Validando diagnósticos baseados em ovos e marcadores moleculares para a propagação da resistência anti-helmíntica (StarwormsWP1)

Histórico Os helmintos transmitidos pelo solo (STHs) são um grupo de vermes parasitas que infectam milhões de crianças em países subtropicais e tropicais, resultando em desnutrição, atraso no crescimento, retardo intelectual e déficits cognitivos. Para controlar a morbidade por esses vermes, são implementados programas de vermifugação em escolas, nos quais são administrados medicamentos anti-helmínticos a crianças sem diagnóstico prévio. A luta contínua contra esses vermes é auxiliada pela Declaração de Londres sobre Doenças Tropicais Negligenciadas, que ajuda a sustentar e expandir o programa global de doação de medicamentos, resultando em um crescimento sem precedentes de programas de desparasitação. para ilustrar, nos últimos quatro anos, a cobertura da administração em massa de medicamentos (MDA) dobrou de 30 para 60%, e esforços globais contínuos são feitos para atingir a marca de 75% até 2020.

Ameaças Embora o louvável objetivo de longo prazo seja eliminar os STHs como um problema de saúde pública até 2020 e, eventualmente, declarar áreas geográficas específicas livres de infecções, esse alto grau de pressão dos medicamentos torna os programas de desparasitação vulneráveis ​​ao desenvolvimento de resistência anti-helmíntica porque os programas dependem apenas de um medicamento com eficácia às vezes abaixo do ideal e não há disponibilidade de medicamentos alternativos.

desafios

Atualmente, não existe um sistema de vigilância para monitorar o surgimento e disseminação da resistência anti-helmíntica. Ainda não está claro até que ponto a eficácia dos medicamentos pode ter diminuído e se a resistência anti-helmíntica já está presente. No entanto, o desenvolvimento de tal sistema não é simples. Os programas de desparasitação normalmente operam em ambientes com recursos limitados, e os gerentes do programa exigem alguma flexibilidade para minimizar os recursos financeiros e técnicos, ao mesmo tempo em que garantem uma avaliação confiável da eficácia do medicamento. Os obstáculos mais importantes para monitorar globalmente os padrões de mudança na eficácia dos medicamentos e disseminação da resistência anti-helmíntica são os seguintes:

• a escassez de laboratórios de diagnóstico com pessoal experiente para realizar os levantamentos e analisar e reportar os dados obtidos
• a ausência de um sistema de garantia de qualidade que garanta resultados auditáveis
• a falta de orientação na elaboração de pesquisas à medida que os programas avançam
• a falta de dados que suportem a validade de marcadores moleculares para detectar resistência anti-helmíntica em STHs humanos
• a falta de ferramentas sensíveis e pontuais que permitam a detecção de baixas frequências de resistência anti-helmíntica Objetivo principal Este projeto visa fortalecer o monitoramento e vigilância da eficácia de medicamentos e resistência anti-helmíntica em programas de STH. Como tal, apoiará programas de desparasitação em sua busca para eliminar STHs como um problema de saúde pública até 2020.

Os objetivos específicos da primeira parte do projeto são validar ferramentas de diagnóstico para monitorar a eficácia de drogas e a propagação da resistência anti-helmíntica e validar marcadores moleculares para resistência ao benzimidazol.

Protocolo do estudo Este estudo será conduzido em quatro locais diferentes na África (Etiópia e Tanzânia), Ásia (Laos PDR) e América Latina (Brasil). A seleção desses locais é baseada em sua experiência em avaliar a eficácia de medicamentos e avaliar o desempenho de ferramentas de diagnóstico, a disponibilidade de instalações de diagnóstico bem equipadas e pessoal qualificado e seu histórico nacional de MDA.

O estudo incidirá sobre crianças em idade escolar (dos 5 aos 14 anos). Na linha de base, os indivíduos serão solicitados a fornecer uma amostra de fezes recente (dentro de 4 horas) de pelo menos 9 gramas. Todas as amostras de fezes serão processadas usando o FECPAKG2, um esfregaço espesso duplicado de Kato-Katz (a técnica de contagem de ovos fecais (FEC) mais comumente aplicada) e Mini-Flotac (uma nova técnica que tem uma sensibilidade pelo menos igual à de Kato- Katz). Todas as crianças que fornecerem uma amostra de fezes receberão uma dose oral única de ALB 400 mg sob supervisão. Catorze a 21 dias após o tratamento, uma segunda amostra de fezes será coletada de todas as crianças que se mostraram positivas para qualquer espécie de STH no início do estudo para determinar os FECs.

Em cada amostragem, 2 x 1 grama de fezes é armazenado em conservante para análise molecular a jusante. As fezes armazenadas serão enviadas para a Bélgica para extração de DNA e análise qPCR. Um subconjunto das amostras será analisado por Pirosequenciamento para avaliar os polimorfismos de nucleotídeo único no gene da b-tubulina.

O agrupamento das amostras armazenadas também será realizado para comparar com os valores obtidos a partir da análise de amostras individuais.

Manuseio de dados Os dados serão primeiro registrados em formulários de registro de estudo específicos. Esses resultados serão inseridos nos arquivos Excel personalizados por dois funcionários de entrada de dados diferentes para minimizar erros nos dados devido à entrada incorreta de dados.

Gestão de estudos Os estudos nos diferentes locais serão organizados e apoiados na Universidade de Ghent. Os membros da equipe do projeto viajarão para cada local de teste individual para treinar o pessoal local nas diferentes técnicas coprológicas e familiarizá-los com o protocolo e os documentos do teste.