Validierung eibasierter Diagnostika und molekularer Marker für die Ausbreitung von Anthelminthika-Resistenzen (StarwormsWP1)

Hintergrund Durch den Boden übertragene Helminthen (STHs) sind eine Gruppe parasitärer Würmer, die Millionen von Kindern in subtropischen und tropischen Ländern infizieren, was zu Mangelernährung, Wachstumshemmung, geistiger Behinderung und kognitiven Defiziten führt. Um die Morbidität aufgrund dieser Würmer zu kontrollieren, werden schulbasierte Entwurmungsprogramme durchgeführt, bei denen Kindern ohne vorherige Diagnose Anthelminthika verabreicht werden. Der fortgesetzte Kampf gegen diese Würmer wird durch die Londoner Erklärung zu vernachlässigten Tropenkrankheiten unterstützt, die dazu beiträgt, das globale Medikamentenspendenprogramm aufrechtzuerhalten und zu erweitern, was zu einem beispiellosen Wachstum von Entwurmungsprogrammen führt. Zur Veranschaulichung: In den letzten vier Jahren hat sich die Abdeckung der Massendrogenverabreichung (Mass Drug Administration, MDA) von 30 auf 60 % verdoppelt, und es werden fortlaufende globale Anstrengungen unternommen, um den Meilenstein von 75 % bis 2020 zu erreichen.

Bedrohungen Während das lobenswerte langfristige Ziel darin besteht, STHs als Problem der öffentlichen Gesundheit bis 2020 zu eliminieren und bestimmte geografische Gebiete schließlich für infektionsfrei zu erklären, macht dieser hohe Grad an Medikamentendruck Entwurmungsprogramme anfällig für die Entwicklung von Anthelminthika-Resistenzen, da die Programme sich nur auf ein Medikament mit manchmal suboptimaler Wirksamkeit verlassen und es gibt keine Verfügbarkeit alternativer Medikamente.

Herausforderungen

Gegenwärtig gibt es kein Überwachungssystem, um das Auftreten und die Ausbreitung von Anthelminthika-Resistenzen zu überwachen. Unklar bleibt, inwieweit die Wirksamkeit von Medikamenten nachgelassen haben könnte und ob bereits Anthelminthika-Resistenzen vorliegen. Die Entwicklung eines solchen Systems ist jedoch nicht einfach. Entwurmungsprogramme werden in der Regel in Umgebungen mit begrenzten Ressourcen durchgeführt, und Programmmanager benötigen eine gewisse Flexibilität, um sowohl die finanziellen als auch die technischen Ressourcen zu minimieren und gleichzeitig eine zuverlässige Bewertung der Arzneimittelwirksamkeit zu gewährleisten. Die wichtigsten Hindernisse für die globale Überwachung von Mustern der sich ändernden Arzneimittelwirksamkeit und der Ausbreitung von Anthelminthika-Resistenzen sind die folgenden:

• der Mangel an diagnostischen Labors mit erfahrenem Personal, um die Erhebungen durchzuführen und die erhaltenen Daten zu analysieren und zu melden
• das Fehlen eines Qualitätssicherungssystems, das überprüfbare Ergebnisse garantiert
• der Mangel an Leitlinien für die Gestaltung von Erhebungen im Verlauf der Programme
• das Fehlen von Daten, die die Gültigkeit molekularer Marker zum Nachweis von Anthelminthika-Resistenzen in menschlichen STHs unterstützen
• der Mangel an empfindlichen und Point-of-Care-Instrumenten, die den Nachweis geringer Frequenzen von Anthelminthika-Resistenzen ermöglichen. Hauptziel Dieses Projekt zielt darauf ab, die Überwachung und Überwachung der Arzneimittelwirksamkeit und Anthelminthika-Resistenz in STH-Programmen zu stärken. Als solches wird es Entwurmungsprogramme in ihrem Bestreben unterstützen, STHs als Problem der öffentlichen Gesundheit bis 2020 zu eliminieren.

Die spezifischen Ziele des ersten Teils des Projekts sind die Validierung diagnostischer Instrumente zur Überwachung der Arzneimittelwirksamkeit und der Ausbreitung von Anthelminthika-Resistenzen sowie die Validierung molekularer Marker für Benzimidazol-Resistenz.

Studienprotokoll Diese Studie wird an vier verschiedenen Standorten in Afrika (Äthiopien und Tansania), Asien (PDR Laos) und Lateinamerika (Brasilien) durchgeführt. Die Auswahl dieser Standorte basiert auf ihrer Erfahrung bei der Bewertung der Wirksamkeit von Arzneimitteln und der Bewertung der Leistung diagnostischer Instrumente, der Verfügbarkeit gut ausgestatteter diagnostischer Einrichtungen und qualifizierten Personals sowie ihrer nationalen MDA-Geschichte.

Die Studie konzentriert sich auf Kinder im schulpflichtigen Alter (5 bis 14 Jahre). Zu Studienbeginn werden die Probanden gebeten, eine aktuelle (innerhalb von 4 Stunden) Stuhlprobe von mindestens 9 Gramm abzugeben. Alle Stuhlproben werden mit dem FECPAKG2, einem doppelten dicken Kato-Katz-Abstrich (der am häufigsten angewandten Technik zur Zählung von Eiern im Stuhl (FEC)) und Mini-Flotac (einer neuartigen Technik, deren Empfindlichkeit mindestens der von Kato-Katz entspricht) verarbeitet. Katz). Allen Kindern, die eine Stuhlprobe abgeben, wird unter Aufsicht eine orale Einzeldosis von 400 mg ALB verabreicht. Vierzehn bis 21 Tage nach der Behandlung wird eine zweite Stuhlprobe von allen Kindern entnommen, die sich zu Studienbeginn als positiv für eine STH-Spezies erwiesen haben, um die FECs zu bestimmen.

Bei jeder Probenahme wird 2 x 1 Gramm Stuhl in Konservierungsmittel für nachgeschaltete Molekularanalysen gelagert. Gelagerter Stuhl wird zur DNA-Extraktion und qPCR-Analyse nach Belgien versandt. Eine Teilmenge der Proben wird durch Pyrosequenzierung analysiert, um die Einzelnukleotid-Polymorphismen im b-Tubulin-Gen zu bewerten.

Es wird auch ein Pooling der gelagerten Proben durchgeführt, um sie mit den Werten zu vergleichen, die aus der Analyse einzelner Proben gewonnen wurden.

Datenhandhabung Die Daten werden zunächst auf speziellen Studienaufzeichnungsformularen erfasst. Diese Ergebnisse werden dann von zwei verschiedenen Dateneingabesachbearbeitern in die kundenspezifischen Excel-Dateien eingegeben, um Datenfehler aufgrund einer falschen Dateneingabe zu minimieren.

Studienmanagement Das Studium an den verschiedenen Standorten wird von der Universität Gent aus organisiert und unterstützt. Die Mitglieder des Projektteams werden zu jedem einzelnen Versuchsstandort reisen, um das lokale Personal in den verschiedenen koprologischen Techniken zu schulen und sie mit dem Versuchsprotokoll und den Dokumenten vertraut zu machen.