Walidacja diagnostyki opartej na jajach i markerów molekularnych pod kątem rozprzestrzeniania się oporności na środki przeciw robakom (StarwormsWP1)

Tło Robaki przenoszone przez glebę (STH) to grupa robaków pasożytniczych, które zakażają miliony dzieci w krajach subtropikalnych i tropikalnych, powodując niedożywienie, zahamowanie wzrostu, upośledzenie umysłowe i deficyty poznawcze. W celu ograniczenia zachorowalności na te robaki wdrażane są szkolne programy odrobaczania, w ramach których dzieciom podaje się leki przeciwpasożytnicze bez wcześniejszej diagnozy. Ciągła walka z tymi robakami jest wspomagana przez Londyńską Deklarację w sprawie Zaniedbanych Chorób Tropikalnych, która pomaga utrzymać i rozszerzyć globalny program darowizn leków, co skutkuje bezprecedensowym rozwojem programów odrobaczania. dla zilustrowania, w ciągu ostatnich czterech lat zasięg masowego podawania leków (MDA) podwoił się z 30 do 60%, a trwają globalne wysiłki, aby ostatecznie osiągnąć kamień milowy 75% do 2020 r.

Zagrożenia Podczas gdy godnym pochwały długoterminowym celem jest wyeliminowanie STH jako problemu zdrowia publicznego do 2020 r. i ostatecznie uznanie docelowych obszarów geograficznych za wolne od infekcji, tak wysoki stopień presji leków sprawia, że ​​programy odrobaczania są podatne na rozwój oporności na środki przeciwrobacze, ponieważ programy te polegają tylko na jednym leku, którego skuteczność czasami nie jest optymalna, a leki alternatywne nie są dostępne.

Wyzwania

Obecnie nie ma systemu nadzoru, który monitorowałby pojawianie się i rozprzestrzenianie oporności na środki przeciwrobacze. Nie jest jasne, w jakim stopniu skuteczność leków mogła spaść i czy oporność przeciw robakom jest już obecna. Opracowanie takiego systemu nie jest jednak proste. Programy odrobaczania zazwyczaj działają w warunkach ograniczonych zasobów, a kierownicy programów wymagają pewnej elastyczności, aby zminimalizować zarówno zasoby finansowe, jak i techniczne, zapewniając jednocześnie wiarygodną ocenę skuteczności leku. Najważniejsze przeszkody w globalnym monitorowaniu wzorców zmieniającej się skuteczności leków i rozprzestrzeniania się oporności na środki przeciwrobacze są następujące:

• brak laboratoriów diagnostycznych z doświadczoną kadrą do wykonywania badań oraz analizowania i raportowania uzyskanych danych
• brak systemu zapewniania jakości gwarantującego wyniki podlegające audytowi
• brak wskazówek dotyczących projektowania ankiet w miarę postępu programów
• brak danych potwierdzających ważność markerów molekularnych do wykrywania oporności na środki przeciwrobacze u ludzi STH
• brak czułych i dostępnych w punkcie opieki narzędzi, które pozwalają na wykrywanie niskich częstotliwości oporności na środki przeciwrobacze Główny cel Projekt ten ma na celu wzmocnienie monitorowania i nadzoru nad skutecznością leków i opornością na środki przeciwrobacze w programach STH. W związku z tym będzie wspierać programy odrobaczania w ich dążeniu do wyeliminowania STH jako problemu zdrowia publicznego do 2020 roku.

Konkretne cele pierwszej części projektu to walidacja narzędzi diagnostycznych do monitorowania skuteczności leków i rozprzestrzeniania się oporności na środki przeciwrobacze oraz walidacja markerów molekularnych oporności na benzimidazol.

Protokół badania Badanie zostanie przeprowadzone w czterech różnych miejscach w Afryce (Etiopia i Tanzania), Azji (Lao PDR) i Ameryce Łacińskiej (Brazylia). Wybór tych ośrodków opiera się na ich doświadczeniu w ocenie skuteczności leków i ocenie działania narzędzi diagnostycznych, dostępności dobrze wyposażonych placówek diagnostycznych i wykwalifikowanego personelu oraz ich krajowej historii MDA.

Badania będą koncentrować się na dzieciach w wieku szkolnym (w wieku od 5 do 14 lat). Na początku badani zostaną poproszeni o dostarczenie niedawnej (w ciągu 4 godzin) próbki kału o masie co najmniej 9 gramów. Wszystkie próbki kału będą przetwarzane przy użyciu FECPAKG2, duplikatu grubego rozmazu Kato-Katz (najczęściej stosowana technika liczenia jaj w kale (FEC)) i Mini-Flotac (nowa technika, która ma czułość co najmniej równą czułości Kato- Katza). Wszystkim dzieciom oddającym próbkę kału zostanie podana pod nadzorem pojedyncza doustna dawka ALB 400 mg. Czternaście do 21 dni po leczeniu, druga próbka kału zostanie pobrana od wszystkich dzieci, u których na początku badania wykazano dodatni wynik na obecność jakiegokolwiek gatunku STH, w celu określenia FEC.

Przy każdym pobieraniu próbki 2 x 1 gram kału przechowuje się w środku konserwującym do dalszej analizy molekularnej. Przechowywany stolec zostanie wysłany do Belgii w celu ekstrakcji DNA i analizy qPCR. Podzbiór próbek zostanie przeanalizowany przez pirosekwencjonowanie w celu oceny polimorfizmów pojedynczych nukleotydów w genie b-tubuliny.

Przeprowadzone zostanie również łączenie przechowywanych próbek w celu porównania z wartościami uzyskanymi z analizy poszczególnych próbek.

Postępowanie z danymi Dane będą najpierw rejestrowane na specjalnych formularzach zapisów badań. Wyniki te zostaną następnie wprowadzone do specjalnie zaprojektowanych plików Excel przez dwóch różnych urzędników zajmujących się wprowadzaniem danych, aby zminimalizować błędy w danych spowodowane nieprawidłowym wprowadzaniem danych.

Zarządzanie studiami Studia w różnych ośrodkach będą organizowane i wspierane przez Uniwersytet w Gandawie. Członkowie zespołu projektowego będą podróżować do poszczególnych ośrodków badawczych, aby przeszkolić miejscowy personel w zakresie różnych technik koprologicznych oraz zapoznać ich z protokołem i dokumentacją próbną.