Biotilgængelighed af proteiner fra plantebaseret kost

Denne undersøgelse er opdelt i 4 faser. Første fase: Landbrug (år 1) Stedsbeskrivelse: Eksperimentet vil blive udført på forsøgsgården i São Paulos Agentur for Agribusiness Technology (APTA) i Ribeirao Preto, Brasilien, ved de geografiske koordinater på 21°12'26" S e 47 °51'48" N og gennemsnitlig højde på 646 m. Den årlige nedbør er omkring 1427 mm, med en gennemsnitlig maksimum- og minimumtemperatur på henholdsvis 25°C og 19,3°C. Jorden er klassificeret som Oxitol med glaet tekstur. Bønneafgrøden (Phaseolus vulgaris) vil blive dyrket på 0,50 m mellem rækkerne med 12 frø pr. lineær meter, og 2 uger efter antese (blomstring) vil vandforsyningen blive ændret med deuteriumoxid til eksperimentel udvikling. Det producerede korn vil blive høstet til eksperimentel analyse og forbrug. Forsøgsarealet vil have 5.000 m2 med almindelig bønneafgrøde til at producere tilstrækkelig mængde korn til, at forsøget kan køre. Frø vil blive tørret i en skala fra 1 til 10 kg tørre og udvalgte frø.

Næringsstofsammensætningsanalyse (år 1) Seks prøver på 100 g hver vil blive adskilt til næringsstofsammensætningsanalyser, som vil blive udført på Animal Nutrition Laboratory ved Animal Science Institute ved University of São Paulo, Brasilien. Lige efter høst vil fødevareprøverne blive vejet og tørret i et komfur med tvungen luftcirkulation ved 65 grader Celsius i 72 timer. Herefter males prøver i en mølle med 2 mm hulsigte, og der udtages en delprøve til analyse af tørmasse, protein, æterekstrakt, mineralmasse, energi, calcium og fosfor i henhold til officielle analysemetoder ( AOAC) (1996). Fiber vil blive analyseret i neutralt og surt rengøringsmiddel i henhold til reference Silva og Queiroz, 2005, og selen vil blive analyseret ifølge Olson et al., 1975. Energianalyse vil blive udført af en kalorimetrisk bombe og fedt ved ekstraktion ifølge reference Bligh og Dyer, 1959, på Nutrient Composition Laboratory ved Ribeirão Preto Medical School.

Anden fase (pilotundersøgelse), Ernæringsinstituttet (år 2) Forsøgspersoner Femten voksne frivillige vil blive rekrutteret til metodevalidering. Inklusionskriterier

• Raske, ikke-gravide voksne i alderen 18-65 år
• Tager ingen medicin, inklusive NSAID'er
• Tager ikke antibiotika inden for 4 uger efter undersøgelsen
• BMI i intervallet 18-35
• Stabil vægt Eksklusionskriterier
• Børn og ældre (over 65)
• Graviditet
• Diagnosticeret med ikke-smitsom eller smitsom sygdom
• At være under restriktiv diæt
• Antibiotika inden for 4 uger efter undersøgelse
• Medicin inden for 4 uger efter studiet Studiedesign Efter godkendelse af projektet af den lokale etiske komité og indhentet underskrevet informeret samtykke, vil frivillige blive tilbudt et testmåltid med mælkeprotein. Testproteinet vil i første omgang være sødmælksprotein, produceret med et lavt niveau af deuteriumberigelse i undersøgelsen. Dette vil tillade, at Carbon-13 enkeltcelleproteinet kan karakteriseres mod et velundersøgt animalsk protein, der vides at have høj fordøjelighed. Sporaminosyre (AA) udseende i kredsløbet (blod, spyt, urin og ånde vil også blive udtaget), og det relative udseende af test- og referenceprotein vil blive taget som et mål for relativ biotilgængelighed, som kan konverteres til et absolut mål én gang referenceproteinet er blevet karakteriseret. Den grundlæggende måling vil være af stabil isotopberigelse i individuelle aminosyrer.

Fase 1 pilotstudie, Nutrition Institute. Femten voksne frivillige vil blive rekrutteret til metodevalidering.

Tredje fase er hos 15 børn (1-3 år, med forskellig ernæringsstatus) og fjerde fase er hos 15 ældre (mere end 65 år, med sarkopeni eller ej sarkopeni).

Testmåltid 1: Bønner udblødt i 3 timer, vand kasseret og bønner kogt i 20 minutter i trykkog.

Testmåltidet adskilles ved brug af umærkede bønner i to uger. Den samme tilgang som brugt i pilotundersøgelsen af ​​mælkeprotein vil blive vedtaget for at undersøge biotilgængeligheden af ​​bælgfrugter gennem samtidig sammenligning med en beskeden mængde kulstof-13-beriget enkeltcelleprotein kombineret i det samme testmåltid.

Alle grupper vil blive analyseret madindtag vurdering, total urin nitrogen og berigelse af deuterium i protein. Fire 24-timers tilbagekaldelsesspørgeskemaer vil blive anvendt til hver frivillig i de perioder, hvor testmåltidet indtages, for at verificere protein- og kalorieforbruget. Frivillige vil blive bedt om at holde deres sædvanlige indtag for at undgå ændringer i madforbruget. Prøvernes samlede kvælstof i urinen vil blive analyseret ved Kjeldahl-metoden med ammoniummikrodiffusion. Forbindelsesspecifik isotopberigelse i aminosyrer vil blive analyseret i spyt-, urin-, åndedræts- og blodprøver. Carbon-13 i kuldioxid i vejret (CO2) og Deuterium i urinberigelse vil blive analyseret i Mass Spectrometry of Medicine School i Ribeirão Preto (FMRP-USP), Brasilien, SP.