Biotilgjengelighet av proteiner fra plantebaserte dietter

Denne studien er delt i 4 fase. Første fase: Landbruk (år 1) Stedsbeskrivelse: Eksperimentet vil utføres ved forsøksgården til São Paulos Agency for Agribusiness Technology (APTA) i Ribeirao Preto, Brasil, ved de geografiske koordinatene 21°12'26" S e 47 °51'48" N og gjennomsnittlig høyde på 646 m. Den årlige nedbøren er omtrent 1427 mm, med gjennomsnittlig maksimums- og minimumstemperatur på henholdsvis 25°C og 19,3°C. Jordsmonnet er klassifisert som Oxitol med blank tekstur. Bønneavlingen (Phaseolus vulgaris) vil bli dyrket på 0,50 m mellom rader med 12 frø per lineær meter og 2 uker etter antese (blomstring) vil vanntilførselen bli endret med deuteriumoksid til eksperimentell utvikling. Kornet som produseres vil bli høstet til eksperimentell analyse og forbruk. Forsøksområdet vil ha 5.000 m2 med vanlig bønneavling til å produsere nok kornmengder til at forsøket kan kjøres. Frø vil bli tørket i en skala fra 1 til 10 kg tørre og utvalgte frø.

Næringssammensetningsanalyse (år 1) Seks prøver på 100 g hver vil bli separert for næringssammensetningsanalyser, som vil bli utført ved Animal Nutrition Laboratory ved Animal Science Institute ved Universitetet i São Paulo, Brasil. Rett etter høsting vil matprøvene vektes og tørkes i komfyr med tvungen luftsirkulasjon ved 65 grader Celsius, i løpet av 72 timer. Etter dette vil prøver males i en mølle med 2 mm hullsikt, og det tas en delprøve for analyse av tørrmasse, protein, eterekstrakt, mineralmasse, energi, kalsium og fosfor, i henhold til Offisielle analysemetoder ( AOAC) (1996). Fiber vil bli analysert i nøytralt og surt vaskemiddel i henhold til referanse Silva og Queiroz, 2005, og selen vil bli analysert i henhold til Olson et al., 1975. Energianalyse vil bli utført av en kalorimetrisk bombe og fett ved ekstraksjon i henhold til referanse Bligh og Dyer, 1959, ved Nutrient Composition Laboratory ved Ribeirão Preto Medical School.

Andre fase (pilotstudie), Nutrition Institute (År 2) Forsøkspersoner Femten voksne frivillige vil bli rekruttert for metodevalidering. Inklusjonskriterier

• Friske, ikke-gravide voksne 18-65 år
• Tar ikke noen medisiner, inkludert NSAIDs
• Tar ikke antibiotika innen 4 uker etter studien
• BMI innenfor 18-35 rekkevidde
• Stabil vekt Eksklusjonskriterier
• Barn og eldre (over 65)
• Svangerskap
• Diagnostisert med ikke-smittsom eller smittsom sykdom
• Å være under restriktiv diett
• Antibiotika innen 4 uker etter studien
• Medisiner innen 4 uker etter studie Studiedesign Etter godkjenning av prosjekt av lokal etisk komité og innhentet signert informert samtykke, vil frivillige bli tilbudt et testmåltid med melkeprotein. Testproteinet vil i utgangspunktet være helmelkprotein, produsert med et lavt nivå av deuteriumanrikning i studien. Dette vil tillate at karbon-13 enkeltcelleproteinet kan karakteriseres mot et godt studert animalsk protein kjent for å ha høy fordøyelighet. Sporaminosyre (AA) utseende i sirkulasjonen (blod, spytt, urin og pust vil også bli tatt ut) og det relative utseendet til test- og referanseprotein vil bli tatt som et mål på relativ biotilgjengelighet som kan konverteres til et absolutt mål én gang referanseproteinet er blitt karakterisert. Den grunnleggende målingen vil være stabil isotopanrikning i individuelle aminosyrer.

Fase 1 pilotstudie, Nutrition Institute. Femten voksne frivillige vil bli rekruttert for metodevalidering.

Tredje fase er hos 15 barn (1-3 år, med ulik ernæringsstatus) og fjerde fase er hos 15 eldre (mer enn 65 år, med sarkopeni eller ikke sarkopeni).

Testmåltid 1: Bønner bløtlagt i 3 timer, vann kastet og bønner kokt i 20 minutter i trykkkoker.

Testmåltidet vil bli skilt ved bruk i to uker med umerkede bønner. Den samme tilnærmingen som ble brukt i pilotstudien av melkeprotein vil bli tatt i bruk for å studere biotilgjengeligheten til belgfrukter gjennom samtidig sammenligning med en beskjeden mengde karbon-13-anriket enkeltcelleprotein kombinert i samme testmåltid.

Alle grupper vil bli analysert matinntaksvurdering, total urin nitrogen og anrikning av deuterium i protein. Fire 24-timers tilbakekallingsspørreskjemaer vil bli brukt på hver frivillig i periodene med inntak av testmåltidet, for å verifisere protein- og kaloriforbruket. Frivillige vil bli bedt om å beholde sitt vanlige inntak, for å unngå endringer i matforbruket. Total urinnitrogen i prøvene vil bli analysert med Kjeldahl-metoden med ammoniummikrodiffusjon. Forbindelsesspesifikk isotopanrikning i aminosyrer vil bli analysert i spytt-, urin-, pust- og blodprøver. Karbon-13 i pust karbondioksid (CO2) og Deuterium i urinanrikning vil bli analysert i Mass Spectrometry of Medicine School of Ribeirão Preto (FMRP-USP), Brasil, SP.