Валидация диагностики на основе яиц и молекулярных маркеров распространения устойчивости к антигельминтам (StarwormsWP1)

Актуальность темы Гельминты, передающиеся через почву (ПГП), представляют собой группу паразитических червей, которые заражают миллионы детей в субтропических и тропических странах, вызывая недоедание, задержку роста, умственную отсталость и когнитивные нарушения. Для борьбы с заболеваемостью этими гельминтами в школах реализуются программы дегельминтизации, в рамках которых детям без предварительной диагностики вводят антигельминтные препараты. Продолжающейся борьбе с этими червями способствует Лондонская декларация о забытых тропических болезнях, которая помогает поддерживать и расширять глобальную программу пожертвований лекарств, что приводит к беспрецедентному росту программ дегельминтизации. например, за последние четыре года охват массовым введением лекарственных средств (МДА) удвоился с 30 до 60%, и в настоящее время предпринимаются глобальные усилия, чтобы в конечном итоге достичь рубежа в 75% к 2020 году.

Угрозы В то время как похвальная долгосрочная цель состоит в том, чтобы к 2020 году ликвидировать ППГ как проблему общественного здравоохранения и в конечном итоге объявить целевые географические районы свободными от инфекций, такая высокая степень лекарственного давления делает программы дегельминтизации уязвимыми для развития резистентности к глистогонным препаратам, поскольку программы полагаться только на один препарат с иногда субоптимальной эффективностью, и альтернативные препараты отсутствуют.

Проблемы

В настоящее время не существует системы надзора за возникновением и распространением резистентности к антигельминтным средствам. Остается неясным, до какой степени могла снизиться эффективность препаратов и присутствует ли уже антигельминтная резистентность. Однако разработать такую ​​систему не так-то просто. Программы дегельминтизации обычно работают в условиях ограниченных ресурсов, и руководителям программ требуется определенная гибкость, чтобы свести к минимуму как финансовые, так и технические ресурсы, обеспечивая при этом надежную оценку эффективности препарата. Наиболее важными препятствиями для глобального мониторинга закономерностей изменения эффективности лекарств и распространения устойчивости к антигельминтам являются следующие:

• нехватка диагностических лабораторий с опытным персоналом для проведения обследований и анализа и отчетности полученных данных
• отсутствие системы обеспечения качества, гарантирующей проверяемые результаты
• отсутствие руководства по разработке опросов по мере реализации программ
• отсутствие данных, подтверждающих достоверность молекулярных маркеров для выявления резистентности к антигельминтам у ППГ человека
• отсутствие чувствительных инструментов, предназначенных для оказания медицинской помощи, позволяющих выявлять низкие частоты устойчивости к глистогонным препаратам. Основная цель Этот проект направлен на усиление мониторинга и надзора за эффективностью лекарственных средств и устойчивостью к глистогонным препаратам в программах ППГ. Таким образом, он будет поддерживать программы дегельминтизации в их стремлении устранить ППГ как проблему общественного здравоохранения к 2020 году.

Конкретными целями первой части проекта являются валидация диагностических инструментов для мониторинга эффективности лекарств и распространения устойчивости к глистогонным препаратам, а также валидация молекулярных маркеров устойчивости к бензимидазолу.

Протокол исследования Это исследование будет проводиться в четырех разных местах в Африке (Эфиопия и Танзания), Азии (Лаосская Народно-Демократическая Республика) и Латинской Америке (Бразилия). Выбор этих центров основан на их опыте в оценке эффективности лекарств и оценке эффективности диагностических инструментов, наличии хорошо оборудованных диагностических средств и квалифицированного персонала, а также их национальной истории MDA.

Исследование будет сосредоточено на детях школьного возраста (возраст от 5 до 14 лет). На исходном уровне субъектов попросят предоставить недавний (в течение 4 часов) образец стула весом не менее 9 граммов. Все образцы стула будут обработаны с использованием FECPAKG2, дубликат толстого мазка Като-Каца (наиболее часто применяемый метод подсчета фекальных яиц (ФЭК)) и Mini-Flotac (новый метод, который имеет чувствительность, по крайней мере, равную чувствительности Като-Каца). Кац). Всем детям, сдавшим образец стула, будет предоставлена ​​однократная пероральная доза ALB 400 мг под наблюдением. Через 14–21 день после лечения у всех детей, у которых на исходном уровне был обнаружен положительный результат на любой вид ППГ, будет взят второй образец стула для определения FEC.

При каждой пробе 2x1 грамм стула сохраняется в консерванте для последующего молекулярного анализа. Сохраненный стул будет отправлен в Бельгию для выделения ДНК и анализа методом количественной ПЦР. Подмножество образцов будет проанализировано с помощью пиросеквенирования для оценки однонуклеотидных полиморфизмов в гене b-тубулина.

Также будет выполняться объединение сохраненных образцов для сравнения со значениями, полученными при анализе отдельных образцов.

Обработка данных. Сначала данные будут записаны в специальные формы записи исследования. Затем эти результаты будут введены в специально разработанные файлы Excel двумя разными клерками по вводу данных, чтобы свести к минимуму ошибки в данных из-за неправильного ввода данных.

Управление обучением Исследования на различных объектах будут организованы и поддерживаться Гентским университетом. Члены проектной группы поедут на каждое отдельное место испытаний, чтобы обучить местный персонал различным копрологическим методам и ознакомить их с протоколом и документами исследования.