medicamentos y la propagación de la resistencia a los antihelmínticos son los siguientes:

• la escasez de laboratorios de diagnóstico con personal experimentado para realizar las encuestas y analizar y reportar los datos obtenidos
• la ausencia de un sistema de aseguramiento de la calidad que garantice resultados auditables
• la falta de orientación en el diseño de encuestas a medida que avanzan los programas
• la falta de datos que respalden la validez de los marcadores moleculares para detectar la resistencia antihelmíntica en STH humanos
• la falta de herramientas sensibles y de punto de atención que permitan la detección de bajas frecuencias de resistencia a los antihelmínticos Objetivo principal Este proyecto tiene como objetivo fortalecer el monitoreo y la vigilancia de la eficacia de los medicamentos y la resistencia a los antihelmínticos en los programas de STH. Como tal, apoyará los programas de desparasitación en su búsqueda por eliminar las STH como problema de salud pública para 2020.

Los objetivos específicos de la primera parte del proyecto son validar herramientas de diagnóstico para monitorear la eficacia de los medicamentos y la propagación de la resistencia a los antihelmínticos, y validar marcadores moleculares para la resistencia a los bencimidazoles.

Protocolo del estudio Este estudio se llevará a cabo en cuatro sitios diferentes en África (Etiopía y Tanzania), Asia (Lao PDR) y América Latina (Brasil). La selección de estos sitios se basa en su experiencia en la evaluación de la eficacia de los medicamentos y el desempeño de las herramientas de diagnóstico, la disponibilidad de instalaciones de diagnóstico bien equipadas y personal calificado, y su historial nacional de MDA.

El estudio se centrará en niños en edad escolar (de 5 a 14 años). Al inicio, se les pedirá a los sujetos que proporcionen una muestra de heces reciente (dentro de las 4 horas) de al menos 9 gramos. Todas las muestras de heces se procesarán con FECPAKG2, un frotis grueso duplicado de Kato-Katz (la técnica de recuento de huevos fecales (FEC) más comúnmente aplicada) y Mini-Flotac (una técnica novedosa que tiene una sensibilidad al menos igual a la de Kato-Katz). Katz). Todos los niños que proporcionen una muestra de heces recibirán una dosis oral única de ALB 400 mg bajo supervisión. De catorce a 21 días después del tratamiento, se recolectará una segunda muestra de heces de todos los niños que resultaron positivos para cualquier especie de STH al inicio del estudio para determinar los FEC.

En cada muestreo, se almacenan 2x 1 gramo de heces en conservante para el análisis molecular posterior. Las heces almacenadas se enviarán a Bélgica para la extracción de ADN y el análisis de qPCR. Se analizará un subconjunto de las muestras mediante pirosecuenciación para evaluar los polimorfismos de un solo nucleótido en el gen de la b-tubulina.

También se realizará el agrupamiento de las muestras almacenadas para compararlas con los valores obtenidos del análisis de muestras individuales.

Manejo de datos Los datos se registrarán primero en formularios de registro de estudios específicos. Luego, estos resultados serán ingresados ​​en los archivos de Excel diseñados a medida por dos empleados de entrada de datos diferentes para minimizar los errores en los datos debido a la entrada incorrecta de datos.

Gestión de estudios Los estudios en los diferentes sitios serán organizados y apoyados por la Universidad de Ghent. Los miembros del equipo del proyecto viajarán a cada sitio de ensayo individual para capacitar al personal local en las diferentes técnicas coprológicas y familiarizarlo con el protocolo y los documentos del ensayo.