Validering av eggbasert diagnostikk og molekylære markører for spredning av anthelmintisk motstand (StarwormsWP1)

Bakgrunn Jordoverførte helminths (STH) er en gruppe parasittiske ormer som infiserer millioner av barn i subtropiske og tropiske land, noe som resulterer i underernæring, veksthemning, intellektuell retardasjon og kognitive mangler. For å kontrollere sykelighet på grunn av disse ormene, implementeres skolebaserte ormeprogrammer, der ormemidler gis til barn uten forutgående diagnose. Den fortsatte kampen mot disse ormene blir hjulpet av London-erklæringen om forsømte tropiske sykdommer, som bidrar til å opprettholde og utvide det globale stoffdonasjonsprogrammet, noe som resulterer i en enestående vekst av ormekurer. for å illustrere, i løpet av de siste fire årene har dekningen av massemedisinsk administrering (MDA) doblet seg fra 30 til 60 %, og det gjøres en pågående global innsats for å nå milepælen på 75 % innen 2020.

Trusler Mens det prisverdige langsiktige målet er å eliminere STH som et folkehelseproblem innen 2020, og til slutt å erklære målrettede geografiske områder frie for infeksjoner, gjør denne høye graden av medikamentpress ormemiddel sårbare for utvikling av ormemiddelresistens fordi programmene bare stole på ett medikament med noen ganger suboptimal effekt, og det er ingen tilgjengelighet av alternative legemidler.

Utfordringer

For tiden er det ikke noe overvåkingssystem for å overvåke fremveksten og spredningen av anthelmintikaresistens. Det er fortsatt uklart i hvilken grad effekten av medikamenter kan ha falt og om anthelmintikaresistens allerede er tilstede. Det er imidlertid ikke enkelt å utvikle et slikt system. Avlusningsprogrammer opererer vanligvis i ressursbegrensede omgivelser, og programledere krever en viss fleksibilitet for å minimere både økonomiske og tekniske ressurser, samtidig som de sikrer en pålitelig vurdering av medikamentets effektivitet. De viktigste hindringene for globalt overvåking av mønstre for endret legemiddeleffektivitet og spredning av anthelmintikaresistens er følgende:

• mangelen på diagnostiske laboratorier med erfarne ansatte til å utføre undersøkelsene og analysere og rapportere innhentede data
• fraværet av et kvalitetssikringssystem som garanterer reviderbare resultater
• mangelen på veiledning i utformingen av undersøkelser etter hvert som programmene skrider frem
• mangelen på data som støtter gyldigheten av molekylære markører for å oppdage anthelmintisk resistens hos menneskelige STH-er
• mangelen på sensitive og behandlingspunktverktøy som tillater påvisning av lave frekvenser av anthelmintikaresistens Hovedmål Dette prosjektet tar sikte på å styrke overvåking og overvåking av medikamenteffektivitet og anthelmintikaresistens i STH-programmer. Som sådan vil den støtte ormekurprogrammer i deres forsøk på å eliminere STH som et folkehelseproblem innen 2020.

De spesifikke målene for den første delen av prosjektet er å validere diagnostiske verktøy for å overvåke legemiddeleffektivitet og spredning av anthelmintikaresistens, og å validere molekylære markører for benzimidazolresistens.

Studieprotokoll Denne studien vil gjennomføres på fire forskjellige steder i Afrika (Etiopia og Tanzania), Asia (Laos PDR) og Latin-Amerika (Brasil). Valget av disse stedene er basert på deres erfaring med å vurdere legemiddeleffektivitet og evaluere ytelsen til diagnostiske verktøy, tilgjengeligheten av velutstyrte diagnostiske fasiliteter og dyktig personell, og deres nasjonale MDA-historie.

Studien vil fokusere på barn i skolealder (alder fra 5 til 14 år). Ved baseline vil forsøkspersonene bli bedt om å gi en nylig (innen 4 timer) avføringsprøve på minst 9 gram. Alle avføringsprøver vil bli behandlet ved hjelp av FECPAKG2, et duplikat Kato-Katz tykt utstryk (den mest brukte teknikken for fecal egg count (FEC)) og Mini-Flotac (en ny teknikk som har en følsomhet som minst er lik Kato- Katz). Alle barn som gir en avføringsprøve vil få en enkelt oral dose på ALB 400 mg under tilsyn. Fjorten til 21 dager etter behandling vil en andre avføringsprøve bli samlet inn fra alle barna som viste seg positive for noen STH-arter ved baseline for å bestemme FECs.

Ved hver prøvetaking lagres 2x 1 gram avføring i konserveringsmiddel for nedstrøms molekylær analyse. Lagret avføring vil bli sendt til Belgia for DNA-ekstraksjon og qPCR-analyse. En undergruppe av prøvene vil bli analysert ved Pyrosequencing for å evaluere enkeltnukleotidpolymorfismer i b-tubulingenet.

Samling av de lagrede prøvene vil også bli utført for å sammenligne med verdiene oppnådd ved å analysere individuelle prøver.

Datahåndtering Data vil først bli registrert på spesifikke studiejournalskjemaer. Disse resultatene vil deretter bli lagt inn i de spesialdesignede Excel-filene av to forskjellige dataregistreringsfunksjonærer for å minimere feil i data på grunn av feil datainntasting.

Studieledelse Studier på de forskjellige stedene vil bli organisert og støttet fra Ghent University. Prosjektteamets medlemmer vil reise til hvert enkelt prøvested for å trene lokalt personell i de forskjellige koprologiske teknikkene og for å gjøre dem kjent med prøveprotokollen og dokumentene.